Способ получения энтомопатогенного биологического препарата

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭНТОМОПАТОГЕННОГО БИОЛОГИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА(57) Использование: иэобретени к сельскому хозяйству и может б зовано для борьбы с копорадс озимой совкой и другими вид мых, Сущность: способ попуче патогенного биологического заключается в разведении насек ина Ацгот 1 з зедетца 5. при оп лабораторных режимах и корме гусениц нематодами РГ 1 зт 1 опсЬ и последующем приготовлении ровэнного препарата, 3 табл. тит,П,М бе с коь ВПС я побиотными рад, с,культуры для выращивания гусениц озимой совки используют стерильную торфяную почву при температуре 26-28 С, относительной влажности воздуха 60 - 80 и длине светового дня 16-18 ч.П р и м е р, Способ включает поточное круглогодичное разведение озимой совки, заражение гусениц, сбор погибших насекомых и культивирование в них нематод, сбор нематодной биомассы, концентрирование, стандартизацию и хранение нематодной суспензии. В качестве садков для культивирования озимой совки используют вазоны для выращивания растений с верхним диаметром 120 и нижним диаметром 85 мм и высотой 115 мм или садки других размеров, Емкости устанавливали попарно один над другим. стыкуя широкими отверстиями, 8 нижние вазоны насыпали 50 - 200 г впажной 15-20 стерильной почвы, на которую устаГОСУДАРСТВЕН ЮЕ ПАТЕНТНВЕДОМСТВО СССР(56) Использование нематод в борьлорадским жуком.Информационный бюллетенМОББ - Международная оргэниэациологической борьбе с вредными живи растениями. 1987, М 18, Ленинг52-54. Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовамо при борьбе с колорадским жуком, озимой совкой и другими видами вредителей.Целью изобретемия является повышение выходе продукта и снижение его себе- СТОИМОСТИ.Способ предусматривает разведениенасекомого-хозяина на искусственном корме. заражение гусениц нематодами и приготовление препарата, причем для наработки препарата при поточном круглогодичном разведении используют нематоды Рг 1 зтопсйоз цпИогв)з, которыми заражают гусениц озимой совки Ацгобз зе 9 еьщ Зсйа в качестве корма для гусемиц используют картофель, морковь. пшеничные отруби и воду с добавками витаминов - аскорбиновой и фолиевой кислот. в качестве субстрата е относится ыть испольким жуком, ами насекония энтомопрепара а ОМОГО-ХОЗЯ редепенныхзаражении оз цпНогглз концентри 182269140 45 50 55 нэвливали поилку (донышко или крышку пластмассовой чашки Петри ф 40 мм), а нэ нее помещали ватный тампон, смоченный сахарным сиропом (5-ный водный раствор). На землю помещали по 5 куколок озимой совки (2 самки - 3 самца), потемневших перед вылетом бабочек на 12-14 день инкубации. В каждую пару сэдков помещали листы фильтровальной бумаги, сложенные в виде гармошки, на которые самки откладывали яйца в течение 10 - 14 дней.После начала откладки бабочками яиц в чистые вазоны насыпали стерильную сухую землю. Поверх земли насыпали тонкий слой сухих пшеничных отрубей (5-10 г), Туда помещали поилки-донышки чашек Петри с ватными тампонами, смоченными раствором витаминов(0,001 аскорбиновой кислоты и 0,0001 фолиевой кислоты, растворенных в воде). В каждую пару вазонов помещали по 1 гармошке из фильтровальной бумаги с яйцами, отложенными самками в течение 1-2 суток(100-300 яиц). Отродившиеся гусеницы зарываются в землю и выходят питаться ночью.По достижении гусеницами 4 - 5 возраста их рассаживают по 5-7 особей в каждую пару вазонов и выращивают до окукливания, так же и младшие возраста. Гусеницы е почве окукливаются в колыбельках из склеенных частиц почвы. Куколок вынимают иэ почвы и инкубируют е чашках Петри на влажной почве до потемнения имагинальных дисков. При массовом выращивании при температуре 26 - 28 С, относительной влажности воздуха 60-80, влажности почвы 10-15, и длине светового дня 16-18 ч, освещенности 1200 лк. гусеницы достигают 3 - 4 возраста (возраста наиболее пригодного и благоприятного для заражения нематодами) через 15 - 17 суток после внедрения в землю после отрождения,Выбор основных параметров развития озимой совки осуществляли следующим образом,Изучали влияние корма, субстрата для обитания насекомых и физических факторов при разведении озимой совки. В табл. 1 представлены результаты исследований по влиянию корма и субстрата на выход конечного продукта.В табл. 2 представлены результаты исследований по влиянию корма, субстрата и физических факторов на активность озимой совки.Таким образом, наиболее благоприятными из испытанных параметров можно считать сочетание следующих факторов: влажность почвы - менее 15, влажность воздуха 60 - 80;ь, температура воздуха 265 10 15 20 25 30 35 28 С, освещенность 1000-1200 лк и длина светового дня 16-18 ч. Освещенность необходима для беэдиапаузного развития гусениц, При изменении режима освещенности гусеницы впадают в спячку и погибают. Торфяная почва оказалась более благоприятная для содержания гусениц, чем гумусная.Наиболее благоприятный корм - сухие пшеничные отруби с подкормкой морковью, картофелем и раствором витаминов (аскорбиновая и фолиевая кислота).Гусениц, отобранных для заражения, инваэировали нематодами иэ расчета 50- 100 личинок/гусеницу. Гибель насекомых от заражения наступала на 2-3 сутки после заражения. Заражение осуществляли в чашках Петри по 10-20 особей в каждой. Инокулюм наносили в водном растворе нэ фильтровальную бумагу, которой выстилали донышки чашек Петри, прежде чем поместить туда гусениц.Погибших насекомых, инвазировали нематодами, раскладывали на платформы иэ перевернутых (меньшего размера) чашек Петри, обернутых фильтровальной бумагой, которые помещали в чашки большего диаметра с тонким слоем воды на дне. Воду с отловленными нематодами сливали ежедневно. Нэ каждую платформу помещали по 10-15 особей,Суспензию нематод отстаивали в течение суток, сливали супернатан и добавляли формалин в количестве 0,01 ь, после чего хранили е течение 1 - 1,5 года в холодильнике при температуре -4-6 С.Сравнительная характеристика наработки препарата на предлагаемом объекте и личинках большого мучного хрущака представлены в табл, 3. Формула изобретения 1. Способ получения энтомопатогенного биологического препарата, включающий разведение насекомого-хозяина, заражение гусениц нематодами и последующее приготовление препарата, о т л и ч а ю щ ий с я тем, что в качестве насекомого-хозяина используют Адгоз зе 9 есогп Я, а для заражения гусениц используют нематоды Рг зтопсйцз опИогв 3.2, Способ поп.1, отличающийся тем, что при разведении Адгобз зедева 8, используют в качестве корма картофель, морковь, пшеничные отруби и воду с добавлением витаминов - аскорбиновой и фолиевой кислот.3. Способ по и. 1, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что разведение гусениц Адго 11 з ведете 8, осуществляют при температуре1822691 качестве субстрата используют стерильнуюторфяную почву.Таблица 26 - 28 оС, относительной влажности воздуха 60-80, длине светового дня 16-18 ч, а в Влияние корма и субстрата на повышение выхода продукта Выживаемость до Выходконечного Параметры Количество немаВес гусениц,Ч 1 воз"раста,продукта,со,млн 1 1(среда Борисовой) 60 69,5 1,2 72 беэагаровый (БП) 75 101,3 105 Порошковый (беэ подкормки) 40 270 21,9 0,7 Порошковый + витамины 103,6 81,0 1,4 74 100 Порошковый М картофель + морковь + витамины С и С, (г 1 редлагаемый) 117, С 91,5 113 Субстрат Сухие пшеничные отруби 112,0 87,6 80 со оо Гумус . почва Торфяная почва 90 1)5 Таблица 2 Влияние кориа субстрата и Физических Факторов на развитие и активность озимой совкиПаране тияст сениц балла 1100 орошковый кори (отуби) без подкормки 28 ороаковьм кори (отуби) с подкормкойитаминами С и Вс 66 76 31 96 Агаровый корм (да Борисовой)Безагаровый кпр(БП) Вес гусениц со 1 ОС яиц,г 11 ч,О 135, О тод со1 СО яицозимой 56,3 82,1 8 о105,5 108,1 110,0 130,4(отруби) с подкормкой витаминами С и Ос+ +картофель + морковь 68 1460 405 468Субстрат для обитания насекомых Сухие пщеничные отруби 62 388 425 374 425 402 462 1380 1296 1472 Гумусная почва 66 ТорФяная почва 68 Физические Факторы Олажность почвы, В 68 56 29 10-15 280 332 236 305 166 270 15"25свыще 25 731 475 Олажность воздуха, Ф 20 е 60 288 305 326 360 318 332 54 60 65 860 60"80 1021 80 е 100аТемпература воздуха, С 1220 10 е 15 16-17 18 е 23 2425 26 в 28 29"30 Освещенность, лк 335 342 343 360 332 338 менее 1000 1000"1200 фг, свыще 1200 53 63 69 1020 1 114 1092 Длина дня, ч 14 е 16288 366 396 55 308 424 430 92111201460 16 е 18 64 18-.20 69 веете ев в е тв тв еет еМП р и м е ч а н и е, 1 - балл - гусеницы вялые, передвигаются струдом,2 " гусеницы передвигаются медленно приприкосновении не пытаются бежать3 " гусеницы быстро передвигаются, приприкосновении пытаются убежатья остальные параметры во всех вариантахопыта;субстрат " торФяная почва кормотруби с подкормкой витаминамн + картофель, морковь 16 23 41 50 68 40 268 472 1120 1280 1483 960 150 163 224 245 343 364 374 407 362 430 1"0 2201822691 Таблица 3 Сравнительная характеристика использования разных видов насекомых для воспроизводства пристионхусСоставитель 6.ПисаревТехред М,Моргеитал Корректор Л.Филь Редактор Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина. 101 Заказ 2164 Тираж Подписное 8 НИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035.Москва,Ж-ЗЬ, Раувская наб., 4/5