О п и с д и и е изобретения

увщге , " , с, у - 4 бнблг. 388719 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветскихСоциалистицескихРеспублик авт. свидетельстваЗа,виоимо Кч А 011 т 104 явлено 22,1 Х.1971 ( 1699380/30-15 исоедицецием заявкиГосударственный комитеСовета Министров СССРпо делам изобретенийи открытий Приоротт 32 111 631 521 6088.8) убликовапо 05.Ч.1973. Бюллетень29та опубликования описания 2 б,Х 11.1973 Авторыизобретения Мигиц, Ю. Г, Кулеш, И. ф. Беликов. И. Черницын Дальневосточный научный центр АН СС аявител СПОСОБ ЛАБОРАТОРНОГО ДИАГНОСТИРОВАСТОЙКОСТИ СОРТООБРАЗЦОВ ПЛОДОВЫХ ИРАСТЕНИЙ ЫХ применяют имп нитного резона последовательно исследуемого с лона. льсцыи метод яде а (ЯМР - спиповоснятии хара кт ртообразца и с ного магэхо) при ристик с орта эта 1Изобретение относится к селекции растений и может быть использовано для диагностирования зимостойкости плодовых и ягодных растений.Известны различные способы лабораторцого диагностирования зимостойкости сортообразцов растений, основанные ца изменении физико-химических свойств протоплазмы под действием пизких температур, а биофизическом методе регистрации сверхслабых световых потоков, ца закаливании сортообразцов и так далее. Однако данные способы це дают достоверной оценки зимостойкости плодовых растений, так как в процессе анализа нельзя проследить за физиологическими измепециями в растении в динамике изменения температур.Для повышения достоверности опенки зимостой кости плодовых и ягодных культур по предлагаемому способу производят прижизцеппый апализ структурно-физических изменений состояния воды в клетках тканей исследуемого объекта под влиянием переменных температур в осенне-зимне-весенний период и в течение первых трех лет плодоцошепия сортообразца, Анализ проводят цесколько раз в наиболее критические для данной зоны сроки и повторяют в течепие первых двух-трех лет плодоцошения сорта. Для ускорения оценки изучаемого сортообразца Для определения едицичцого сортообразцав саду заготавливают одполетцие приросты каждого сорта, в том числе от одного до трех 10 сортообразцов сортов-эталонов, и в термосахпри температуре, которая наблюдалась в данное время в саду, доставляют в лзоораторию. Перед цачалом анализа в датчике ЯМР - релаксометра устанавливают ту же 15 исходцую температуру, которая была в садупри заготовке образцов с помощью микрохолодильцика, где во время анализа одного образца храпят все остальные. Для предотвращения потерь все ооразпы оовертывают тер мостойкой пленкой. При заданной исходнойтемпературеа ЯМР-релаксометре спмаюследующие показатели: путем сравпеция амплитуд сигналов от исследуемого ооразца и от стандарта с известным количеством воды 25 определяют общее содержацие жидкой фазыводы в измеряемой части образца, а из анализа огибающей амплитуд сигналов расчитывают соотцошепие фракций свободной и связаццой воды, а также времена спин спицовой релаксации обеих фракций воды,структурирован 10 характеризующие уровеньности этих фракций.Аналогичным образом при данной исходной температуре проводят анализ всех остальных сортообразцов, после чего регулятор температуры датчика ЯМР - релаксометра переводят на следующую ступень температуры, В случае определения устойчивости сортов и переменным температурам перевод температуры осуществляют вначале в сторону повышения, например, со скоростью 5 С за 10 иин до положительных значений, например до 10 С или 20 С, а затем температура с заданной скоросгью снова понижается до заданных отрицательных значений, например до - 25 С или до - 45 С. На каждой ступени температурных изменений проводят замеры общего количества и состояния воды поочередно на всех сортообразцах. В случае определения только нижнего порога термоустойчивости сорта, например в середине зимы, для зоны, где не бывает оттепелей, изменения температуры от исходной проводят только в сторону понижения, После заданной минимальной температуры проводят серию отсчетов показаний ЯМР - релаксометра по ступеням повышения температуры до положительных значений. Для определения жизнеспособности сортообразца применяют графическое сравнение прямого (в сторону понижения температуры) и обратного (в сторону повышения температуры) хода процесса замерзания и оттаивания жидкой фазы водыв объекте.На фиг. 1 показана динамика оттаивания 1 и замерзания 2 жидкой фазы воды в однолетнем приросте яблони в прижизненном состоянии; на фиг. 2 - динамика замерзания 2 воды в живом образце до уровней летальных температур и оттаивания ее 1 после гибели живой системы в однолетнем приросте яблони; на фиг. 3 - динамика замерзания жидкой фазы у зимостойкого 1 и незимостойкого 11 сортов яблони; на фиг, 4 - изменение соотношения фракций свободной и связанной воды под влиянием температуры у зимостойкого 1 и незимостойкого 11 сортов яблони; на фиг. 5 - изменение уровня структурированности свободной фракции воды у зимостойкого 1 н незимостойкого 11 сортов яблони.В живом образце (фиг. 1) в процессе оттаивания 1 изменения количества жидкой фазы воды близки с характером изменений ее в процессе замораживания 2. Если образец погиб (фиг. 2), то при повышении температуры после крнти;еской минимальной изменения количества воды не совпадают по температурам с характером ее замораживания 2.Общая характеристика термоустойчивости сортов за каждый данный срок проводится по трем показателям; динамика замерзания и от 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 таивания жидкой фазы воды (фиг. 3); динамика соотношения фракции свободной и связанной воды (фиг. 4) и динамика структурированности свободной фракции воды по времени спин-спиновой релаксации ядер Водорода воды в миллисекундах (птэ) (фиг. 5).Зимостойкий сорт 1 от пезимостойкого 11 на фиг. 3, 4 и 5 отличается;.в диапазоне температур, близких к 0 С - более быстрой пере- стройкой соотношения свободной и связанной воды (фиг, 4); при низких отрицательных температурах в более низкими температурными пределами стабилизации общего содержания жидкой фазы воды (фиг. 3); в процессе понижения температур ниже 0 С при одинаковых скоростях ее изменения у зимостойкого сорта 1 уровень структурированности свободной фракции воды повышается быстрее (фиг. 5), чем у незимостойкого сорта 1.Для определения абсолютных границ термоустойчивости данногозимнего периода в каждый срок анализа подбирают максимально возможные в данной экологической зоне и в данный период зимы скорости изменения температуры, Для быст. рого отбора сортов по уровню термолабильности живой системы можно применять более высокие скорости изменения температуры в процессе ЯМР - анализа, например 5 С за 1 О лцсн. Для окончательной оценки зимостойкости сортов в сравнении с эталонами обобщают результаты анализов в динамике зимы за 2 - 3 года.Данный способ может быть использован для сравнения уровней термоустойчивостн одних и тех же сортов, выращенных в различных экологических условиях. В этих случаях обязательна быстрая доставка образцов к месту анализа и единое время пх заготовки в саду.Предмет изобретения1, Способ лабораторного диагностирования зимостойкости сортообразцов плодовых и ягодных растений, включающий воздействие переменных температур на живой изучаемый объект, отличающийся тем, что, с целью повышения достоверности оценки, анализируют структурно-физические изменения состояния воды в клетках тканей исследуемого объекта под влиянием переменных температур в осенне-зимне-весенний период и в течение первых трех лет плодоношения сортообразца при параллельном сравнении с известными по уровню зимостойкостп сортами-эталонами.2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что, с целью ускорения оценки изучаемого сортообразца, для анализа структурно-,физических изменений состояния воды применяют импульсный метод ядерного магнитного резонанса.Заказ 3259 Подписв СССР И Тираж 523 а Совета Минис и открытий ая наб д, 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2Изд.87 Государственного комитет по делам изобретений Москва, )К, Раушск