Способ определения азалептина

СО 103 СОВЕ ТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИРГСГ 1 Б 11 ИКО 177423 21/64 1.11 с С,ГОСУДАРСТВЕНЕЫР 1 КОМИ 1 ГТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ К АВТО МУ СВИДЕТЕЛЬС(54) СПО НА (57) Спасо чается в т агентов концентр тых (30:7 последов тенсивно раствора оресценц флуоресц ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЗАЛЕ Л. 1 Ч.ударс нныи медицинск з,/Под ред,ер, М.: Гос,-306.391-87 (лепоыи анал -Шлеэи 961. с. 30 статья 42 запин). ние относится к анал 1 лтиче 1 менно к способам качественчественного оп е еления Дь Ы звестен способ кол ления азалептина, орении анализируе ороформа и метанолдобавлением хлор ты и измерении опти полученного раство ическим методом (В статком данноо спо точная избирательно елью изобретения яв увствительности и ичественного опоснованный на мой пробы в смеа (8,2), с последуистоводородной еских характерира спектрофотоФС 42-391-87),соба является нереде раств си хл ющим кисло стик метр Недо доста я ется - повыше- збирательности осо Изобретеской химии, аного и коли Р д азалептина.Известен способ качественного определения азалептина, основанный на использовании ТС-хролатографии препарата и просмотре зоны локализации в УФ-свете при поглощении Л =254 нм, Недостатком данного способа является недостаточная чувствител ь ность (В Ф С 42-391-87),б определения азалептина заклюом, что в качестве химических оеиспольэуют формальдегид и лрованную серную кислоту, взя), обработку которыми проводят тельно. После этого измерякт ин. сть флуоресценции получе ного при максимуме возбуждения флуии 365 нм и максимул 1 е излучения нции 410 нм, 6 табл,Поставленная цель достигается эа счетобработки анализируемой пробы формальдегидом и концентрированной серной кислотой, взятыми в соотношении (30:70),обработку которыми проводят послецовательно, после чего измеряют интенсивностьфлуоресценции полученного раствора примаксимуме возбуждения флуоресценции365 нм и максимуме излучения флуоре:ценции 410 нм.Существенными отличиями предлагаемого способа является то, что в качествехимических реагентов используют формальдегид и концентрированную серную кислоту, взятых в соотношении (30:70);обработку проводят последовательно;измерение интенсивности флуоресценции полученного раств.ра осуществляютпри максимуме возбуждения флуоресценции 365 нм и максимуме иэлучг я флуопесценции 410 нл 1,При изучении оптимальных у.повийпротекания флуоресцентной реакции установлено, что ин генсив 1 с гь ,;уГес 11 е цине изменяется в те гение ." ч ЛлчсНостьинтенсивности флуоресценции от времениприведена в табл. 1.Найдена зависимость интенсивностифлуоресценции о г соотношения взятых химических реагентов; формальдегида и концентрированной серной кислоты табл, 2,Прослежена зависимость интенсивностифлуоресценции от вида растворителя, применяемого для выяснения конечного эффектаданной реакции табл, 3, последовательностидобавления химических реагентов: формальдегида и концентрированной сернойкислоты табл, 4,П р и м е р 1. Качественное определениеазалептина в субстанции, 1-2 мгазалептинаобрабатывают последовательно формальдегидом и концентрированной серной кислотой в соотношении 130:70), яркаяфиолетовая флуоресценция, свидетельствующая о наличии азалептина в пробе, наблюдается а результате облучения полученногораствора ультрафиолетовым светом,П р и м е р 2. Количественное определение азалептина ь таблетках, 0,05 г (точнаянавеска) растертых таблеток вносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, обрабатыаа,от 30 мл фпрмальдегида и доводятконцентироаанной серной кислотой до метки(р-р А), В ряд пробирок помещают 0,2; 0,4;0,6; 0,8; 1,0: 1.2; 1,4; 1,6 мл стандартногораствооа А с концентрацией препарата1000 мкгмл и доводят растворы до 10 мл.этиловым эфиром уксусной кислоты соответственно.Полученные растворы перемешивают ифлуориметрируют одновременно с испытуемыми растворами при длинах волн возбуждения флуоресценции 365 нм и излученияфлуоресценции 410 нм.Расчет найденного количества азалептина в таблетках "Азалептин" в г осуществляют по формуле:АхРхСН х 1000000где Х - содержание азалептина, г;С - средняя масса таблетки, г;Р - обьем (мл), до которого разбавляютисходную навеску;Н - исходная навеска, г:1000000 - перевод мкг в г.Сравнение предлагаемого способа ипрототипа по избирательности и чувсталтельности в табл, 5.Результаты количественного определения азалептина в таблетках на модельных смесях обработаны статистически и представлены в табл, б.35 40 5 10 15 20 25 П р и м е р 3. Качественное и количественное определение азалептина в воздухе рабочей зоны, Исследуемый воздух со скоростью 10 л/мин аспирируют через два последовательно соединенных сосуда прибора Зайцева, Проба обрабатывается формальдегидом и концентрированнои серной кислотой (30;70), Для определения азалептина отбирают 1 мл, добавляют до 10 м., этилового эфира уксусной кислоты соответственно, Полученные растворы перемешивают и флуориметрируют.И,нтенсивность флуоресценции полученных растворов измеряют соответственно градуировочным растворам по сравнению с контролем; которые готовят одновременно и идентично пробам. Для чего в ряд пробирок вносят 0,2, 0,4, О,б: 0,8;1,0; 1,2; 1,4 и 1,6 мл стандартного раствора азалептина с содержанием вещества 1000 мкгlмл, добавляют до 10 мл этилового эфира уксусной кислоты соответственно; перемешивают и флуориметрируют при длинах волй возбуждения флуоресценции 365 нм и излучения флуоресценции 410 нм.Расчет концентрации азалептина в воздухе рабочей эоны осуществляют по формуле: где А - концентрация вещества в анализируемом растворе пробы. найденная относительно стандартного раствора,мкг/мл;В - общий объем пробы, мл;.Б - обьем раствора пробы, взятый на анализ,мл;У - объем воздуха, л, отобранный для анализа и приведенный к стандартным ус. ловиям. формула изобретения Способ определения азалептина, включающий обработку анализируемой пэобы химическими реагентами с последук щим измерением оптических характеристик полученной смеси, по которым проводят спределение, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности и избирательности способа, в качестве химических реагентов используют формальдегид и концентрированную серную кислоту, взятых в соотношении 30;70, обработку которыми проводят последовательно, после чего измеряют интенсивность флуоресценции полученного раствора при максимуме возбуждения флуоресценции 365 нм и максимуме излучения флуоресценции 410 нм,1774235 Таблица 1 Зависимость интенсивности флуоресценции от времени протекания флуоресцентной реакции.Таблица 2 Зависимость интенсивности флуоресценции от соотношения взятых реагентов,т лиц ависимость интенсивности Флуоресценции от ворителл, применяемого для выяснения ко эффекта данной реакции да растчного ид растворителя Интенсивность Флу"оресценции Нода дистиллированИетанол опа иок Реа Хлороформ Реакция не иде олу Этиловый эфир уксуной кислоты Дилетилформамид Реакция не иде ый сп, 117 Реакц не иде Гексан Бена ил Ацетон Ксилол Этаноп 10,3Е,7я не йдет1774235 Таблица 4 Зависимость интенсивности флуоресценции от последовательности добавления химических реагентов. Сд = 100 мкг/мл Формальдегид, мпт30 17,5 Формальде"гид,мл 70 30 5,0 П р и м е ч а н и е. Для выяснения конечногоэФФекта реакции берут1 мл 100 мкг/мл доводятдо 10 мл этиловым эФиромуксусной кислоты Таблица 5Сравнения заявляемого способа и прототипа поизбирательности и чувствительности Заявляемый способ Прототип По избирательности Определению не меыают:лудио мил, беФол, анаФранил, наблюдается ярко "Фиолетовая Флуо" ресценцияЯ= 365 нм; Иеаают; лудиомил, анаФра" нил, беФол и др. анти- депрессанты Я= 254 нм Я= 410 нм По чувствительностимкг/мл 100 мкг/.л1774235 Таблица с Результаты количественного определения азалептина в таблетках,на модельных смесях: и = 7, Р = 954 11/Г Найдено, г Найдено, 4 Метрологическиехарактеристики 3 4 5 6 7 Составитель Л.КотоваТехред М.Моргентал . Корректор 3 Салко Редактор Заказ 3922 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035. Москва. Ж. Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 0,027 0,026 0,024 0,026 0,027 О,026 О, 026 108,0 104,0 96,0 104,0 108, 0 104,0 104,0 104,0 4,000 1 5122 3,7048 3,56