Способ и приспособление для подсчета лейкоцитов на сухом мазке крови

и вол ИЗЮЕТЕКИЕ ВТОРСКОЕ СВИДЕТЕЛЬСТ ОГИСАНИ способа и при собления элементо кому свидетельству К. Г, Кара февраля 1936 года (спр, о перв вторского свидетельства опубликовано сева, заявленному.188000),31 августа 1936 года,вто ыдаче пара-оментожетСосчитыванне кровяных телец произ-водится гла:ным образом при помощисчетных камер разных авторов; ТомаЫейса, Бюркера, Предтеченского и,дрс разными сетками.Счетная камера, при всех своих по-ложительных качествах, не лишена це-лого ряда очень существенных недо-статков, Пропускйая способность ееочень ограничена. Камера не можетполностью удовлетворить важнейшимзапросам при массовом гематологичезком исследовании, например, при обследовании большого количества отдельных групп населения, рабочих различных промышленных предприятий, шахт, физкультурников и т; д.териал, исследуемый однократно в камере, в дальнейшем уничтожается, и в сомнительных случаях не может быть проверен илн повторно иссле-дован. Подсчет форменных элементов в камере неразрывно связан с наличием микроскопа, а также другой ап туры и реактивов на месте в м исследования, что иногда. не м быть выполнимым.Имея и ряд других недостатков, камеры, при различного рода оплошностях, часто ломаются и пока относительно дороги. ля подсчета форменныхкрови. Все это неуклонно приводит к необходимости изыскания способов расширения рамок, установленных счетной камерой, при гематологических исследованиях,В основу предлагаемого способа взяты следующие четыре положения:1. Точное объемное измерение количества крови для производства мазка.2. Распределение взятой крови на площади определенного размера,3, Возможность сосчитывания клеток крови на сухих мазках при помощи унифицированного измерения площади, на которой производится подсчет,4. Достаточная точность результатов подсчета для научно-исследовательских и практических целей н техническая доступность метода.Самым основным в предлагаемом способе является особый металлически й прибор, состоящий нз двух частей.Фиг, 1 - 4 представляют -общий вид прибора; фиг. 5 - 10 представляют детали нижней, ббльшей по размерам, части, имеющей некоторое сходство с кассетой, куда вкладывается предметное стекло сначала для нанесения на нем мазка, а затем, после соответствующей обработки, - для подсчета клеток крови на сухом и крашеном, мазке. В этой части имеется два круглых отверстия в од, диаметр которого равен 15,96 мм на нижней, другое, значительно большее отверстие, - на верхней стороне. Верхняя, меньшая по размерам, часть, представленная на фиг. 11 - 16, состоит из двух вложенных одно в другое колец, В нижнем кольце, для измерения площади, на которой производится сосчитывание форменных элементов крови; вделана нанесенная на прозрачной целлюлоидной пленке сетка (фиг, 16). Верхняя часть вкладывается в верхнее круглое отверстие нижней части.На фиг. 2 изображена сетка, состоящая из 16 мм, распределенных на площади, равной 1 см, следующим образом: 4 мм- помещены в средине, следующие 4 мм по углам и остальные 8 мм - по 2 мм на каждой стороне, Все внешние стороны отдельных квадратных миллиме-тров ограничены тройными линиями, а все внутренние - однойлинией. Кроме того, каждый миллиметр в свою очередь делится четырьмя двойными линиями, проходящими по две пары перпендикулярно друг к другу. Благодар тройным и двойным линиям в каждом квадратном миллиметре получается 1 Ь малых квадратиков размером в 0,01 мм и 9 средних квадратов размером в 0,04 мм.Таким образом во всех 16 мм- имеется 256 малых квадратиков и 144 средних квадрата. Линии сетки для большей контрастности и отчетливой видимости покрашены и обрезаны в нижнюю сторону, т, е. к мазку, Целлюлоидная пленка, на которой нанесена сетка, так прикреплена к металлическому ободку, что когда последний вкладывается в верхнее отверстие нижней части счет ной пластинки, то сетка ложится плотно на мазок, нанесенный на предметное стекло.Способ употребления прибора следующий. Когда пр"дметное стекло вкладывается внутрь нижней части описанного выше металлического прибора и вынимается из него, верхняя часть последнего, чтобы не повредить сетки и мазка, должна быть обязательно отделена, а нижнее круглое отверстие пла. стинки обращено вверх. Затем, как,обычно делается, уколом дезинфицированных мочки уха или пальца снимается первая капля и из свободно выступившей второй капли при помощи градуированной и проверенной пипетки набирается 10 мм крови. Взятая кровь выпускается из микропипетки на предметное стекло приблизительно в центре круглого отверстия металлического прибора.Полученная таким образом кровь легко распределяется стеклянной (глазной) палочкой на предметном стекле, а благодаря наличию круглого отверстия, как по трафарету, образуется мазок крови, несколько похожий на толстую каплю, площадью около 200 мм, в виде довольно правильного круга. После этого предметное стекло вынимается из металлического прибора и в горизонтальном положении помещается на стол или полку (лучше под стеклянный колпак) для постепенного высушивания на воздухе.Для подсчета лейкоцитов подсохшие на воздухе мазки гемолизируются дестиллиро ванной водой, промываются в водопроводной воде, налитой в стакан, фиксируются 4 - 5 минут в мети- ловом алкоголе, подсушиваются и затем красятся.Красить мазки можно по Гимза или другими красками, которые хорошо окрашивают белые кровяные тельца. Очень хорошие резул таты получаются при довольно быстрой окраске квасцовым гематоксилином,В данном способе результаты нодсчета будут сводиться к выражению количества лейкоцитов в одном кубическом миллиметре,Количество лейкоцитов, содержащееся в 1 ммз при контрольном подсчете во влажной камере, распределяется на счхом мазке с значительной точност;.ю по площади, равной 20 мм.Измерение площади во время подсчета производится при помощи сетки, Структура сетки такова, что подсчет форменных элементов крови приходится производить на площади, равной 100 мм в различных и далеко расположенных друг от друга местах, Подсчет производится при помощи сухой системы различных микроскопов.Удобней пользоваться объективамиОтсюда можно вывести следующееслабого увеличения и окулярами силь-правило:ного увеличения. Искомое количество лейкоцитов, обоПо отношению к сетке следует дерзначенное через Х, будет равно сосчижаться тех же правил, которые приме- танному количеству ф разделенному наняются при подсчете во влажной каме- площадь Г, на которой производилсяре. Подсчет производится в местах подсчет, и умноженному на 20, наприограниченных отдельно расположенны-мер;ми по углам сетки 4 ллР, ватем наместах, ограниченных 4 ллР, располоГженными вместе в средине сетки, и,дальше - на местах, ограниченных 2 люм"-Записывать результаты подсчета мож-на каждой из сторон сетки. но после того, когда пройден один рядДля получения результатов подсчетамалых или средних квадратов или посс достаточной точностью требуется со- ле подсчета во всех каких-либо квасчитывать такое количество лейкоци. дратах, расположенных в пределах 1 мм-,тов, которое распределилось на пло- Зная размеры площадей на стекле,щади, равной 2 млР, при условии, что; как подсчет, так и запись можно варьиэта площадь является суммой различ-ровать в различных направлениях, неных участков мазка. фнарушая при этом указанных вышеЧтобы теперь найти количество кле-, основных принципов метода.ток, которое должно распределиться,на 20 млР, полученное число следуетумножить на 10. Найденное таким об- Предмет изобретения.разом количество лейкоцитов и будетсоответствовать количеству в 1 млР, 1. Способ подсчета форменных элепри подсчете во влажной камере.ментов крови, отличающийся тем, чтоПонятно, конечно, если меняется ве- определенное количество к .ови расличина площади, на которой произво- , пределяют на точно размеренной площадится подсчет, то в зависимости отди и подсчет производят в сухом мазке.этого изменяется и множитель для по-, 2, Приспособление для осуществлелучения площади, равной 20 млР.ния способа по п. 1, отличающеесяДля пояснения сказанного можно тем, что оно состоитиз металлическойпривести следующие примеры, или иного материала кассеты для предНа 2 мм- составленные из различ-; метного стекла, имеющей в обеих стен 1ных участков мазка, сосчитано 650 лей- ках совпадающие отверстия определенкоцитов. Тогда 650 10=6500.ной площади, и вставляемой в эти отИли в другом случае: на 4 мм при верстия пластинки, закрытой на нижтех же условиях сосчитано 1300 лей- нем конце прозрачной пластинкой, накоцитов. Тогда 1300 5=6500.которой нанесена счетная сетка,