Способ диагностики гипоксии

Сефз Сфветскик Сециалистичесиик РеслубликОП ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Ф.;Р К АВТОУСКОМУ СВ ВТЕЛЬСТВУ(22)Заявлено 150379 (21) 2736665/28-13 (51)М. КЛ. с присоединением заявки Но(23) Приоритет А 61 В 10/00 ГосударственниА комитет СССР но дедам нзобретеннЯ н открытнА(72) Авторы изобретения НА. Друккер, Г. Г, Жданов, Д. С. Запрудская и В. А. Михельсон Научно-исследовательский институт акушерства и педиатриии Второй московский ордена Ленина государственныймедицинский институт им, Н.И. Пирогова(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГИПОКСИИ Ф 3 Зйи УЦ,; Изобретение бтносится к медицинеи может найти применение в клинической практике.Известен способ диагностики гипоксии путем определения в кровисодержания продуктов обмена пуриновОднако известный способ не обеспечивает высокой точности.Цель изобретения - повышениеточности способа,Цель достигается путем определения в крови содержания продуктовобмена пуринов, а также концентрацийксантина и гуанина.Для определения ксантина и гуанй-на у больного берут 0,2 мл крови изпальца в пробирку с 1 мл охлажденной 10-ной трихлоруксусной кислоты,тщательно перемешивают и центрифугируют 10 мин при 1500 об/мин.Центрифугат сливают в пробирку, косадку добавляют 0,5 мл 5-нойтрихлоруксусной кислоты, перемешивают и центрифугируют. Центрифугатысмешивают с 10-ным раствором ИаОН,дозодя до нейтральной реакции. добавляют 4 мл медного реактива (1 гСиЯО 4 5 Н 20 5 мл концентрированного раствора ИН 4 ОН смешивают и разводятдо 100 мп водой) в 1 мл 10-ногораствора глюкозы. Перемешивают и 5 ставят на кипящую водяную баню на10 мин. Затем охлаждают, центрифуги 1руют 10 мин при 1500 об/мин до прозрачности. Центрифугат выливают.Осадок промывают два раза 5 мл дис О тиллированной воды до обесцвечиванияголубого раствора.Затем добавляют 1 мл 5 н, НСВ и1,25 мл НО, Нагревают ее более5 мин, чтобы растворить медно-пуриновую соль, Охлаждают, добавляют0,5 мл 1-ного раствора КЗГе(СМ)а ),перемешивают, центрифугируют 10 мин.Берут 2 мл центрифугата, 1 мн раствора фолина-Чикальтео, разведенного1:1 и 5 мл насыщенного раствораИа СОПолученный раствор синеватой окраски колориметрируют на ФЭКе прикрасном светофильтре кюветами шириной 30 мм против контроля. Для приготовления контроля берут 2 мл 5 н.НС 6 и 2,5 мп воды, нагревают 5 мин,охлаждают. Добавляют 1 мл 1-огораствора КоГе(СИ)6 ), перемешивают Зф"центрифугируют 10 мин, Берут 4 мл99728 Исследуемые показатели Группы детей 02, мм.рт.ст. ксантин и гуанин,мгЪ 1. Здоровые Новорож- денные 50 38,0+0,97 5,20+0,35 0,76 50 60,0+ 1,75 4,20+0,37 0,79 0,71 3 сут 7 сут 50 74,8+2,10 3,75+0, 33 1 мес1 г,25 83,0 ф 4,64 3,71+0,28 0,71 1,1 г 7 лет 27 86, 3+3,23 8, 33+0, 30 0,73 2. Больные с асФиксией Новорож- денные 0,84 39 29,8+1,10 12,06+0,40 39 39,012,75 10,80+1,00 0,89 3 сут 7 сут 39 48,0+1,90, 8,45+0,30 0,75 3. Больные с тяжелыми Формами пневмонии 31 52,2+2,4128 60,4+3,28 30 62,3+3,15 23,60+1,40 0,71 16,71 ф 1,51 0,72 14,20 ф 1,32 0,76 центрифугата, . 2 мл раствора фолина-Чикальтео, разведенного 1:1 и 10 млнасыщенного раствора Ха 2 СО.Раочет количества ксантина и гуанина производят по стандарту ксантина. Например,0,429400Х гй)= где 0,129 - показание ФЭКа;0,018 - показание ФЭКа, соот-,ветствующее 1 мкг ксантина 10,2 - количество мл крови,используемое для опреде.ления;00 - мл крови 11000- количество мкг в 1 мг.В таблице представлены данные о содеряании Ксантина и гуанина и напряяении кислорода (рО) в крови у детей раннего возраста.При сопоставлении;указайнйх данных установлена высокая корреляция между уровнем ксантина и гуанина в крови, величиной рО и степенью гипоксии, что подтверждено исследованиями, проведенными у 220 детей в возрасте от О до 7 лет. П р и м е р 1. У женщины Р., 23 лет, ребенок родился в состоянии асфиксии с оценкой по шкале Апгар 4 балла. Содеряание ксантина и гуанина в крови - 11,9 мг%, р 0226,8 мм рт. ст. Йа третий день после проведенной интенсивной терапии, когда асфиксия была ликвидирована, уровень ксантина и гуанина снизился до 4,1 мгЪ, а рО увеличилось до 62,2 Ъм,рт. ст. На седьмые сутки эти показатели были равны соответственно 3,5 мг% и 76,8 мм рт. ст. П р и м е р, 2. Ребенок С.,4 мес. Диагноз - двухсторонняя мелкоочаговая пневмония дыхательнаянедостаточность 111 ст. Содеряаниексантина и гуанина в крови - 27 мгЪ,р 02 - 45 мм рт. ст.Таким образом, повьпаение в крови И уровня ксантнна и гуанина позволяет.с высокой степенью объективностисудить о наличии у больных гипоксии.Предлагаемый способ достаточно специфичен, сравнительно прост в вы полнении, не требует много времении может быть использован в любойбиохимической лаборатории.799728 Составитель С,МалютинаРедактор Н.Буюаева Теиред Я. осталов Корректор М.Коста Заказ 10225/3 Тираа 698. Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, 3-35, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП ффПатентф, г. Уагород, ул. Проектная, 4 Формула изобретенияСпособ диагностики гипоксии путем определения в крови содержания продуктов обмена пуринов, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с цельюповьааения точности способа, в кровиопределяют концентрации ксантинаи гуанина.