Установка для исследования клетокв суспензии под микроскопом

по делам изобретений и открытий;пт г: Опытное производство Института проблеЦ онкорщи им, Р: Е. Кавецкого АН УкраинскоЖ СР 1(54) УСТАНОВКА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ КЛЕТОК В СУСПЕНЗИИ ПОД МИКРОСКОПОМ1Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к технике исследований биологических объектов в суспензии под микроскопом в условиях их культивирования.Известна установка для исследования клеток в суспензии под микроскопом, содержащая культиватор клеток, размещенную под микроскопом проточную кювету переменной толщины, сообщенную с культиватором трубопроводом, на котором установлен пе 1 ежимной клапан, соединенный с кюветой 10 трубопроводом, сборник культуральной жидкости, газовое пространство которого сообщено с газовым пространством культиватора трубопроводом с, бактерицидным фильтром 11. Известная установка является наиболее близкой к данному изобретению по технической сущности.К недостаткам известной установки относится то, что по протоку культуральной жидкости и по газовой фазе установка разомкнута, поэтому нет возможности исследований клеток, например, при различных давлениях в культиваторе. 2Установка неудобна в работе, так как .сборник, проточная кювета, культиватор клеток должны быть строго размещены на разных уровнях, что не всегда возможно.При этом в зависимости от этих уровней будет меняться время заполнения проточной кюветы, время слива культуральной же кости, время приготовления клеток к просмотру под микроскопом,В связи с наличием малых, не регулируемых давлений, в устройстве образуются застойные зоны налипания клеток. В частности, такие зоны могут образовываться в сборнике. Вследствие этого возникают условия, вызывающие неоднородность культуральной жидкости, подаваемой для исследования, что снижает точность и достоверность при прижизненном анализе клеток, не обеспечиваются условия, необходимыедля культивирования клеток в сборнике.Целью изобретения является повышение точности исследований.Для достижения этой цели установка снабжена газовым насосом для создания в сборнике знакопеременного давления, установленным на трубопроводе, соединяющем газовое пространство культиватора и сбор 802363ника, датчиком давления газа в сборнике,размещенным на участке трубопровода забактерицидным фильтром, каплеуловителем, размещенным перед фильтром, и датчиком уровня жидкости в сборнике, приэтом культиватор соединен со сборникомтрубопроводом для перетока культуральнойжидкости и на трубопроводах, соединяющихпо жидкости сборник с кюветой и с культиватором, установлены дополнительные пережимные клапаны.На фиг. 1 показана установка для исследования клеток в суспензии под микроскопом; на фиг. 2 - сборник, общий вид.Установка содержит последовательносоединенные по протоку культуральной жидкости при помощи эластичного трубопровода 1 культиватор 2 клеток, пережимнойэлектромагнитный клапан 3, проточную кювету 4 пременной толщины, расположеннуюнад конденсатором 5 в поле зрения объектива микроскопа 6, пережимной электромагнитный клапан 7, сборник 8 культуральнойжидкости, фотодатчик 9 уровня культуральной жидкости в сборнике 8 и пережимнойэлектромагнитный клапан 10.Газовое пространство сборника 8 сообщено с газовым пространством культиватора 2 эластичным трубопроводом 11, на котором размещен газовый насос-дозатор 12,установленный с возможностью создания всборнике 8 знакопеременного давления. Ктрубопроводу 11 последовательно подсоединены каплеуловитель 13, бактерицидныйфильтр 14 и датчик 15 давления газа всборнике 8.Сборник 8 представляет собой стеклянный сосуд Ч-образной формы с входнымиштуцерами 16, 17 и выходным штуцером 18.Установка работает следующим образом.Открывают пережимной электромагнитный клапан 3 и включают насос-дозатор 12в режим создания отрицательного давления (разрежения) в сборнике 8, При этомклапаны 7 и 10 закрыты.Как только разрежение в сборнике 8достигнет заранее установленной величины,срабатывает датчик давления 15, и насосдозатор 12 останавливается. Под влиянием избыточного давления в культиваторе 2культур альная жидкость через открытыйклапан 3 заполняет проточную кювету 4 переменной толщины, объем которой увеличивается. Через некоторое время клапан 3закрывают и открывают клапан 7,Благодаря разрежению в сборнике 8часть культуральной жидкости из кюветы 4поступает в сборник 8, При этом разрежение в сборнике 8 уменьшается, что фиксируется датчиком 15, который дает сигнална включение насоса-дозатора 12 на разрежение. Происходит постепенное откачивание культуральной жидкости из кюветы 4в сборник 8. Под действием внешнего атмос 15 20 25 30 35 40 45 50 55 ферного давления в кювете 4 достигается заданный зазор, что фиксирует датчик зазора (на чертежах не показан), После этого включают насос-дозатор 12 и закрывают клапан 7. Через определенное время, достаточное для затухания механических колебаний, в системе осуществляют прижизненный анализ клеток в поле зрения микроскопа.Таким образом, в проточной кювете 4образуется монослой клеток, пригодный для прижизненного анализа под микроскопом. При исследовании клапаны 3 и 7 закрыты. Это обеспечивает изолирование кюветы 4 от всех внешних коммуникаций. Любые изменения, происходящие в культиваторе 2 и в сборнике 8, не повлияют на точность и надежность прижизненного анализа клеток.В качестве анализатора клеток может быть применен телевизионный анализатор изображения.По окончании анализа насос-дозатор 12 включают в режим нагнетания (положительного давления в сборнике 8). При достижении определенного, заранее установленного давления в сборнике 8, превышающем давление в культиваторе 2, открывают пережимной электромагнитный клапан 10. Культуральная жидкость из сборника 8 вытесняется избыточным давлением в культиватор 2 до достижения определенного уровня в сборнике 8, фиксируемом фотодатчиком 9. По достижении этого уровня фотодатчик 9 выдает команду на выключение насоса-дозатора 12 и закрытие клапана 10, и цикл для анализа транспорта культуральной жидкости заканчивается.При транспорте культуральной жидкости в сборнике 8 могут образовываться пары культуральной жидкости, которые могут повредить бактерицидный фильтр 14, например, замочить его. Это может вызвать прон икновеьие микроорганизмов от датчика 15 (так как, он не стери- лизуем) в исследуемую культуральную жидкость. Для предотвращения нарушения стерильности перед бактерицидным фильтром 14 установлен каплеуловитель 13. Образовавшийся в каплеуловителе конденсат выдавливается, в сборник 8 избыточным давлением, создаваемым насосом-дозатором 12,Данная установка создает возможность автоматической рециркуляции культуральной жидкости из сборника 8 в культиватор 2, обеспечивает полную стерильность культу- ральной жидкости, подаваемой для анализа, обеспечивает удобство в работе, поскольку элементы устройства могут быть расположены на любом уровне в любом месте, исключает возможность Образования застойных зон и налипания клеток, обеспечивает условия, необходимые для культивирования клеток в сборнике 8, позволяетисследовать клетки независимо от давления в культиваторе - все это повышает надежность установки и точность прижизненного исследования клеток в суспензии под микроскопом.Формула изобретенияУстановка для исследования клеток в суспензии под микроскопом, содержащая культиватор клеток, размешенную под 1 е микроскопом проточную кювету переменной толщины, сообщенную с культиватором грубопроводом, на котором установлен пережимной клапан, соединенный с кюветой трубопроводом, сборники культуральной жидкости, газовое пространство которого сообщено с газовым пространством культиватора трубопроводом с бактерицидным фильтром, оличающаяся тем, что, с целью повышения точности ис 6следований, установка снабжена газовым насосом для создания в сборнике знакопеременного давления, установленном на трубопроводе, соединяющем газовое пространство культиватора и с-срника, датчиком давления газа в сборникс, размещенном на участке трубопровода э бактерицидным фильтром, каплеуловитедем, размещенным перед фильтром, и датчиком уровня жидкости в сборнике, при этом культиватор соединен со сборником трубопроводом для перетока ь;льтуральной жидкости и на трубопроводах, соединнк 1.их по жидкости сборник с кюветой и с культиватором, установлены дополнительные пережимные клапаны. Источникн информации,принятые во внимание при экспертизе 1. Кошевой Ю. В Лежнев Э. М., Макарова О. П. Прижизненная морфометрия клеток. с. 53, М Наука, 1977.Составитель ИТехред А БайкТиражЯ 9дарственного коизобретений иЖ - 35, Раушскнт, г. Ужгород,еда кто аказ 10 Братчиков32 ВНИИПИ Гопо делам113035, Москва филиал ППП Па Шабалсорректор Подписно итета СССРоткрытийя наб., д. 4/5ул, Проектная, 4