Способ подготовки проб биологических материалов к анализу

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 19) О 1) й 1/28,(51)5 ИЗОБРЕ 2 ТЕЛЬСТВУаваев ОСУДАРСТВЕН 1 ЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР С)ПИСАНИ К АВТОРСКОМУ С(56).оЮ Апа уаса Асовс Зрестговетгу. 1989,ч,4, р. 323.(54) СПОСОБ ПОДГОТОВКИ ПРОБ БИОЛОГИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ К АНАЛИЗУ (57) Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано дляэлементного анализа биологических обьектов.Цель изобретения - повышение полноты разложения пробы при увеличении навескидо 1 Г,Способ включает размещение пробы вавтоклаве, введение а нее смеси концентрированных азотной кислоты и перекисиводорода, герметизацию автоклава, последующее воздействие электромагнитного излучения СВЧ-диапазона, охлаждениепробы, введение в пробу дополнительно0.3-0,5 мл концентрированной перекиси водорода, и повторное воздействие электромагнитного излучения,П р и м е р, Навескустандартного образца капусты (1 г) помещают в реакционную, емкость фторопластового автоклава обьемом 55 мл, приливают 8 мл смеси (:1) концентрированной НМОз 30-ной Н 202.Автоклав помещают в микроволновую печь элементного анализа биологических обьектов; Цель изобретения - повышение полноты разложения пробы при увеличении навески до 1 г. Способ включает размещение пробы в автоклаве, введение в неесмеси концентрированных азотной кислоты и перекиси водорода, герметизацию автоклава, последующее воздействие электромагнитногЬ излучения СВЧ-диапазона, охлаждение пробы, введение в пробу дополнительно 0,3-0,5 мл концентрированной перекиси водорода и повторное воздействие электромагнитного излучения, табл. и при мощности 600 Вт (давление -5,5 атм, температура. Ъ реакционной емкости автоклава " 120 С) разлагают пробу в течение 3 мин. Автоклав охлаждают в сосуде с холодной водой, осторожно открывают, выпускают остаточные пары окислов углерода и азота, приливают 0,5 мл 30-ной Н 202,закрывают. Автоклав повторно помещают в микроволновую печь на 3 мин, затем охлаж дают, открывают и полученный прозрачный раствор доводят до обьема 25 мл дистиллированной водой, Время разложения, включающее время охлаждения и перевода в раствор, 25 мин.Определение элементов проводят методами атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (АЭС-ИСП). и атомно-абсорбционной спектрометрии (ААС).В аналогичных условиях полностью окислены и проанализированы стандартные образцы зерен пшеницы и клубней картофеля. Результаты анализа приведены в табл, 1.В табл. 1 представлены результаты определения широкого круга элементов методами АЭС-ИСП и ААС после микроволнового разложения образцов капусты, зерен пшеницы и клубней картофеля. Сопадение оезультатов определения с паспортными данными свидетельствует о достоверности результатов анализа,В табл, 2 приведены условия микроволнового разложения биологического материала стандартного образца капусты и результаты анализа методом АЭС-ИСП. Добавление дополнительного минимального объема окислителя на второй стадии разложения и воздействие на пробу СВЧ-излучения обеспечивает полное окисление органического вещества и перевод определяемых элементов в анализируемый раствор. При одностадийном разложении 1 г образца капусты полнота разложения не достигается,. По всем определяемым элементам наблюдают систематическое занижение результатов, Добавление настадии 0,5 мл Н 202 ЗОО) без воздействия СВЧ-излучения также не исключает систе-, матическое занижение результатов. Только одновременное добавление Н 202 и воздействие СВЧ-излучения на образец приводит к полному окислению органической матрицы,Табл, 3 обосновывает выбор времени взаимодействия СВЧ-излучения с образцом. При добавлении окислителя - 0,5 мл Нг 02, настадии разложения полное окисление органической матрицы "роисходит в течение 3-4 мин. Табл. 4 обосновывает выбор обьема30;-ной Н 202 для добавления настадииразложения. При добавлении 0,3-0,5 млЗО-ной Н 20 г достигается полное окисле 5 ние 1 г биологического образца и количественный перевод определяемых элементов ванализируемый раствор.В табл, 5 в качестве примера приведенырезультаты АЭС-ИСП и ААС определения10 элементов в гидротермальных животных после микроволнового разложения, которыеподтверждают применимость способа разложения для разнообразных биологическихматериалов,15 Способ позволяет полностью окислятьорганическую матрицу образца массой до 1г для дальнейшего анализа биологическихобъектов растительного и животного пооисхождения, а также улучшить метрологиче 20 ские характеристики, достигнуть полнотуминерализации навесок органического вещества массой до 1 г, повысить безопасность при работе с органическимвеществом.25 Формула изобретенияСпособ подготовки проб биологическихматериалов к анализу, предусматривающийразмещение пробы в автоклаве, введение внее смеси концентрированных азотной кисЗО лоты. и перекиси водорода, герметизациюавтоклава и последующее воздействиеэлектромагнитным излучением СВЧ-диапазона, охлаждение пробы, о т л и ч а ю щ и й -с я тем, что, с целью повышения полноты35 разложения пробы при увеличении последней до 1 г, после охлаждения в пробу вводятдополнительно О,З - 0,5 мл концентрированной перекиси водорода и подвергают пробуповторному воздействию электромагнитно 40 го излучения,Ю ге О счл в о о + +1 СЧ сч ец лв О 31л О О +1 Ч 1 СО Ю в л 4 л1112823 Таблица 2. Результатванализа стандартногообразца капусты Элемент Паспортныеданные,Двухстадийное разложение Одностадийное разлокение 2 4 мл концентрированнойНЮ + 1 мл 30-нойН 20 а; СВЧ-излучение5 мин концентрированной НКО + 4 мл 30-ной Н Омин; 2 стадия - 0,5 мл 309-ной Н " Ыз 1 стадия - 1 мл СВЧ-излучение 5 СВЧ-и,лучения. +1 стадия М мл СВЧ-излучение 5 СВЧ-излучение 3 концентрированной НМО; + ч мл 303-ной НО,мин; 2 стадия - 0,5 мл 301-ной НОмин,Т а б л и ц а 3Результаты анализа 1 г образца капусты Д Элемент Паспортныеданные Время, мин А 1 Са Мп Кп Ге К Яа А 1 Са Ма Мп 2 п Ее К Ма О, 0020,52О, 180,00570,0039,0,00582,620,30 0,002О0,180,00570,00390,00582,620,30 0,00130,370,110,00450,00290,00521,650,22 О, 0150,480,140,00500,00320,00511,880,20 О, 0018 0,51 0,18 0,0055 0,0037 0,0058 2,21 0,2710 1712823 Таблица 4Результаты анализа 1. г образца капусты Нааг мл ЭлементПаспортныеданные, 410,1 , 0,20,30,4 0,5е мм.2,10,260,0055 2,20,270,0068 2 у 20,260,0065 0,0036 0,0025 0,0030 0,0041 0,0040 ТаблицаРезультаты анализа (Ж) гидротермальных животных (навеска 1 г) Элементы МоллюскКраб Составитель Е,Ильин Техред М.Моргентал Корректор М,Максимишинец Редактор Э.Слиган Заказ 530 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгородул. Гагарина, 101 А 1 Са Си МВ Мп Сц Яг Еп Ге. РЬ Со 0,185+0,0130,0058+