Способ моделирования интерстициального нефрита

(ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ Изобретение отн частности к патофизи и предназначено для нокомпегентного неф Цель изобретениясится к медицине, в ологии и нефрологии, моделирования иммурита.- повышение воспро 8-20 м курс моСпо зом.Кро вводят ный ра 1,0-0,5 массы ви по 1 культу ной па О д АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Московская медицинская академия имИ.М. Сеченова(54) СПОС 06 МОДЕЛИРОВАНИЯ ИНТЕРСТИЦИАЛЬНОГО НЕФРИТА(57) Использование: медицина, патофизиология, нефрология, Сущность изобретения: изеодимости иммунокомпетентного интерстициального нефрита за счет увеличения юкстамедуллярного кровотока,Указанная цель достигается тем, что в способе моделирования интерстициального нефрита, включающем введение прогесте-, рона и инфицирование организма; отличительной особенностью является то, что кровообращение дополнительно нарушают проведением курсового облучения почек электромагнитными дециметровыми волнами слаботепловой мощности. При этом облучение проводят волнами частотой 460 Мгц плотностью потока мощности до 83,7 мВт/см излучателем диаметром 4,4 см (площадью 15,3 см ) контактным методом по.0 пн 1823007 А 1 кроликам-самкам породы шиншила вводят ежедневно внутримышечно масляный раствор прогестерона 1 - 2,5)ь по 1,0-0,5 мл 2 мг/кг массы животного в течение 3 - 4 недель, в ток крови вводят по 7-10 - 10 микро 9 бных тел в 1 мл взвеси культуры непатогенного штамма кишечной палочки троекратно с интервалом 3-4 дня, с последующим облучением почек электромагнитными дециметровыми волнами частотой 460 МГЦ от аппарата "Ромашка" или "Ранет" плотностью мощностью 83,7 мВт/см излучателем диаметром 4,4 см контактным методом после соприкосновения датчика с выбритой кожей поясничной области животного,н ежедневно 10-14 процедур наелирования.об проводят следующим обраикам-самкам породы шиншила жедневно внутримышечно маслявор прогестерона 1-2,4 ф-ный по мл в течение 3 - 4 недель (2 мг/кг ивотного), Затем вводят в ток кро- -10 микробных тел в 1 мл взвеси9непатогенного штамма кишеччки троекратно с интервалом 3 - 4 Далее дополнительно проводят облучение почек электромагнитными дециметровыми волнами частотой 460 МГц от аппарата "Ромашка" или "Ранет" плотностью мощности 83,7 мВт/см контактным методом излучателем диаметром 4,4 см (площадью 15,3 см ) после соприкосновения2датчика с выбритой кожей левой пояснич 183007ной области животного, Курс облученийнедели (10-14 процедур) по 8-20 минут ежедневно. После создания модели проводяострый опыт, при этом определяют с, помоцью реографии уровни кровенапол нениякоркового, мозгового вещества и интермедиарной эоны, затем почки извлекают и подвергают комплексному морфологическомуисследованию, при котором выявляют иммунокомпетентный интерстициальный не 10фрит,Пример конкретного выполнения способа.П р и м е р 1. Кролик М 45(самка, масса3 кг). Вводят ежедневно внутримышечно 15масляный раствор прогетерона 1 -ный 0,6мл в течение 3 недель, затем вводили внутривенно 10 микробных тел взвеси культурынепатогенного штаммма кишечной палочкитроекратно с интервалом 3 дня. Далее проводили облучение почек электромагнитными дециметровыми волнами от аппарата"Ранет" частотой 460 МГц, излучателем диаметром 4,4 см плогностью потока мощности 83,7 мЗт/см с атгенуатором длинои 5м, Излучатель устанавливали на понерхности выбритой кожи лвой поясничной области в проекции почки, облучение проводилиежедневно, кроме воскресенья, в гечение 2недель (12 процедур по 10 мин каждая)Далее повели острыи опыт под внутри.венным наркозом (гексенал 1 -20,0 ). Осуществили срединную лапдротомиюобнажили почки и провели их региондрнукполиреографию. Для регистрации рео ромм 35использовали трехканальные иольчдтыеэлектроды, состоящие из изолированнокпроводников длиной соответственно 4 мм,8 мм и 12 мм, которые при погружении нткань почки находились соответственно н 40корковом веществе, интермедианой зоне имозговом веществе. Электроды подключилик многоканальной безмостовой реографической приставке, соединенной с регистратором ЭЭГ(Венгрия), При анализе 45реограмм определяли реогрдфические индексы в качестве показателей пульсоногокровенаполнения отделов почки и коэффициенты распределения кровотока (КРК), тоесть отношения неогранических индексов 50коркового вещества, интермедиарной зоныи мозгового вещества облученной и контралатеральной почек, Далее почки извлеклии подвергли комплексному морфологическому исследованию, Ткань почечных сосочкое исследовали на содержаниепростагландина Е 2 радиоиммунным методом,При полиреогрдфии облученной почкисоотношение уровней коркового, юкстдме. дуллярного и медуллярного кровотока 2 4 3,6 (В норме это соотношение 5:3:2, д при моделировании по прототипу, то есть без облучения - 2 3;4) В контрдлдтеральной очке это отношение - 2:4:3, То ес гь отмечено увеличение юкстдмедуллярного кровотока нд фоне уменьшения коркового и возрастания мозгового кронендполнения.При гистологическом исследовании облученных почек отмечен резчайший отек стромы, дистрофия кднальценого эпителия, спазм артерий, гиалиноз дртериол полнокровие венул, Выраженная лимфогистицитарная инфильтрация интерстиция,При электронно-микроскопическом исследооании - небольшие участки некроза; в некоторых кандльцдх (петли Генле) деструктивно измененные нефроциты, в просвете компактно клеточный детрит, Ичдгооо выражена лимфоцитарно-моноцитдрндя инфильтрация, В некоторых капиллярах - пролиферация эндотелия. Участки отека интерстиция с небольшими нкрапле ниями разнондпрднленных коллагеноных волокон. Интерстицидльные клетки ок. рулые, контэктон с сосудами и кдндльцдми нет, перинуклеарый отек Нефроциты проксимдльных канальцев е состоянии идлинонокдГ 1 ел нои дистрофииЗаключение: явление хронического ингерстицидльного нефрита. При рддиоиммунном анализе вытяжки иэ ткани почечного сосочка концентрация простаглдндина Е былд соответственно, 1,73 мкг/г5,23 мкг/г ткани слева и справаГ 1 р и м е р 2, Кролик М 43 Создана модель по предлагаемому способу (см, при. мер 1).При гисологическом исследовании поох отмечены резчдйший отек, дистрофия кднальценпго эпителия, выраженная инфильтрация интерстиция Хроническое воспаление.При электронно-микроскопическом исследовании обн сужены участки отека интерстиция, разнонаправленные коллагеновые волокна. Имеются очаги инфильтрации лимфоцитами, моноцитами, макрофагами, много плазмэтических клеток, соседствующих с лимфоцитами, Проксимальные канал ьцы в состоянии гидлиновокапельной дистрофии, В клубочках депозитов нет, Заключение; активный интерстициальный нефрит.При рддиоиммунном анализе вытяжки из ткани почечного сосочка концентрация простангландина Ег была соответственно 4.34 мкг/г и 7,80 мкг/г ткани слева и справа,П р и м е р 3. Кролик Ыг 47 (Контроль: здороное животное, облучение ДМВ М 12),Ер м(рфцп )(илс (м иг( лполдни (3 Р НЛ Р 1 О СР К)(ЦРРДС.) К И Р 3( (РЛ - нич ИСТО 1 ч Е;:3;эьц( кал)Е)Е)наы В инте(сии ;)н;)пьл ждт колпдктно, вафро,и гдх диич.а н)ринца лиэосо МЫ 13 Ц 3 Т" 3(ЦН,Р КЛРТ Ки ДРГКНД- г. и Ез 3 3О(ц 1 ти 13 д пк(н (;ц:33 п,нОго цроцРЛЗ- СД Н 3Е 1 р 1 1),31 Ггу (31 дндлиэс, вытяжк( из тк 1 Н(" нцг( сос(3 кд концРнтЕдцич цс)стд(ддинд Е:, сц) нР. стненно 4,19 мкг/г и .1,32 лкг/ (к;)н-,пднд и сцрднд,1 ) и л е р 1 Крол М 33 (Контроль лгз)елицозг)и 1( с ц Е)оИц без ( 6 пученич ,(М Е 3)11 рИ Мрфцлцпч( С кМ 1 СападОНдН)И нычвпРн,з ,гдук(ег(.тки (так; интерсти цич г Рди нич н ми,п " рук тип но измененными интерс)иц)дл цгли клетками. В кдциллярдх ин.4)сипил )диничнцееитрофиль Е 1 роксим;льнц) Кд длец з (.Остоянии гидинонкдц( пьной д(1(.3 рофииКлубочки 6 зз .со(е 3-)айЗдклО 3(;н)г; ин);рсИ(и;)льный нефрит зос)Е)(зи(3(з(.: н уддп с иммунгзкомпетентного носц;зпитепьноО цроцессд в почке От. Кдртинд рдг.,( нн; кд 3 дп,ня реакция нд ин 1 РКПри рддиоим 1,но дндлизе вытяжки иэ ткани по очно(ц сосочка концентрация простаИ ланди 1;) Е., с(Онг)сгнанно 0,27 мк /г и 0,80 мк/кани слева и .права,От(Ичие здянпеого сп )со(зд от известного эдклкчаа)(.ч в )ом. тц кровооборащение в почках ндрушдО) доголнительно проведением курсового облучения почек электромагнитнцми децила тровцми волнами (час) отой 180 ЛГС, спдбогепловой мо(зу ности плотнос(ью пота.а до 83,7 мВт/см, контактным л)Ртодом излучателем ппощадью 15,3 сгл . по 8-20,линут ежедневно, 10 - 14 процедур на курс глоделирования).Нарушение кровообрадания выражается в стимуляции юкстамадуллярного кровотока, что, при наличии ограниченных резервов, приводит к усугублению патологического перераспределения кровотока через корковое и глоэговое вещество, к спазму сосудов корковоо вещества и флебостазу медулпярного вещества.При воздействии ДЕЛВ-процедурой слаботепловои глощности на пораженную воспалительным процессом почку отмечается стереотипная реакция в виде увеличения юкстамедуллчрного кровотока и уменьшения кровотока через корковое вещесгво, Ледуллярныи крово)ок:ри этол остается на прежнем уровне (увели енном). Э контр 31 Едл ьО и)ч; 3 ц Еи ноЗД;1(ЕРлУЕ)г 11 кж( Н(ОГ,гзР3 Р,Улл:3 Рн(Г( кЕ,Ос ) Одрлннпз6 еэ дп)одни(а ь.3)от рдсстоян;ч глакд) изпудт пеиОргднцм 1 л процедура ньзызд, 3, дк10 церн;ч дндпг)чнца цареод(,пред-ли п.,- нцеф 4;к)ц н цочечог кр 1 лордци,ГНЧЗДЦР, Н ОСН;ННОМ С УНЕЛЧЕ 3 К:- 1;3; Р;(у 33)я рн)ГО крсвп Гока, нс)здс: 1,)нг (ДП 3 КиНОТПКД ЧЕРЕЗ ЛОЗГГНОС НРа СТ; О И13 сг 3,т .внньл уг)Рн,с к игг ",ровс:" дц(. 11 Я к(Е 3 ко(ОГО не ЦР(" Рд. ДдО. "л. кпоноток 3 1жаз иглг;Ть (3",сбнН 1.:).",1 с ОГО Еусла ч(3 лнзтся Г(1 пыл(усу, у 6 пеник) емодиндглича.кой нед.)с г,- 25 о н(:т 3 згадски(зиа ео герРГузки,Э;61 ндРт и(дк 1 игног нос: Гдлитэл Ог (с- цР"; ВЫНЕС дз;зцнц". Г(П,ЗСуа(ГЧ Р)ЛЬ- ;1 сю гпьшгй роли юкстамедуллчрногоКРОнцтгК; В Ц(ОЦЕССД КОМЦЕ,СаЦИИ И ДДО; -3 П тзц(; к)оно )брг)ценя. О енидн/ГЛЕ.ноэО)зуст н парную очередь а сосуд- с(оа Е)усо интермедиарной зоны. Б з(;мВОЗДРС ГНИ ПРИНМаЕт У(, ГИЕ,)Д ) к РИнцй дцдрдт почки ре(у,)ирув( и, рооець35 зур;цочечного кровотока (гинт.з црос т 3л д н д и н э2 и и т Р р с и ц и л ь и ы ги ка 3 к дги и нефроцигами собират(3 ь ыхрубок 1.ЭТ. В (:НОо ОЧЕрЕдЬ. ЛЫЭЫВаа уна,ИЧЕН;а ццерердсг)редела,ие крованд(онеил п 3 40 дп,гочки. При умезьвеннол д(,т .р лтО притоке это воэдеистни ОЕ п;дде)пачаб)ным зффек ом (до ог)ред.,:с,цре;Опон), так к;к происходит) ре,роькдсог удисо о русла и кол)пансаОЕн Ое усип,.45 ние фукции за счет вклочания клубочковюкс.дл дуллчрной зоны. При унеличени(коонендцолнении, характерном дл острогово.п )ления, воздействие цМЗ усугубляетсооудистую реакци о, сопровождающую50 воспаление, что и приводт, в ко ечном с а -та. к успенио воспаления и цочвленю)ипар л)унных реакс 1 ий. 6 э ом жесаидазельствуат анализ пок;)эд.Ла Ко -центрдции простагпандинд Е н"н цо 55 чечнцх сосочков как др(лодалир". 3;.3хро иэ(:го и острого.зивногсч м,пзкол 3.;етного) инерс(ициэ, ь с(. ," .та, тдк И ПрИ ПОС ГИ ОПОЛ;,(воздз;)столх -обпуча;ии ;.;илагнитными дециглетро(зыли(и;введении бпокдгорд синтелд цросгдн дндинов пирокс икдмд. Обоснование цредпдгдеглых г дряме ров, 5Аппараты дпя проведения ДМВ-терн пии Ромашка, Ранет, Волна генерируют дециметровые волны частотой 4 бО МГц, При подборе доз испольэовали излучение как сильно-тепловой мощности 395 мВт/см, 102 так и слабогегловой мощности 84 глот/сгл, В эксперименте на кроликахумеггьшдпи мощность излучения с помощью ат енуатора диной 5 м и уменьшением диаметра излучателя от 10 до 4 см Количество 15 процедур по аналогии с клиническими условиями 10- 14, т,е, в течение 2-х недель с перерывами н выходнь:е дни. Экспозиция одной процедуры, кдк и в клинических условиях, от 8 до 20 мин, обычно 10 15 чин. 20Ранее ус;анонлено неблагоприятное повреждающее влияние сильно-теплоноимощнос иДМБ -395 мВт/смнапаренхиму почки и прямая зависимость между дозой ,ЦЬЛВ и степенью повреждения. Наимень шим цонреждающим влиянием обладала) доза слдботецчоной мощности 84 мВт/см экспозицией 8-20 г 10 15) минут копичес вом сеансов 10 14 (в среднем 12), которая нами и стала исцопьзондгься н поспедуго щих экспериментах.3Спдботеппондя доза ДМВ - 84 мВт/см стимулирует юкстамедуллярный и кс рконый кровоток. "тренируег кровеносное русло почек, а сильнотеплоная доза ДМВ - 395 35 мВт/см - угнетает кровоток в этих наруж 2ных слоях почки и увеличивает кровендполнение, а следовательно, и флебостаэ медуллярного вещества, Это нарушение кровотока является, по нашему мнению, ос новой для развития воспалительного процесса. При проведении сопоставления с результатами морфологических исследований нами установлена прямая зависимость между увеличением дозы ДМВ (по мощно сти, экспозиции сеанса и продолжительности курса) - и токсическим, повреждающим действием на паренхиму почки, Поэтому с точки зрения исследователя - клинициста эти дозы являются неопоавданно большими 50 (мощность 395 мВт/см, экспозиция более 20 минут и курс более 14 сеансов) - и не применялись нами для моделирования, т.к.не являются близкими к естественным условиям, возникающим при лечении воспали тельного процесса в почках,Клин чег кое значение сцособэ моделирования с использованием слдботепловой дозы ДМВ (84 мВт/см, площадь излучателя4 10 гм в диаметре, экспозиция 8 20 мин, курс 10 14 сеансов) эдключается в том что дгже терапевтические режимы, не ныэывд ющие токсического цонрежддкщего действия, могут вызнать дктиниздцикз интерстициального нефрита с гицериммунныгл компонентом,Преимущество предлагаемого сццсобд заключается в использовании вздиглоснязи между увеличением юкстамедуплярного кровотока и возникнанениегл иммунокомцетенгного интерстициального нефритаПоложительный эффект предлагаемого способа состоит в повышении воспроизводимости иммунокомпетентного интерстицидпьного нефрита, что позволяет раскрыгь и изучать одну из сторон пагогенеза иммунокомцетентного интерстициапьного нефрита, связанного с особой формой рдсстройсгна почечной гемодинамики Создание данной модели предоставляет инфцрмдцик о цроноспапитепьном эффекте электромагнитных дециметровых волн спаботецпоной мощности нд иммунопогическую клеточную реакцию в почечном интерсгиции. Такая информация является цопезной и побуждает учитывать данный эффект цри назначении ДМВ-тердпии больным хроническим воспалительным процесогл в почках Формула изобретения 1. Способ моделирования интерстицидльного нефрита, включающий нарушение кровообращения в почке путем введения гормонально-активного препарата с последующим инфициронанием штаммом кишечной палочки,отл ича ющийсятем,что, с целью повышения воспроизводимости иммунокомпетентного интерстициапьного нефрита за счет увеличения юкстамедуллярного кровотока, кровообращение нарушают проведением дополнительного курсового облучения почек электромагнитными дециметровыми волнами слдботепловой мощности.2. Способ по и, 1, о т л и ч а ю щи й с я тем, что облучение проводят волнами частотой 460 МГц плотностью потока мощности до 83,7 мВт/см контактным методом излучателем диаметром 4,4 см по 8 - 20 мин ежедневно 10-14 процедур на курс моделирования.