Способ определения качества семян злаков

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 1671182 3 А 0 1 0 ОПИ Е ИЗОБРЕТЕНИЯ ЛЬСТ 8 У ныхпо- .выОСУДАРСТВЕНФэ Й КОМИТЕТО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМРИ ГКНТ СССР А 8 ТОРСКОМУ С 8 И(71) Институт молекулярной биологии и биохимии АН КазССР(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАЧЕСТВАСЕМЯН ДЛАКОВ(57) Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к семеноводству, ипредназначено для тестирования посевкачеств семян и определения их жизнессобности, Цель изобретения является пошение точности определения и снижениевремени анализа. Поставленная цель достигается тем, что в способе, включающемоперации замачивания семян в воде, их выИзобретение относи оэяйству, в частности к ипредназначено для тести хкачеств семян и определ особности.Целью изобретения является повышение точности определения и снижение времени анализа,Пример,Зерна 7 образцов различных гибридови разновидностей кукурузы, 6 сортов рисаи пшеницы проращивали в чашках Петри насмоченной водой фильтровальной бумаге втечение 7 дн, Через каждые сутки измерялидлину ростка и определяли а- амилаэнуюактивность. а - амилазу выделяли из зерна,лишенного ростка, 20 мМ раствором СаС 12 держку и определение ферментативной активности, по которой судят о посевных качествах семян, ферментативную активность определяют по активности а - амилазы при прорастании семян, у которых удалены ростки, Ферментативную активность определяют по изменению активности а - амилаэы на моменты времени - 2 и 3 сут. прорастания семян, по которой судят о посевных качествах семян. Показатель посевного качества опоеделяют по формуле К = (Аз - А 2) /10 где А 2 и Аз а - активность а - амилаэы, Использование предлагаемого способа позволяет по сравнению с существующими достигнуть четкой градации показателя посевных качеств, что весьма важно как для практики сельского хозяйства и семеноводства, так и для селекции злаковых. 1 ил. 1 табл,при соотношении материал: экстрагент 1:5 в течение 15-20 мин. Гомогенат ценрифугировали при 6000 о 15 мин, Супернатант нагревали на водяной бане при 70 С в течение 15 мин (для инактивации а- амилазы). Осадок после прогрева удаляли центрифугированием. В качестве субстрата использовали 0,02 -ный раствор крахмала(растворимый крахмал), приготовленный на 0,1 М ацетатном буфере рН 5,0, К 5 мл предварительно прогретого при 30 С субстрата добавляли 0,1 мл фермента, проводили инкубацию при 30 С в течение 5-10 мин. По истечении времени инкубации в смесь добавляли 2 мл 1 й НО и 0,2 мл раствора 0,2-ного 32 в 2К 1. Измеряли поглощение при 620 мм, В контрольныедля каждо 1671182го опыта) пробирки перед инкчбацией добавляли 2 мл 1 й НС 1, а затем фермент, Поразнице экстинкций контроля и опыта определяли активность а - амилазы. За единицу активности принимали 0,01 разницы 5между экстинкцией контроля и опыта,Рассчитывали активность фермента на 1 млпрепарата эа 1 ч инкубации,На рисунке приведены калибровочныекоивые соответствия разности содержания 10а- амилазы в центрифугате посевному качеству семян злака для элаковых культурпшеницы, риса, кукурузы. Как видно иэ рисунка, четко наблюдается наличие прямойсвязи между длиной ростка и а- амилазной 15активностью в интервале 1-5 сут. прорастания. Динамика нарастания активности аамилаэы в период 2-3 сут. проращивания веще большей степени отражает ростовыеспособности (семенные качества) зерна. 20Полученные данные представлены в таблице.Расчеты а - амилаэной активностипроводили по формулеК -АЗ-А 2 2510Таким образом, на основании данныхприведенных в таблице, видно, что показатель посевного качества хорошо коррелирует с определением жизнеспособности поизвестному способу, но является очень точным и чувствительным показателем, На основании сравнения коэффициентапосевного качества для большого количества образцов предлагается следующая калибровка этого показателя, Для кукурузыобразцы с величиной коэффициента 0-10обладают очень плохими посевными качествами, 10-20-слабыми, 20-50-средними, 5070-хорошими и от 70 и выше - оченьхорошими посевными качествами, для рисаи пшеницы 0-5-плохими, 5-15-средними, 1530-хорошими и от 30 и выше очень хорошими посевными качествами. Предлагаемый способ по сравнению с известным отличается высокая точностью. Фермент а - амилаэа является основным при прорастании, дегидрогеназы бывают активны и в жизнеспособных семенах. Известный способ является качественным и границы перехода окраски и ее яркости у всхожих семян весьма условны. Способ определения дЕгидрогеназной активности дает большой разброс данных для семян с различной всхожестью. Для осуществления этого способа необходимо выделение зародышей и их окраска, т,е. он трудоемок,Предлагаеффый способ приводит к снижению трудозатрат. В связи с тем, что точность известного способа невелика, для получения достоверных данных необходимо увеличение выборки (числа зародышей). При уровне значимости Р =0,2 оно достигает 100 шт, зародышей. Кроме того, для осуществления этого способа необходимо наличие дефицитного дорогостоящего реактива 2,3,5 - трифенилтетразол-хлорида.В связи с повышением точности предлагаемого способа выборку можно ограничить 10 семенами, Определение аамилаэы проводят на целом зерне, а не на зародышах, что существенно снижает трудозатраты.Формула изобретения Способ определения качества семян злаков, включающий взятие пробы семян, замачивание, выдержку во влажной камере при 20-25 С и определение ферментативной активности, отличающийся тем, что, с целью повышения точности определения и снижения времени анализа на ферментативную активность, определяют на активность а -амилаэы путем гомогенизации семян после отделения у них проростков на 2-е и 3-и сутки проращивания, а о качестве семян судят по разности полученных значений активности .а - амилаэы на 3-и и 2-е сутки.1671182 Влияние ф-амилаэной активности на качество семян Название зерновой культуры Показатель посевного качества Определение посевных качеств илиаиэнеспособности ссолями тетравола,Цвет красяшихсячастей зародыша Рис Казахстанский 332,5 (высокая Красный окрашенныйаивнеспособность) полностью Дубовский 129Ув. рос 59 59 Слабо окрашен 12,0 (средняя Окрашен не весьаиэнеспособность) Кубань 3 165 (низкая Окрашен не весьаизеспособность) не ярко Родина 108 (ниэкая Окрашен не весьаизнеспособностл) не ярко Прннаннческий(аиэнеспособность) баиый ЗТВ 133 (низкая То аеаиэнеспособность) ПЬидельнайвер КазахстанскийЭ/67 14,2 (ниэкая Слабо окрашенаиэнеспособность) Гибрнд 5049 86,1 (высокаяаиэнеспособность) Очень сильноокрашен 16,1 (высокая Сильно окрашенжизнеспособность) Пнепровский 247 459 (средняя Окраска слабая аиэнеспособность) Лопающаяся 877 (высокаяаизнеспособность) Ароматный Очень сильноокрашен ПшеницаИильтурум 401 4 11 (высокая Ярко окрашенаизнеспособность) практически весь 44,3 (высокая То аеаиэнеспособность) Лютесценс1105183 н 51,6 (высокая аиэнеспособность) Эритроспернум 281 1,8 (ниэкая Очень слабоаизнеспособность) окрашен Иильтурун1203- 13-79 21,7 (ниэкая Слабо окрашенаизнеспособность) Иильтурун 7117 14, Э (ниэкая Слабо окрашенаиэнеспособность) Лютесценс 121 1-4-79 101 (низкая Очень слабоаиэнеспособность) окрашен Иипьтурум1203-13-7 9 24,1 (высокая Окрашен практическиаиэнеспособность) полностью(ф СЧ о в н о Ф о х о ва О то о ох К Составитель Т.Лежневаактор Т,Куркова Техред М.Моргентал Корректор С.Шев изводственно.издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 каз 2778 Тираж 414 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СС 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5