Способ определения и отбора морозоустойчивых сортов и селекционного материала озимых зерновых культур

/00 ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР О ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ц,К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ но-гене тичес юующих раотаничес 7, с. 974(21) 3793767/30-15(71) Всесоюзный селекциоческий институт(56) Карманенко Н.М. Энеэффективность дыхания устений озимой пшеницы.кий журнал, 1978, т.63,977.(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ И ОТБОРА МОРОЗОУСТОЙЧИВЫХ СОРТОВ И СЕЛЕКЦИОННОГО МАТЕРИАЛА ОЗИИЫХ ЗЕРНОВЫХ КУЛЬТУР(57) Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к способамвыявления и отбора морозоустойчивыесортов и селекционного материала.Цель изобретения - повышение достоверности при упрощении, Проросткиозимой пшеницы подвергают закаливаниювыделяют из них митохондрии, к суспензии которых добавляют 150-250 мкМаденозиндифосФата (АДФ), и измеряютпродолжительность периода его потребления митохондриями, В качестве морозостойких отбирают те сорта или тотселекционный материал, на потребление АДФ митохондриями которых требуется меньший промежуток времени.3 табл, 1382439Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к способам выявления и отбора морозоустойчивых сортов и селекционного материала. 5Цель изобретения - повышение достоверности при упрощении.П р и м е р 1. Исследованию подвергают разные генотипы озимой пшеницы:высокоморозоустойчивый сорт Одес , ская 16 и слабоморозоустойчивый сорт Беэостая 1.Семена тщательно калибруют и высевают в сосуды с почвой. Предварительное проращивание в течение 10 сут 15 осуществляют при + 20 - 22 С и нео прерывном освещении, Для дальнейшего прохождения первой фазы закаливания растения подвергают воздействиюотемпературы + 1 - 2 С при непрерывном 20 освещении в течение 10 сут. Вторую фазу закаливания продолжительностью в 5 сут растения проходят в темнотеопри-4 С.Для выделения митохондрий используют нижнюю этиолированную.часть растений. Функциональную активность митохондрий определяют полярографически 30(определяют скорость поглощения митохондриями кислорода в полярографической ячейке объемом 1,6 мл с помощьюсовмещенного закрытого электрода Кларка), В качестве полупроницаемой мембраны используют полиэтиленовую пленоку толщииой 10 мкм. Температуру 26 Споддерживают с помощью водяногоультратермостата, Экзогенный субстрат(АДФ) - вносят в отдельные пробысуспензии митохондрий в количестве80, 150, 250, 300 мкИ, В препаратеАДФ предварительно определяют количество действующего вещества, Дляоценки сортов известным способом определяют соотношение внесенного вполярографическую ячейку экзогенного РДФ и количество поглощенного кислорода, т.е. определяют коэффициентАДФ/О, характеризующий меру окислительного фосфорилирования. 11 нтохондриальный белок определяют по Лоури.Интенсивность поглощения кислородавыражается в наноатомах кислородав минуту на 1 мг белка Для оценки сортов новым способом измеряют продолжительность периода потребления АДФ (Ь) в секундах,Влияние концентрации экзогенногоАДФ на скорость окислительной и фосфорилирующей функций митохондрий призакаливании сортов озимой пшеницы,различающихся по морозоустойчивости,показано в табл, 1,Представленные в табл, 1 данныесвидетельствуют о том, что в присутствии 150-250 мкМ экзогенного АДФскорость его потребления митохондриями достоверно коррелирует с морозоустойчивостью изучаемых сортов озимойпшеницы: во всех вариантах опыта продолжительность потребления АДФ митохондриями сорта Одесская 16 значительно меньше, чем у митохондрий сортаБезостая 1.П р и м е р 2. Проводят опыты,аналогичные примеру 1,Сопоставительные данные нового иизвестного способов оценки морозоустойчивости сортов озимой пшеницыпредставлены в табл. 2,Из приведенных данных табл,2 видно, что изменение величины АДФ/О непропорционально изменению временифосфорилирования. Например, у сортаСан-Пасторе величина АДФ/О 1,27 водном случае соответствует временифосфорилирования 181 с, в другомслучае такая же величина АДФ/О соответствует 281 с. Аналогичная картина наблюдается и у сорта Одесская 16.П р и м е р 3. Проводят сравнительное изучение новым способом сортовозимой пшеницы с известной морозоустойчивостью,Результаты оценки морозоустойчивости сортов озимой пшеницы новым способом представлены в табл 3.Из приведенных данных табл. 3 видно, что наиболее мороэоустойчивый.сорт Одесская 16 утилизирует субстрат фосфорилирования в течение142 с, в то время как слабоморозоустойчивый сорт Русалка - в течение215 сВременная характеристикаявляется надежным критерием отборагенотипов на морозоустойчивость,Кроме того, способ требует минимальных трудозатрат, Проводить исследования может лаборант средней квалификации, При проведении анализовважно внести в суспензию митохондрийнеобходимые экзогенные субстраты, ав дальнейшем полученные данные автоматически фиксируются на самописце.Данные сразу же можно читать и да1382439 Таблица 1 Сорт Первая фаза закаливания Вторая фаза закаливания АДФ/О Ь, с АДФ/О 80 мкМ экэогенного АДФ 0,88 Безостая 1 0,92 130 150 Одесская 16 1,02 150 1,30 165 150 мкМ экэогенного АДФ 160 Безостая 1 1,30 Одесская 16 1,44 120 1,35 120 135151 250 мкМ экэогенного АДФ Безостая 1 1,78 Одесская 16 1,88 135 1,61 200 90 140 1,80 300 мкМ экзогенного АДФ 1,46 Беэостая 1 250 Одесская 16 1,91 1,68 120 150 Таблица 2 Показатель Сорт 200 250 Одесская 16 АДФ/О 1,53 1,82 1,67(высокоморозоустойчивый) Ь,с 134 142 156 вать оценку исследуемому материалу,в то время как получение полных данных по величине АДФ/О требует отисследователя высокой специальнойподготовки и проведения целого рядадополнительных сложных исследований. Формула изобретенияСпособ определения и отбора мороэоустойчивых сортов и селекционного материала озимых зерновых культур, включающий выращивание растений в условиях закаливания, выделение из них митохондрий, добавление аденозиндифосфата к их суспенэии, измерение их фосфорилирукщей активности и 5отбор особей с наибольшей фосфорилирующей активностью митохондрий, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения достоверности приупрощении, аденозиндифосфат добавляют в количестве 150-250 мкМ, а фосфорилирующую активность измеряютпо промежутку времени, за которыйон метаболизируется суспенэией митохондрий. Экзогенный АДФ, мкМТ