Способ получения диплоидного гиногенетического потомства у карповых рыб

.сная Союз Соеетскнх Соцналнстнческнк Респубпнк(23) ПриоритетОпубликовано 0 1) 2046249/28-13 ки )К 9 осударстаенный комн СССР но дедам нзобретенн н открытий.А.Головинская, Н,Б.Черфас и Л.И.Цветков аучно-исследовательский институго рыбного хозяйства 71 Заявитель Всесоюэ ны прудо54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДИПЛОИДНОГО ГИНОГЕНЕТИЧЕСКОГО ПОТОМСТВА У КАРПОВЫХ РЫБиплоидныханних стаабого проИзобретение относится к области рыбоводства, в частности к способу получения диплоидного гиногенетиче кого потомства у карповых рыб. Известен способ получения диплоидного гиногенетического потомства (т.е. с чисто материнской наследственностью) у карповых рыб путем осеменения икры инактивированной спермой (т.е. предварительно облученной ионизирующей радиацией) с последую" щим обесклеиванием, инкубацией ее и отбором гиногенетических диплоидов В известном способе осеменение икры рыб инактивированной спермой вызывает генетическую инактивацию мужского наследственного аппарата. Получаемое потомство в этом случае имеет в своем составе гиногенетических гаплоидных особей, т.е. особей с одинарным набором женских хромосом и гиногенетических диплоидных особей, т.е. особей с удвоенным набором женских хромосом. Основную массу потомства составляет гаплоидные потомки, являющиеся нежизнеспособными. Численность гиногенетических диплоидов зависит от частоты диплоизации и беэ применения специальных воэдействий составляет меньшивс вола осемененных икринок 11)При получении диплоидного гиногенетического потомства требуется проводить отбор диплоидов из общей массы гаплоидов, что и осуществляется обычно в первые двое суток после вылупления по внешним различиям.Гаплоидные личинки характеризуются определенным комплексом морфологических нарушений, известных под названием гаплоидного синдрома, (т.е. искривление тела, вздутие пери карда и т.д.), степень выраженности которого варьирует. На более поздних стадиях развития гаплоидные личинки отличаются от нормальных диплоидных потомков своей неспособностью нормально плавать и вскоре погибают.Отбор диплоидных личинок визуально вручную с помощью пипетки не позволяет использовать инкубационные аппараты в промыаленном масштабе, поскольку диплоидные личинки в первое время после вылупления лежат на дне вместе с гаплоидными.е затруднен отбор дот гаплоидных на рразвития в сиЛу слявления у некоторой части личинокгаплоидиого синдрома, последние попадают вместе с отобранными диплоидными личинками. Совместное же выдерживание диплоидных личинок с гаплоидными до того периода, когда диплоидные личинки начинают активно плаватьв толще воды, чтобы их можно былолегко отобрать, в свою очередь, создает неблагоприятные условия в инкубационном аппарате.Целью изобретения является повышение эффективности селекционного,процесса,Для достижения этой цели, отборгиногенетических диплоидов осуществляют при помощи пластин, вертикально 15устанавливаемых в инкубационном сосуде, для приклеивания выклюнувшихсяличинок.Способ поясняется чертежом.Настоящий способ основан на том,что в естественных условиях личинкибольшинства карповых рыб сразу послевылупления приклеиваются к субстрату (обычная мягкая растительность вводоеме) и в таком состоянии находятся в течение нескольких суток дорассасывания желточного мешка и начала активного питания. Это свойство личинок карповых рыб использовано,цля отбора гиногенетических диплоидов,поскольку гаплоиды, возникающие вгиногенетических их партиях и составляющие в них основную массу, лишеныспособности приклеиваться к субстрату и находятся на дне.Способ заключается в том, что дляполучения текучей икры и спермы проводят инъецирование производителей рыб,отцеживают сперму и подвергаютпоследнюю облучению в высоких дозахионизирующей радиации (80-100 тыс, 40Рентгенов).Режим облучения спермы зависитот типа аппарата, на котором оно проводится. Например, на аппарате РУПрежим облучения следующий: 210 кВ, 4515 мА 3240 р/мин, время облученияоколо 5 мин, Далее проводят осемене -ние икры, облученной спермой, т.е.инактивированной, при этом на 300500 тыс. штук икринок достаточноиметь 1-1,5 мл инактивированнойспермы,После осеменения икру обесклеивают растворами гиалуронидаэы и танинаи переносят в инкубационный сосуд 1,например аппарат Вейса, в которомвертикально устанавливают пластины 2.Процесс инкубации проводят обычнымобразом, т.е. воду подают в сосуд 1аппарата по водопадающему патрубку 3,а слив воды осуществляют из сливного патрубка 4, Восходящий поток водысоздает оптимальный режим инкубацииикры рыб, которая продолжается 45 дней при 19-20 С,Вскоре после вылупления диплоидные гиногенетические личинки, совершая короткие движения, выходят из общей массы потомства и приклеиваются к пластинам 2, Основная же масса гаплоидных личинок держится в нижней части сосуда, пассивно перемещаясь в толще воды, и не прикрепляется к пластинам 2.Использование настоящего способа в рыбоводстве позволит сократить сроки получения инбредного потомства, решив вопросы регуляции пола у рыб и ряд других вопросов теоретической и поикладной селекции.Формула изобретенияСпособ получения диплоидного гиногенетического потомства у карповых рыб путем осеменения икры инактивированной спермой с последующим обесклеиванием, инкубацией ее и отбором гиногенетических диплоидов, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения эффективности селекционного процесса, отбор гиногенетических диплоидов осуществляют при помощи пластин, вертикально устанавливаемьх в инкубационном сосуде, для приклеивания выклюнувшнхся личинок.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе 1. Цветкова Л.И. Исследование потомства от самки карпа гиногенетического происхождения, - Труды ВНИИПРХа, т. ХЧП, М 1971, с, 234-239 (прототип) .7385 б 5Составитель Лебедок едактор Л.Курасова Техред И.Асталош Корректор Н.Григору каэ 3524/56 Тираж 723 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам нэобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раущская наб., д. 4/5 Филиал ППП Патент, г. Ужгород, Ул. Проектная, 4