Способ получения семян самонесовместимых форм петунии гибридной

(я)5 А 01 Н 1/02 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ ВИДЕТЕЛ ЬСТВУ АВТОРСКО ии институ.,1982, М 4, МЯН САМОТУНИИ ГИБбиологии, а ике, и может гии, а ожет ве, в ения ляю- гибы матеНа фиг,1 представлена мость влияния у-облучени компонента пыльцесмеси чество жизнеспособных се еся при опылении одного гибридной; нэ фиг,2 - доза пыльцевых трубок самон у-облученной совместимой гибридной в пестике расте ридной самонесовместимо ния.Спасо дозовая зэвисия совместимого а среднее колимян, образующецветка петунии вая кривая роста совместимой и пыльцы петунии ния петунии гибй после опылеГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СНЕСО 8 МЕСТИМЫХ ФОРМ ПРИДНОЙ(57) Изобретение относитсяименно к прикладной ген Изобретение относится к биолоименно к прикладной генетике, ибыть использовано в сельском хозяйплОдоводстве и цветоводстведля полинбредного потомства от самонеопщихся растений, в частности к петунридной.Целью изобретения является поние выхода жизнеспособных семянринского происхождения. б осуществляется следующим обЯО 1692402 А 1 быть использовано в сельском хозяйстве, в плодоводстве и цветоводстве для получения инбреного потомства от самонеопыляющихся растений, в частности у петунии гибридной, Цель изобретения - повышение выхода жизнеспособных семян материнского происхождения. При получении семян опыление проводят смесью собственной пыльцы и совместимого компонента, предварительно обработанного у-излучением, в соотношении 1:1, Совместимый компонент обрабатывают у -излучением в дозе 5000- 6000 Гр при мощности дозы 0,3 Гр/с в течение 45 - 55 ч,2 ил.,1 табл. Для сбора пыльцы петунии гибридной срезают бутонизированные цветки непосредственно перед их раскрытием. Еще закрытые пыльники помещают на сутки в чашки Петри в условиях комнатной температуры и нормального давления, Из растрескавшихся пыльников производят вытрушивание пыльцы путем быстрого ручного перемещения чашкиетри в разные стороны, Собранную пыльцу хранят при температуре -20 С в стеклянных плотных закрытых боксах. Для использования пыльцы ее перед началом эксперимента вьдерживают в течение 1 с при комнатной температуре и 80-ной влажности воздуха. Облучение проводят у-радиацией в стеклянных боксах дозами 5000 - 6000 Гр в течение 4,5 - 5,5 ч при мощности дозы 0,3 Гр/с.Облученную пыльцу смешивают в соотноШении 1;1 со свежесобранной пыльцой самонесовместимых растений и сразу проводят опыление пестиков самонесовместимых растений приготовленной смесью, Облученную пыльцу собирают с растений, 1692402перекрестно совместимых с растениями изсамонесовместимого клона,П р и м е р 1, Для сбора пыльцы петуниигибридной срезают бутонизированныецветки перед самым раскрытием. Пыльникипомещают на сутки в чашки Петри при комнатной температуре на 24 - 28 ч после того,как их извлекли из цветков, Вытрушиваниепыльцы из растрескавшихся пыльниковпроводят вручную путем резких перемещений чашек Петри, Собранную пыльцу помещают в стеклянные баксы и облучалиу-радиацией Со с мощностью дозы 0,3Гр/с в дозе 2000 Гр в течение 1,8 ч. Облученную пыльцу смешивают с аналогично собранной пыльцой самонесовместимыхрастений в соотношении 1;1, Затем проводят опыление пестиков самонесовместимыхрастений полученной смесью,Результаты опыления показали, чтоплоды образуются в 96 / случаев после и роведения опылений пыльцесмесями, Приэтом количество плодов с семенами составляло 68%, а в остальных плодах семян обнаружено не было, Среднее количество семянв плоде равнялось 9 + 6. Всхожесть семян66, Отмечено большое количество разрушенных и пустых семян, а также семян сдеградировавшим зародышем и эндоспермом (таблица и фиг.1).Путем окраски срезанных, предвари.тельно опыленных пестиков с помощьюфлуоресцентного красителя анилиновогоголубого показано, что пыльцевые трубкисовместимой пыльцы, облученной в дозе" 2000 Гр за 1,8 ч, сохраняют способностьдорастать до завязи и проникать в семяпочки (фиг.2). На фиг,2 также видно, что пыль.цевые трубки самонесовместимой пыльцыпри самостоятельном росте в пестике пре.кращают свое движение чуть ниже середины столбика пестика,П р и м е р 2, Пыльцу петунии гибриднойсобирают из пыльников по методике, опи"санной в примере 1. Облучение совместимогокомпонента для пыльцесмеси проводят у-радиацией Со в дозе 4000 Гр в течение 3,6 чпри мощности дозы 0,3 Гр/с, После этогопроводят опыление самонесовместимой петунии гибридной смесью из обученной совместимой и собственной самонесовместимойпыльцы в соотношении 1;1.Результаты опыления показывают, чтообразования плодов происходят в 98,Ь случаев, При этом в 72, случаев образуютсясеменные плоды, тогда как в остальных пло.дах семян обнаружено не было таблица),Количество семян в плодах не превышало29 и в среднем составляло 22 семян на плод,10 20 25 30 35 40 45 50 5 В плодах отмечено наличие большого количества пустых семян без зародыша, а также разрушенных семян. Путем окраски срезанных опыленных пестиков с помощью краси-. теля анилинового голубого показано, что пыльцевые трубки облученной совместимойпыльцы после применения дозы 4000 Гр втечение 3,6 ч сохраняют способность дорастать,до завязи и проникать в семяпочкифиг.1 и 2),П р и м е р 3, Пыльцу петунии гибриднойсобирают из пыльников по методике, описанной в примере 1, Облучение совместимого компонента для пыльцесмеси проводятдозой в 5000 Гр в течение 4,5 ч при мощности дозы 0,3 Гр/с, После этого проводятопыление пестиков растений самонесовместимого клона петунии гибридной пыльцесмесью из облученной совместимой исамонесовместимой пыльцы в соотношении1:1.Отмечено появление плодов для вехопылений. При этом количество плодов ссеменами составляет 96. Остальные характеризовались полным отсутствием семян или их остатками, Количество семян вплодах в среднем составляет 80 + 17. Семена характеризуются высокой всхожестью.Отмечено уменьшение в плодах пустых иразрушенных семян по сравнению с использованием дозы 4000 Гр за 3,6 ч. В результатевсхожесть семян достигла 88 (таблица ифиг,1),Путем проведения окраски срезанныхпестиков после их опыления облученной вдозе 5000 Гр за 4,5 ч совместимой пыльцойс помощью красителя анилинового голубогопоказано, что рост пыльцевых трубок продолжается до завязи (фиг,2),П р и м е р 4. Пыльцу собирают из пыльника петунии гибридной по методике; описанной в примере 1. Совместимую пыльцу,собранную с перекрестно совместимых сопыляемым клоном растений, облучают дозой 6000 Гр в течение 5,5 ч при мощностидозы 0,3 Гр/с. После облучения проводятсмешивание облученного компонента с самонесовместимой пыльцой в соотношении1;1 и полученной смесью опыляют самонесовместимые растения. Отмечено появление плодов для всех опылений. Количествосеменных плодов достигает 96 от всегоколичества. Среднее количество семян вплодах равняется 8515 (таблица). Всхожесть семян достигла 90 По методике сиспользованием флуоресцентного красителя анилинового голубого определено, чторост пыльцевых трубок облученной совместимой пыльцы происходит до завязи,1692402 Среднее количество об- разовавшихся в одном опылении жизнеспособных семян,шт. Всхожесть семян,Среднее количество семян, образовавшихся в одномопылении,шт Количество плодов с семенами от общего числа опылений, ,Количество образовавшихся плодовот общегочисла опылений,ОДоза,Гр9395989998100215 87 68 70 95 93 96 11 0 П р и м е р 5, Сбор пыльцы осуществляют по методике, описанной.в примере 1,Совместимую пыльцу облучают в дозе 7000Гр в течение 6,4 ч при мощности дозы у-ра.диации Со 0,3 Гр/сПосле облучения про. водят смешивание облученного компонентас самонесовместимой пыльцой в соотношении 1:1 и полученной смесью опыляют самонесовместимые растения,Отмечено резкое уменьшение количества образовавшихся плодов в опылениях,причем количество плодов с семенами сократилось до 11, Количество семян в плодесоставляет 3 2, В то же время всхожестьсемян осталась на уровне 87, что указывает на низкое содержание в плодах неполнеценных семян (таблица и фиг,1).Использование предлагаемого способапозволит получить специалистам-селекционерам целый ряд преимуществ по сравнению с известным.Это повышение выхода жизнеспособных семян материнского происхождения в 5 - 6 раэ по сравнению с применениэм известного способа,10 Уменьшение затрат на облучение у-радиацией за счет сокращения времени работы облучателя, и как следствие этого,сокращения времени работы обслуживающего персонала,15 Уменьшение времени эксплуатацииоборудования облучателя и подсобных помещений, т.е. снижение амортизационныхрасходов.Формула изобретения20 Способ получения семян самонесовместимих форм петунии гибридной, включающий опыление смесью собственной пыльцыи пыльцы совместимого компонента, предварительно обработанного у-излучением, в25 соотношении 1;1, отл и ч а ю щи й ся тем,что, с целью повышения выхода жизнеспособных семян материнского происхождения, совместимый компонент обрабатывают у -излучением в дозе 5000 - 6000 Гр при30 мощности дозы 0,3 Гр/с в течение 4,5-5,5 ч,за, Гр сн О4 Ь 82 орректор Т,Пал тилло едакто каз 4019 ВНИИГИЛ Госуда 100о Й 807 О ,з 60 ф 5090 2 3 9 5 8 7 6Доза, В,с-сатсобкестиноя, С 8: саиоиесобиестиная оьиьцСоставитель Е,ШкрадюкТехред М.Моргентал К Тираж Подписноевенного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ ССС 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 роизводственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101