Способ активации яиц тутового шелкопряда к партеногенезу

65 бб 07 Союз Советских Социалистических Республик(43) Опубликовано 15.01.79 Бизллетень М 1 (45) Е 1 ата опубликования описания 15.О 4,79,(53) УДК 638,221.8/088.8/ ло делам изобретений и открытий(72) Авторы изобретения Л. В. Струнникова Институт биологии развития АН СССР/51/ СПОСОБ АКТИВАЦИИ ЯИЦ ТУТОВОГО ЫЕЛКОПРЯДАК ПАРТЕНОГЕНОЗУ осударственный комитет(23) Приоритет Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к искусственному разведению шелковичного червя и может быть использовано в производстве грены на гренажных заводах.В шелководстве интенсивно разрабатывается проблема использования искуственно выведенных партеноклонов женского пола в качестве партнеров для скренивания как с нормальными, так и с двухлетальными самцами с целью получения высокогетерозисных гибридов Г 1 соответственно обоеполых и только мужского пола,15Известен способ активации яиц, который заключается в том, цто из тела каждой бабочки вырезают яичник с неоплодотворенными яйцами, отмывают их от стенок овариол, и лйца каждой бабочки завязывают отдельно в марлевый мешочек с этикеткой и затем погружают на 18о мин. в воду, нагретую до 10 С. После активации и просушки яйца рассыпают в бумажные мешочки, Одновременно с этим остаток тела каждой бабочки /голова и грудь/ также помещают в отдель-, ный мешочек под тем же номером, какой имеет мешочек с лйцами, чтобы затем эти остатки проверить микроскопическим способом на наличие спор микроорганизмов, вызывающих тяжелое эпизотицеское заболевание шелкопряда - пебрину 1.Известен также способ активации, который содержит ту же последовательность операций, только активация выполняется путем помещения мешочков с неопределенными отмытыми яйцами в низкие или минусовые температуры 2.Недостатком известных способов получения партеногенетической грены является то, что они сложны и трудоемки по сравнению с обыцной технологией приготовления племенной грены, которал сводится к тому, цто бабочек спаривают затем распаривают, и самок сажают в изоляционные мешочки, где они откладывают грену. Каждый мешочек с бабочкой и греной хранится до микроанализа. Трудоемкость получения партеноклоновстановится ясной, если учесть, что индивидуальной активации к партеногенозу допнны в короткий срок /2 недели/ежегодно подвергаться яйца, изъятыеиз сотен тысяч бабочек,Цепь изобретения состоит в устранении трудоемких процессов выделениянеопподотворенных яиц из тела бабочкисамки.Поставленная цель достигается темчто неосемененных бабочек - самок охолаждают при температуре от -5 до -7 Св течение 6-12 ч, а затем через 6-8 чпосле охлаждения их спаривают со стерильными самцами и размещают в изоляционные мешочки для откладки грены,Такая возмонность возникла послето.о, как была показана воэможностьактивации неоплодотворенных яиц в телебабочек путем охлан(дения например,при температуре -6 С в течение 6 ч,оСамым ценным оказалось то что охлажденные бабочки после перемещения иэхолодильника в комнатнуо температуруоживали", нормально спаривались ссамцами и откладывали грену /нессемененные бабочки грену не откладывают/,Путем регулирования начала и продолжительности спаривания после активациилегко заставить бабочек откладыватьгрену спустя 6-8 ч после конца охландения. За это время яйца в результатепредшест ующего действия низкой темпера;уры приступают в подавляющем богьшинстве к партеногенетическому развитию в теле бабочки. Проникшие в такиеяйца сперматозоиды унте не могут оплодотворяться и, следовательно, изменятьначавшееся партеногенетическое развитие, Однако редкие яички, не начавшиев силу каких-то причин развиватьсяпартеногенетически, будут ими оплодотворены, и из них чылупится обычноеобоеполое потомство. Чтобы избежатьвылупление таких гусениц, предполагается спаривать самок с самцами, имеющими стерильные сперматозоиды. Полностью стерильные самцы возникают в потомстве, полученном в результате скре"щивания самцов, облученных-лучами вдозе 10 кр, с нормальными,т, е. необлученными самками. Полученные такимпутем стерильные самцы нормально осеменяют партеногенетических самок, стимулируя их к откладке яиц. Однако опподотворенные их сперматозоидами единичные яйца, не вступившие на путьпартеногееза, гибнут до вылуплениягмчинок, Благодаря этому из яиц, отло охлажденными бабочками, выпуптолько партеногенетическИе гуодного женского пола, что пока- табл, 1. женных ляются сеницы зано в Таблица 1 Количество Способ активации яиц Оживлениеяиц, 3 самок среди вылупившихся гусеницо Изъятая грена 46 Со18 мин /аналог/,88-90 100 оИзъятая грена, -66 ч /прототип/,.,58 100 оВ теле бабочек, -66 ч /предлагаемый/ 100.Как видно иэ таблицы, предлагаемымспособом получены партеногенетическиеяйца, дающие 721 оживления. Этот про,цент стоит на уровне прототипа и усту,пает оживлению /883/ при прогреве иэволеченных яиц при 46 С в течение 18 мин./аналог/. Это объясняется тем, что взятый опыт клон отселектирован.на активизацию высокой температурой. Как показали исследования, способность к акти,виэации высокими и низкими температурами не однозначна, и, следовательно,необходима специальная селекция на высокую способность к партеногенезу под 45действием низких или нулевых температур, чтобы поднять процент оживлениядо 85-903.Таким образом, в предлагаемом спо Ос 1 бе нет трудоемких процессов свойственных аналогу и прототипу. По сравнению с обычной технологией приготовления грены при естественном размножении,в предлагаемый способ введены лишь технически оцень простые приемы: охлаждение бабочек-самок . и облучение - лучами небольшого количества бабочексамцов, проводимое на одно поколениераньше получения основной партеногенетической генерации.Ф656607 ЗО 50 Л/РйЗаказ 3201 Изд.,% тираж Ш 1 ИИИИ Государственного кпьигета Сове) а Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, 113035, Раушскаи наб 4 Формула изобретения Способ активации яиц тутового шелкопряда к партеногенезу, включающий охлаждение неоплодотворенных яиц о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью устранения трудоемких процессов выделения неоплодотворенных яиц из тела бабочки-самки, неосемененных бабочек- самок охлаждают при температуре ото о,-5 до -7 С в течение 6-12 ч, а затем через 6-8 ч после охлаждения их спариваю 1 со стерильными самками и размещают в изоляционные мешс)чки для откладки грены. 5 Источники информации принятые во внимание при;кспертизе 1, Лстауров Б, Л, Цитогенетика развития тутового шелкопряда и ее экспериментальный контроль, "Наука" И 1968,с. 28-29,2. Терская Е, Р, и Струнникова В, Л.Генетика" т, 10, 11 3 1975 с. 51-61,