Способ количественного определения фурагина

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 1 б 98716 А 1 39 ЕТЕНИ ИСАНИЕ ТЕЛЬСТВУ ТОРСКОМУ нски(71) Курский государственный медиинститут(56) Коваленко Л.И., Поравлева М,Иственное спектрофотометрическоеление фурагина и фурадонина. - Сдокл.конф."Некоторые проблемы бции", М 1 ММИ им. Сеченова, 1973,Курнна Н.В. Спектрофотомвизначення лКарських речовин похнтрофуран 1 в, - Фармацевтический1973, ЬЬ 6, с, 15-18. Изобретение относится к фармацевтической химии и может быть использовано для количественного определения фурагина как в таблетках, так и в сложных лекарственных формах,Известен способ количественного определения фурагина в порошках и таблетках путем выполнения растворением анализируемой пробы в смеси диметилформамида и диоксана (1:1) с дальнейшим раэбавлением полученной смеси. Фотометрирование полученного окрашенного продукта проводят при длине волны (Л) 403 нм.Недостатком этого способа является большое. количество операций и связанная с этим трудоемкость проведения опыта, а также использование большого количества реактивов, низкая стабильность полученного окрашенного продукта.Наиболее близким к предлагаемому является способ, согласно которому анализи)5 6 01 й 21/78, 33/5(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУРАГИНА(57) Изобретение относится к фармацевтической химии и может быть использовано для определения фурагина в лекарственных формах. Цель изобретения - повышение селективности определения, Пробу нагревают с концентрированной серной кислотой на водяной бане в течение 1 ч, Затем фотометрируют полученный раствор на длине волны 590 нм и по величине оптической плотности определяют содержание фурагина в пробе, 4 табл. ю руемый препарат обрабатывают 50-ной серной кислотой и оптическую плотность окрашенного продукта измеряют в ультрафи олетовой области спектра. (Однако при анализе содержания фура- сЦ гина с помощью данного способа в лекарст- ОО венных формах выявлены следующие недостатки; при спектрофотометрическом определении содержание исследуемого препарата в процессе нагревания его с 50-ной серной кислотой опыт необходимо проводить в защищенном от света месте, окраска получаемого окрашенного продукта ф не стабильна, метод характеризуется большой относительной ошибкой ( .ф. 2,56).Реакция не отличается специфичностью: определение всех производных 5-нитрофуранов основано на измерении светопоглощения в ультрафиолетовой области спектра. Кроме того, при анализе лекарственных препаратов возможно влияние.40 0,54 50 50 0,5560 0,5590 0,55120 0,55150 0 55 55 П р и м е р 1, Фотоэлектроколориметрическое определение фурагина в порошке,Точную навеску порошка фурагина(около 0,01 г) количественно переносят в мерпримесей на измеряемую оптическую плотность получаемых окрашенных продуктов,что может привести к серьезным ошибкампри проведении аналитических исследований. 5Цель изобретения - повышение селективности.Поставленная цель достигается обработкой анализируемой пробы концентрированной серной кислотой с последующим 10нагреванием на кипящей водяной бане втечение 1 ч, Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют в помощью фо- .тоэлектроколориметра КФКприсветофильтре кафф = 590 й 10 нм в кювете с 15толщиной слоя 50,0 мм или с помощьюспектрофотометра СФпри длине волныЛ= 590 нм в кювете с толщиной рабочегослоя 10,0 мм, В качестве раствора сравнения используют концентрированную серную кислоту.Выбор оптимальных условий проведения реакции фурагина с концентрированной серной кислотойПредварительными исследованиями установлено, что присутствие в реакционнойсмеси даже минимальных количеств водымешает взаимодействию, поэтому импольэуют концентрированную серную кислоту,Выбор оптимального времени нагрева 30реакционной смесиИсследования проводят на фотоэлектроколориметре КФКпри значении3 фф= 590 + 10 нм, соответствующем максимальному значению оптической плотности полученных окрашенных растворов вкювете с толщиной рабочего слоя 50,0 мм.Значение оптической плотности приведенокак среднее трех независимых измерений ивыведено из значений величины пропускания,Время нагревамин ную колбу на 250 мл, растворяют в концентрированной серной кислоте и обьем раствора в мерной колбе доводят концентрированной серной кислотой до метки (раствор А). 50,0 мл полученного раствора А переносят в мерную колбу на 250 мл и доводят до метки конЦентрированной серной кислотой(раствор Б), После тщательного перемешивания в мерную колбу на 50,0 мл вносят по 1 мл исследуемого раствора Б, а 1 мл которого содержится 8 мкг фурагина, общий объем раствора доводят концентрированной серной кислотой до 25 мл. Раствор в мерной колбе на 50,0 мл нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 ч, охлаждают и измеряют оптическую плотность раствора с помощью фотоэлектроколориметра КФ Кпри Лэфф = 590 + 10 нм в кювете на 50,0 мм.В качестве раствора сравнения применяют концентрированную серную кислоту,Расчет содержания препарата в пробах вычисляют по предварительно построенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика,Построение калибровочного графика В колбы на 50 мл вносят по 1,0; 3,0; 5,0;10,0; 20,0 мл стандартного раствора фурагина в концентрированной серной кислоте, содержащего 8 мкг фурагина в 1 мл (раствор Б), прибавляют недостающий до 25 мл объем концентрированной серной кислоты, Содержимое колб тщательно перемешивают, нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 ч и после охлаждения измеряют оптическую плотность полученных окрашенных растворов с помощью фотоэлектроколориметра КФКпри Лэфф = 590 + 10 нм в кювете с толщиной слоя 50,0 мм, используя в качестве раствора сравнения концентрированную серную кислоту.В табл, 1 приведена зависимость оптической плотности окрашенных растворов от количества фурагина, взятого на реакцию, и расчет уравнения калибровочного графика для фотоэлектроколориметрического определения фурагина с помощью фотоэлектроколориметра КФКв кюветах 50,0 мм при светофильтре кафф - 540 + 10 нм,Из данных приведенных в табл, 1, следует. что светопоглощение окрашенных растворов фурагина подчиняется закону Бугера-Ламберта-Бера в пределах концентраций 8-160 мкг в 25 мл конечного фотометрируемого раствораДанные зависимости светопоглощения окрашенных растворов от количества взятого фурагина использованы для расчета па 1698716раметров уравнения прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика, имеющего общий вид0=1 сХ+Ь,где О - оптическая плотность;М - коэффициент пропорциональности, который равен тангенсу угла наклона калибровочного графика к оси абсцисс; 10Х - содержание определяемого вещества в анализируемой пробе, мкг;Ь - константа, указывающая, в каком месте прямая пересекает ось ординат.С учетом рассчитанных параметров 1 и 15 .Ь уравнение прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика для фотозлектроколориметрического определения фурагина, имеет следующий вид: 20О = 0,002 Х + 0,029.В табл, 2 приведена зависимость оптической плотности окрашенных растворов от 25 количества фурагина, взятого на реакцию. и расчет уравнения калибровочного графика для спектрофотометрического определения фурагина с помощью спектрофотометра СФв кюветах 10,0 мм при длине волны 30 А= 590 нм.П р и м е р 2, Количественное оп ределение фурагина в таблетках по 0,05 г.Точную навеску хорошо растертой массы десяти таблеток фурагина (около 1 г) рас творяют в химическом стакане в 50 мл диметилформамида, Полученный раствор фильтруют через предварительно обработанный диметилформамидом бумажный фильтр (красная полоса) в мерную колбу на 40 250 мл, тщательно перемешивают и общий объем раствора в колбе доводят диметилформамидом до метки, В колбу на 50,0 мл помещают 1-2 мл полученного раствора, диметилформамид выпаривают на кипящей 45 водяной бане, к сухому остатку добавляют 25 мл концентрированной серной кислоты. Полученный раствор нагревают в течение 1 ч на кипящей водяной бане, охлаждают и окрашенный раствор фотометрируют с по мощью фотоэлектроколориметра КФ Кпри светофильтре Лэфф = 590 + 10 нм в кювете на 10,0 мм. В качестве раствора сравнения используют концентрированную серную кислоту, 55Расчет содержания фурагина в анализируемых таблетках производят по калибровочному графику или по уравнению прямой,соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика,В табл. 3 приведены результаты количественного определения фурагина в таблетках по 0,5 г фотоэлектроколориметрическим методом,Из данных табл. 3 следует, что ошибка определения фурагина в таблетках по 0.05 г предлагаемым способом составляет 2,4.П р и м е р 3. Спектрофотометрическое определение фурагина в порошке.Точную навеску фурагина (около 0,01 г) количественно переносят в мерную колбу на 250 мл, растворяют в концентрированной серной кислоте и объем раствора в мерной колбе доводят концентрированной серной кислотой до метки раствор А), Раствор тщательно перемешивают. 1 мл полученного раствора А вносят в мерную колбу на 50 мл и общий объем жидкости доводят концентрированной серной кислотой до 25 мл. Колбу нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 ч. охлаждают и измеряют оптическую плотность полученного окрашенного раствора с помощью снектрофотометра СФпри л, = 590 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют концентрированную серную кислоту. Расчет содержания препарата в пробах производят по предварительному построенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика,Построение калибровочного графика.В колбы на 50,0 мл вносят по 1,0; 3,0;5,0; 10,0; 20,0 мл стандартного раствора фурагина в концентрированной серной кислоте, содержащего 40 мкг в 1 мл раствора. Во все колбы добавляют недостающий до 25 мл объем концентрированной серной кислоты. Содержимое колб нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 ч, охлаждают и проводят измерение оптической плотности окрашенных растворов с помощью спектрофотометра при А = 590 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения концентрированную серную кислоту.Результаты опытов приведены в табл, 2. Как следует иэ данных табл, 2, светопоглощение окрашенных растворов подчиняется закону Бугера-Ламберта-Бера в пределах концентраций 40 - 400 мкг фурагина в 25 мл конечного фотометрируемого раствора.Данные табл. 2 используют для расчета параметров М и Ь уравнения прямой, соответствующей прямолинейному участку ка 1698716О = 0,0008 Х + 0,020,ученного раствора, диметилформамид выпаривают на кипящей водяной бане, К сухому остатку добавляют 25,0 мл концентрированной серной кислоты, полученный раствор нагревают в течение 1 ч на кипящей водяной бане, охлаждают и окрашенный раствор фотометрируют с помощью спектрофо 50 либровочного графика методом наименьших квадратов,Уравнение прямой, соответствующее калибровочному графику для спектрофотометрического определения фурагина, имеет вид В табл. 4 приведены результаты количественного определения фурагина в порошкефотоэлектроколориметрическим и спектрофотометрическим методами.Данные, полученные при построениикалибровочного графика для спектрофотометрического определения фурагина, использованы для расчета значения удельного(Е 1 с ) и молярного(е 1 См) коэффициен 1% 1 мта светопоглощения окрашенного раствора,образующегося при взаимодействии фурагина с концентрированной серной кислотой,Удельный коэффициент светопоглоще 0ния равен Е 1) =201,08,Молярный коэффициент светопоглощения равен (е 1 ) =5312,83,1 мП р и м е р 4. Количественное определение фурагина в таблетках по 0,05 г спектрофотометрическим методом.Точную навеску хорошо растертой массы десяти таблеток фурагина (около 1 г) растворяют в химическом стакане 50 млдиметилформамида. Полученный растворфильтруют через предварительно обработанный диметилформамидом бумажныйфильтр (красная полоса) в мерную колбу на250 мл. Нерастворившийся остаток в химическом стакане еще дважды обрабатываютновыми порциями ДМФ по 50 мл и получен. ные растворы фильтруют в ту же мернуюколбу на 250 мл, Общий объем раствора вколбе доводят диметилформамидом до метки. В колбу на 50,0 мл вносят 1-2 мл полтометра СФпри длине волны Л = 590 нм в кювете на 10,0 мм. В качестве раствора сравнения используют концентрированную серную кислоту, Расчет содержания фурагина в анализируемых таблетках производят по предварительно построенному калибровочному графику или по уравнению прямой. 10 15 20 25 г 30 35 40 45соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика,Результаты количественного определения фурагина в таблетках по 0,05 спектрофотометрическим методом представлены в табл, 3,Данные, приведенные в табл. 3, позволяют сделать вывод о том, что с помощью данного способа можно определить содержание фурагина в таблетках по 0,05 г с относительной ошибкой й 1,7%,П р и м е р 5, Определение фурагина в моче.При клинических исследованиях возникает необходимость определения концентрации фурагина в моче больного. Ниже приведены спектры фурагина в моче, обработанной по предлагаемому и известному способам, Для этого определенное количество аналйэируемой мочи (раствора препарата в моче) пускают на анализ (значение оптических плотностей приведены как среднее трех независимых измерений). Предлагаемый способ Л,нм АИзвестныйЛ,нм А 0.662 0.455 0,341 0.311 0297 0,288 0,277 0,263 0.255 В результате приведенных примеров доказана селективность способа с использованием аппаратуры, которой располагают аптечные службы и клинические лаборатории. Формула изобретения Способ количественного определенияфурагина, заключающийся в обработке пробы серной кислотой, измерении оптической 400 410 420 430 440 450 460 470 480 490 500 510 520 530 540 550 560 580 590 0,042 0,041 0,040 0,041 0,043 0,050 0,058 0,077 0,091 0,116 0,136 0,167 0,201 0,258 0,298 0,255 0,223 0,305 0,363 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 320 330 340 350 360 370 380= 0,0008 Х + 0,02 плотности полученного раствора и определении концентрации фурагина по значению оптической плотности, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью увеличения селективности,6 Х 435,6 - 728 Х 2,1 6 х 150464 - 728 150464 Х 2,18 - 728 Х 372800пробу нагревают на водяной бане с концентрированной серной кислотой в течение 1 ч, а измерение оптической плотности производят на длине волны 590 нм.513 1698716 14 аю в е Номер взято на ана- Значение оптилиз мкг ческой плотности мкгИетрологические характеристики Прибор юКФК12345 93,60 97,40 96,20 93,70 97,5 о Х 96,72С 1,876 Х 0,832 о,чэ" 231А ф 238и9672+231Х а 9 о 240О,З 376 Х 0,5981 оФ 5 1,660Л1,690и96240 й 650 40,00 63,00 26,10 63,20 50,8037,50 80,90 27,00 62,40 4950 0,13 0,25 0,10 0,20 0,17 Сф12 3 4 5 96,100 96 500 98,300 99,600 96,500 36,400 81800 27,300 63,100 5 О,1 ОО 40,00083,оо26,10063,20050,800 0,174 0,347 0,130 0,272 0,221 Таблица чНай еноНет логические Прибор Номер Взято на ана- Значение оптилиз, мкг ческой плот- ности д ромкгхарактеристикиЬ 96,30 9950 97,70 100,.10 96,90 Хи 985061,51665 Х д 067622 фчэ1,8626А1,91и " 9 о 5186Х " 99,080б " 0,87582 о к " 1,08736 Хф 0392А1,0974И99 08+1 09иы 4 ееАвваевег 41,30163,3060,6 о126,40101,80 39,30162,5059,20126,50100,70 0,14 0,48 0,12 0,31 КФК"2 12 3 4 5 0,182 0,672 0,261 0,525 0,419 40,600163,00060,300126,20099,700 98,4009999,50099,ооо97,900 41,300 183,300 60,600 126,400 101,600 Сф12 3 4 5 Составитель А.ВоробьевТехред М,Моргентал Корректор Т,Малец Редактор М.Петрова Заказ 4388 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101