Способ получения средства, обладающего ранозаживляющим и антимикробным действием

)5 А 61 К 35/78 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ АТЕНТ пасным ой сущ(21) 4908453/14(71) Харьковское производственное химикофармацевтическое объединение "Здоровье"(73) Харьковское производственное химикофармацевтическое объеди н ение "Здоровье"(56) Авторское свидетельство СССРВ 1670847, кл, А 61 К 35/78, 1989(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО РАНОЗАЖИВЛЯЮЩИМ ИАНТИМИКРОБНЫМ ДЕЙСТВИЕМ Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается получения средства, обладающего ранозаживляющим и антимикробным действием.Известен способ получения средства "хлорофиллипт", обладающего ранозаживляющим и антимикробным действием, путем экстракции листьев эвкалипта шарикового 96-ным этанолом, упаривания, очистки раствором серно-кислой меди, извлечения целевого продукта бензолом и повторного упаривания для получения сухого экстракта (см,а,с СССР М 801134, кл, А 61 К 35/78, 1977).Недостатком известного способа являются ограниченность сырьевой базы, повышенная аллергенность препарата и использование при производстве хлоро.,Ж , 1774871(57) Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается способа получения средства, обладающего ранозаживляющим и антимикробным действием, Цель изобретения - повышение выхода целевого продукта. Сущность изобретения заключается в обработке листьев грецкого ореха (Задапз геда Е,) хлороформом в соотношении 1:3-6, высушивании, экстракции сырья 70 - 75- ным этанолом дважды в соотношении 1:6 - 8, упаривании экстракта и высушивании. Положительный эффект заключается в повышении выхода до 10,7, 2 табл,филлипта бензола, относящегося к одля здоровья людей веществам,Наиболее близким по техническности к заявляемому способу является выбранный в качестве прототипа способ получения средства, обладающего раноза живляющим и антимикробнным действием, е путем экстракции растительного сырья эта- Ф нолом, упаривания, очистки, извлечения це- СО левого продукта органическим с, растворителем и повторного упаривания, В качестве растительного сырья используют листья ореха грецкого (Лод 1 апз гедда ,).Зкстракцию проводят 70 - 75 спиртом мето- , ф дом настаивания, Упаренный экстракт очи- Ы щают хлороформом в соотношении 1:1, а целевой продукт извлекают смесью этилового спирта и этилацетата в соотношении (8-9):(2 - 1). Затем. отделяют водный остаток и полученный экстракт повторно упарива 1774871ют (см. заявку М 4734579/30-14, кл, А 61 К 35/78, 1989),К недостаткам прототипа можно отнести недостаточно высокий процент выхода сухого экстракта готового продукта, а также относительная сложность способа, связанная с использованием этилацетата,10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Целью изобретения является повышение выхода готового продукта.Поставленная цель достигается тем, что при получении средства, обладающего ранозаживляющим и антимикробным действием осуществляют экстракцию растительного сырья из листьев ореха грецкого (Зцдапз гедда .) этанолом методом настаивания, отделение водного остатка и упаривание полученного экстракта под вакуумам. Отличительной особенностью заявляемого способа является то, что перед экстракцией растительное сырье обрабатывают хлороформам в соотношении 1:56 со сменой растворителя через каждые 12 ч не менее 5 раз, до полного обесцвечивания растворителя, затем сырье просушивают при комнатной температуре до удаления запаха хлороформа, после чего целевой продукт извлекают путем двойной экстракции 7075;-ным этанолом в соотношении 1;6.8 со сменой экстрагента через 24 ч с последуюаей отгонкой спирта из обьединенного экстракта под вакуумом, после чего водную фракцию ударивают под вакуумом до сухого остатка.Обработка листьев ореха грецкого перед экстракцией хлороформом в соотношении 1:5.6 со сменой растворителя до полного его обесцвечивания обеспечивает полное удаление липофильной фракции, не обладающей полезной активностью, что позволяет более полно выделить целевые гидрофильные вещества при последующей экстракции 70 - 75 Д-ным этанолом,Просушивание сырья при комнатной температуре после обработки хлороформом необходимо для полного удаления хлороформа, чтобы избежать смешивание растворителя и этанола при последующей экстракции сырья; что затрудняет более полное извлечение гидрофильных веществ, Удаление хлороформа контролируют по наличию его запаха.Экстракция сырья после удаления хлороформа 7075 этиловым спиртом в соотношении 1;68 последовательно два раза с последующей отгонкой спирта из обьединенного экстракта и упаривание водной фракции обеспечивает наиболее полное извлечение гидрофильного вещества из растительного сырья. Соотношения между количеством сырьяи хлороформом. а также этанолом определены экспериментально,Наличие перечисленных, отличительных по отношению к выбранному прототипупризнаков, позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого способа критериюизобретения "Новизна",В связи с отсутствием в известных источниках информации признаков, отличающих заявляемый способ от прототипа,можно сделать вывод о соответствии разработанного технического решения критериюизобретения "Существенные отличия". Впрототипе удаление липофильных компонентов осуществляют путем обработки водного остатка, образующегося послеэкстракции растительного сырья этанолом иудаления из экстракта этилового спиртаупариванием. Последующая экстракциясмесью этиловый спирт - этилацетат позволяет выделить только ту сумму флавоноидов, которая была экстрагирована израстительного сырья совместно с липофильными компонентами. В заявляемом же способе предварительное удалениелипофильных компонентов хлороформом доначала зкстракции дозволяет во время экстракции этанолом более полно выделитьтолько гидрофильные вещества.Положительный эффект, указанный вцели изобретения, будет получен благодарятому, что предварительное удаление из растительного сырья липофильных компонентов до начала экстракции позволяет болееполно осуществить выделение только гидрофильных веществ в процессе экстракцииэтанолом. Экстракт выделенных гидрофильных веществ проявляет ранозаживляющееи антимикробное действие.Заявляемый способ может быть реализован, например следующим образом. Сухой лист ореха грецкого вд 1 апз гера.) вколичестве 10 кг измельчали на вальцах изаливали 50 л хлороформа (соотношение1:5). Растворитель меняли через 12 ч 6 раздо полного обесцвечивания хлороформа.Затем сырье просушивали при комнатнойтемдературе до полного удаления запахахлороформа. После органолептического определения отсутствия запаха хлороформа .сырье заливали 70 этиловым спиртом в количестве 70 л (соотношение 1:7). Через 24 чпроизводили замену этилового спирта,Спиртовые экстракты обьединяли и под вакуумом на водяной бане отгоняли спирт,Упаривание экстракта этилового спиртапроизводили на аппарате "Симакс". Оставшуюся водную фракцию высушивают подвакуумом до получения сухого остатка. Вы 1774871ход готового продукта составил 10.7(упрототипа 8,0%).Готовый продукт представляет собоймелкокристаллический порошок коричйевокрасного цвета, со своеобразным запахом, 5горького вкуса, хорошо растворимый в воде,спирте и ацетоне. Рекомендованное хранение: в плотноукупоренных склянках оранжевого стекла в прохладном месте,По описанной технологии проводились 10эксперименты, в которых изменялось соотношение между массой сырья и объемомэтанола. Изменялась также концентрацияэтилового спирта. Данные экспериментовсведены в табл.1, 15На основании проведенных опытовможно сделать вывод, что оптимальной концентрацией этилового спирта является70.,75, соотношение сырья и хлороформадолжно составлять 1:56, а сырья и этилового спирта - 1:6,8. Дальнейшее повышение количества хлороформа припредварительной обработке сырья и повышение количества этилового спирта при последующей экстракции сырья 25нецелесообразно, так как выход годногопродукта практически не увеличивается.Ранозаживляющая активность исследуемого экстракта оценивалась по скоростиэпителизации поверхности пораженного 30участка кожи, Динамика изучения площадираны пораженной поверхности представлена в табл,2, и свидетельствует о выраженном и соизмеряемом терапевтическомэффекте 1 о -ного раствора гидрофильного 35экстракта из листьев ореха грецкого, полученного по заявляемому способу,Как видно из табл.2, полная эпителизация раневого дефекта при применении экстракта, полученного по заявляемому 40способу, наступает на 12 сутки, т,е. активность полученного экстракта такая же, как иэкстракта, полученного по способу-прототипу.Антимикробная активность гидрофильного экстракта листа ореха грецкого,полученная по заявляемому способу, определялась методом двукратных серийных разведений в мясопептонном бульоне с последующим посевом на МПА или среду Плоскирева для определения минимальной бактерицидной концентрации водного раствора исследуемого экстракта. В качестве тест-микробов были исследованы следующие штаммы: стафилококка М 25923, сине- гнойной палочки М 27653, протеус вульгарис ЬЬ Х 4636, 8 результате экспериментов установлено, что минимальная бактерицидная концентрация исследуемого экстракта в отношении стафилококка составляет 0,9 - 1,0-ный раствор, в отношении синегнойной палочки - 0.5 - 1.0-ный раствор и в отношении протея - 0,9.1,1- ный раствор экстракта из листьев ореха грецкого.Средство, полученное по заявляемому способу, обладает в 3 раза более выраженной антимикробной активностью в отношении изученных штаммов микроорганизмов по сравнению с "хлорофиллиптом".В сравнении со способом прототипом заявляемый способ позволяет повысить выход средства, обладающего ранозаживляющим и антимикробным действием на 0,72,9%. При этом упрощается реализация способа, так как отпадает необходимость использовать этилацетат, предусмотренный по технологии прототипа. Формула изобретения Способ получения средства, обладающего ранозаживляющим и антимикробным действием, включающий экстракцию листьев ореха грецкого(3 ицапз геда ) 70 - 75- ным этанолом, упаривание полученного экстракта. о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, перед экстракцией сырье обрабатывают хлороформом дробно в соотношении 1:5-6 и высушивают при комнатной температуре, а экстракцию проводят дважды в соотношении 1:6-8 и после упаривания экстракт высушивают,1:8 1:6О"Соотношение: .пп сырье/хлороформ 3 5 б 7 8 910 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 46 47 . 48 Соотношение: сырье/этило. вый спирт Концентрация спирта этилового, град 65 70 75 80 65 70 75 80 65 70 75 80 65 70 75 80 65 70 75 80 65 70 75 80 65 70 75 80 65 70 75 80 65 70 75 80 65 70 75 80 65 70 5 80 65 70 75 80 6,6 6,8 7,8 8,1 6,8 7,6 7,8 8,2 6,9 7,7 8,4 8,3 6,9 7,7 7,9 8,2 7,8 8,4 8,5 Э,1 8,8 10,3 10,6 9,7 9,2 10,7 10,9 9,7 8,8 9,8 10,8 9 7, 8,2 8,6 8,1 8,6 9 4 9,6 8,9 8,6 8,8 Э,Э 8,9 8,5 8,7 8,9 8,7.1 774871 Тэблица 2 Составитель В,ПросвирнТехред М. Моргентал авцова Корректор актор С,Кулакова ат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 оизводственно-издательский ко аказ 3939 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ С 113035, Москва, Ж, Раушская на 6.,4/5