Стимулятор иммунологической резистентности организма

ЕНИ ТЕНТУ 14 Ф Комитет Российской Федерации по патентам и товарным знакам ПИСАНИЕ ИЗО 21) 5058142 22) 24,09.92 46) 15.10.93 71) Малое п 72) Терново Рыбкина РА.;73) Малое и 54) СТИМУ ЗИСТЕНТНО Бюл. Иа 37 - 38редприятие "Европа"й АП.; Дмитриенко Н.В.; Михалев В.Ю.,Куликова СА; Чабан Л.Н.редприятие "Европа"ЛЯТОР ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕСТИ ОРГАНИЗМА(57) Использование: в медицине, а именно в фармакологии, и может быть использовано в качестве стимулятора иммунологической резистентности организма. Сущность: в качестве средства используют экстракт корня солодки, который получают путем экстрагирования корней солодки физиологическим раствором и используют для стимуляции резистентности у лиц с ослабленным иммунитетом. 1 ил, 4 таблИзобретение относится к медицине, фармакологии и иммунологии и касается способа применения водного экстракта корня солодки в качестве иммуностимулятора. Может быть использован для стимуляции резистентности у лиц с ослабленным иммунитетом.Известны фармакологические препараты, активирующие неспецифические факторы иммунитета. Однако большая часть этих препаратов избирательно влияет только на отдельные показатели иммунитета, они неэффективны при пероральном поступлении в организм или не оказывают положительного воздействия на антибактериальную резистентность.Наиболее близким по назначению аналогом является препарат кукумариозид, содержащий также как и экстракты солодки в своем составе тритерпеновые глюкозиды, положительно влияющие на активность иммунологических феноменов, Однако кукумариозид недостаточно эффективен по ряду иммунологических показателей, обладает рядом противопоказаний к применению и не обладает столь мощным общеукрепляющим воздействием на организм, как экстракты солодки, которые активно влияют на омоложение организма.Имеются сведения об антимикробных свойствах препаратов из корня солодки относительно ряда патогенных микроорганизмов (стафилококк, туберкулезные микробактерии, кишечная палочка, кандида, вагинальная трихомонада), Было установлено. что антибактериальные свойства препаратов солодки связаны с бактериостатическим действием находящихся в их составе солей глицирретиновой кислоты. Данных о положительном воздействии экстрактов солодки на иммунологическую резистентность организма не обнаружено.Целью изобретения является разработка эффективной схемы использования экстрактов солодки для стимуляции иммунологической резистентности,Эта цель достигается тем, что используемые экстракты солодки приготавливаются в условиях, при которых входящие в его состав биологически активные соединения не разрушаются, а также за счет оптимального подбора используемой дозы препарата и схемы его применения. Сущность изобретения заключается в изыскании новых средств природного происхождения для расширения ассортиментных средств профилактики и лечения,Приготовление водного экстракта корня солодки производилось путем измельче 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 ния сухого корня с дальнейшим экстра ги рованием физиологическим раствором прирн 7,0,Для оценки влияния экстрактов корнясолодки на клеточный и гуморальный иммунитет крысам со средней массой тела 240 гпрепарат вводился внутрижелудочно 4 разаиз расчета 2 мг/кг при каждом введении.Схема введения следующая: первые двавведения - ежедневно по одному введениюв день, затем двухдневный интервал междупоследующими двумя ежедневными введениями,Контрольным животным вводился физиологический раствор, В каждой группе былопо 12 животных. Через сутки после четвертого введения все крысы одновременноподвергались тестированию по следующимпоказателям:фагоцитарная активность нейтрофилов,определяемая по проценту фагоцитирующих клеток, тест-микробом служили Е,Со 1;активность комплемента сывороткикрови по 50 гемолизу;функциональная активность Т- и В-лимфоцитов, определяемая по проценту розеткообразующих клеток;уровень естественных антител к "0"сальмонеллезному антигену реакцией пассивной гемогглютинации, используя дляэтих целей стандартный диагностикумМНИИ эпидемиологии и микробиологии им,Т Н, Габричевского,Результаты исследований подвергалисьстатической обработке методом критерияФишера-Стьюдента. Изменения показателей считали достоверными при Р = 0,05,Полученные данные представлены втабл. 1.Анализ представленных в табл, 1 результатов показывает, что введение животным экстрактов корня солодки оказываетположительное влияние на большинство изиспользуемых иммунологических тестов,причем занимающих наиболее важное место среди показателей неспецифической резистентности организма,Изучение профилактического эффектаэкстракта корня солодки для повышения иммунологической резистентности организмак бактериальной инфекции проводили в модельном эксперименту на мышах массой25 - 30 г. зараженных Яа 11 гп, турЬпшпигп,Инокулят для заражения животных готовили следующим образом, Суточную культурубактерий, выращенную на мясопептонномагаре, смывали стерильным физиологическим раствором и разводили его до получения взвеси клеток с концентрацией 1 10микробных клеток в 1 мл по стандарту мут гооо 995 10 20 25 30 40 45 50 ности ГИСК им, Л,А.Тарасевича. Величину к ЛД 5 о, ЛД 1 оо микробной взвеси определяли в предварительном эксперименте по Ван дер Вардену на мышах той же партии, В модельном эксперименте использовали дозу взвеси бактерий, вызывающую у контрольных животных 100 о,-ную гибель в течение 7 суток. Схема введения экстракта солодки и затравочной дозы бактерий соответствует постановке эксперимента на крысах, Оттитрованная взвесь бактерий вводилась внутрибрюшинно через сутки после четвертой инъекции. Контрольным животным, получавшим вместо экстракта солодки физиологический раствор, вводилась та же доза бактериальной взвеси,Учет гибели животных в контрольной и опытной группах проводился в течение 7 сут,Результаты экспериментов представлены в табл, 2,Из представленных в табл, 2 результатов эксперимента видно, что четырехкратное введение экстракта солодки повышает устойчивость животных к бактериальной инфекции, что проявляется в статистически достоверном отдалении гибели зараженных животных на 6 сут, Установленный эффект не связан с бактерицидными свойствами, Протективные свойства используемого экстракта солодки являются следствием активации неспецифических факторов иммунитета, а не результатом поступления в организм вместе с экстрактом солодки компонентов, обладающих бактерицидными свойствами, Это заключение основано на результатах прямого определения бактерицидных свойств используемого водного экстракта корня солодки, который изучали методом посева тест-культуры ЯсарЬу 1 ососсцз ацгецз Ри Яа 11 п. турпупцг 1 цгп на питательный агар, содержащий в своем составе 2-ный раствор применяемого экстракта, В питательный агар контрольных чашек вносили вместо экстракта солодки соответствующий объем физиологического раст,ора. Результаты этих экспериментов представлены в табл, 3,На чертеже представлены фотокопии бактерий в чашках Петри. Чашка 1 - посев культуры ЯтарЬу 1 ососсцз ацгецз опыт, Чашка 2 - соответствующий контроль. Чашка 3 - посев культуры Яа 11 а. 1 урйупцг. опыт, Чашка 4 - соответствующий контроль,Иэ представленных результатов следует, что число выросших колоний на средах с экстрактом корня солодки не меньше. чем в контрольных чашках, а в случае посевов культуры ЯтарЬу 1, ацгецз их на среде с экстрактом даже значительно больше. Об отсутствии антимикробной активности у экстракта корня солодки свидетельствует также и характер роста колоний, Их внешний вид и число свидетельствует лишь о положительном влиянии содержимого испытываемого экстракта на рост бактерий, что по-видимому, объясняется наличием в его составе легко усваиваемых питательных веществ (витаминов, сахаров). Возможно их наличием и объясняется адаптогенное воздействие экстрактов солодки на организм к влиянию вредных факторов,Повышение эффективности стимулирующего воздействия экстракта солодки на устойчивость к развивающейся инфекции удается добиться путем дополнительных подкрепляющих введений этого вещества на 3-и и 5-е сутки после заражения животных смертельными дозами бактерий (см. табл. 4), Из представленных в табл, 4 данных можно отметить, что положительный эффект длительного введения экстракта солодки в период развития бактериальной инфекции проявляется уже через сутки после введения.Таким образом на основании полученных результатов следует, что выедание водного экстракта корня солодки оказывает стимулирующее влияние на активность факторов иммунитета, что способствует повышению иммунологической резистентности от бактериальной инфекции,(56) Вичканова С,А. и др, Вопросы изучения и использования солодки в СССР. Наука, 1966, с. 176 - 179.2000799Таблица 1Воздействие водного экстракта корня солодки на иммунную систему при четырехкратном внутрижелудочном введении в дозе 1 мл/кн (анализ через сутки после четвертого введения) Наличие статистически достоверного различия между контролем и опытом,Таблица 2 Отдаление срока гибели у мышей, получавших экстракт корня солодки до заражения смертельной дозой бактерий.Наличие статистически достоверного различия между контролем и опытом.10 2000799 Таблица 3Анализ бактерицидного действия водного экстракта корня солодки на культуру бактерий Наличие статистически достоверного различия между контролем и опытом,Таблица 4 Эффективность экстрактов корня солодки при дополнительном его введении в период развития бактериальной инфекции Вводимые Количество вве- Число препараты дений экстрак- живоПроцент выживших животных за период,п ошедший после за ажения1 сут, 2 сут,3 сут, 4 сут. 5 сут 6 сут. 7 сут та солодки тных Вопыте Экстракт корня солодки ЛДоо микробных клеток16 6 (2 43,7 43,7 по к епляющие Физиологический раствор 93,7 50,0 25,0 18,7 18,7 0 ЛД 1 оо микробных клетокконт оль 16 Наличие статистически достоверного различия между контролем и опытом, Наличие статистически достоверного различия между показателями группы животных,получавших экстракт солодки только до заражения бактериями (4 введения) и группойживотных, получавших подкрепляющие введения в период развития интоксикации,2000799 Составитель И,ГубареваТехред М Моргентал Корректор Е,Папп РедакторЗаказ 3096 Тираж Подписное НПО Поиск" Роспатента113035, Москва, Ж, Рэуи:окая 1.эб 4/5 Производственно-издательский ком,иьэтэ 1-Ужгород ул.Гагарина, 101 Формула изобретения СТИМУЛЯТОР ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТ НОСТИ ОРГАНИЗМА1. Применение экстракта корня солодки (9 усуггЫа) в качестве стимулятора иммунологической реэистентности организма,122. Применение по п,1, отличающееся тем, что используют экстракт корня солодки, полученный путем обработки корня солодки физиологическим раствором при рН 7,0,