Способ сохранения жизнеспособных личинок i возраста н. bovis

)5 А 01 К 67/О ИЗОБРЕ СА НИ Оп К АВ ьев и Г.И.Мет(53) 638.8(088. (56) 61 пдг 1 сЬ й. о 1 Нуробегеа -гпр 1 апбет 1 п 1,Мед. Ептоаа (54) СПОСОБ СОБНЫХ ЛИЧ (57) Изобретен ского хозяйст ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР КОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(72) В.З.Ямов, М.Н,Евстафели 8)Е. Яши 1 са 1 о 5 11 гмпз 1 га 1 агчае11 пеама О 1 ртега; Оезтг 1 дае Ье 1 его 1 одоцз гпвг 1 пе Ьоз 1 з,- од., 1970, 7; л.2, р, 256-260. СОХРАНЕНИЯ ЖИЗНЕСПОИНОК 1 ВОЗРАСТА Н.Ьоч 1 з ие относится к области сельва, а именно к ветеринарной Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к ветеринарной паразитологии, и может быть использовано для предварительного испытания эффективности биологических и химических ларвицидов, получения объекта исследования в различное время года при изучении биологии оводов, паразито-хозяинных взаимоотношений и, в частности, иммунитета у животных и человека,Цель изобретения - повышение эффективности способа.П р и м е р. Личинки 1 возраста Н.Ьоч 1 з после выхода из яиц проникают под кожу и вдоль нервных стволов мигрируют в спиномозговой канал, где находятся в эпидуральном жире; Затем они выходят под кожу и образуют свищ, переходя во возраст, Продолжительность развития личинки в организме животных 235-250 дней. Эти паразитологии, и может быть использовано для предварительного испытания эффективности биологических и химических ларвицидов, получения объектов исследования в разное время года при изучении биологии оводов, взаимоотношений хозяина и паразита, в частности иммунитета у человека и животных. Цель изобретения - повышение эффективности способа. Способ заключается в имплантировании незрелых личинок кроликам двухкраТно, причем повторную имплантацию проводят через 250 - 300 дней и имплантируют одному кролику 15 - 35 личинок. Способ позволяет сохранить живыми 78,40 личинок, имплантированных кроликам в течение 445 дней. 2 табл,биологические особенности, те. продолжительность развития личинки в организме хозяина, послужил основанием для повторной . их имплантации,Личинок собирают с. спиномозговых каналах после убоя крупного рогатого скота. Отбирают только незрелых, т.е. личинок, не ф содержащих в пищеварительном тракте О протеолитического фермента, который лег- а ко просматривается с наружной стороны личинки в аиде продолговатого темно-зеленого предмета, напоминающего форму личинки, только в 3 - 4 раза меньше ее,Возраст личинок определяли по методикам К.Я.Грунина и С,д. Орлова, которые позволяют определить с точностью 100 ф,Незрелых личинок 1 возраста Н.Ьоч 1 з извлекают из спиномозгового канала крупного рогатого скота после убоя, обмывают1738191 Таблица 1 Определение оптимального количества личинок 1 возрастаНуробегва бочз Ое беег при имплантации кроликам Обнаружено через 250 дней после импланта ии живых личинок 1 воз астаЧисло импланти рованнцх личинок одному жи- вотному Степень достоверности различийКоличество животных коэффициент вариации среднее квадратичное отклонениев среднем на одном кролиоД 2,34+ 0,73 2,1 0662,25-ф 0,7 1,94 +О;6 96,0-ф 1,090,6 +0,8689,6 +0,67 1,52 + 0,48 1,6 + 0,50 3,4 + 1,07 35 2,62 + 0.82 75,4 ф.1,11 29,57 й 9,32 33,3 + 4,37 9,85+ 3,10 раствором пенициллина и стрептомицина с температурой 32 С и рН 7,2 и имплантируют под кожу кроликам по 5-45 экземпляров.каждому. У кроликов предварительно в области грудной клетки выстригают волося ной покров Зх 5 см, дезинфицируют 700-ным спиртом-ректификатом, делаЮт разрез и ча.- стично отпрепарируют кожу, чтобы получился небольшой карман, куда помещают личинок. Затем разрез кожи заклеивают 10 бактерицидным лейкопластырем. Кроликов помещают в. клетки и содержат в виварии.Через.100-350 дней этих животных убивают, собирают личинок и имплантируют кроликам по методике, указанной выше, после 15 повторной имплантации кроликов убивают и обнаруживают личиноквозраста;Экспериментально доказано, что оптимальным числом является 15-35 импланти.руемых личинок. При имплантации 5 20 личинок, хотя выживаемость их несколько выше, требуется много кроликов, что экономически невыгодно(табл.1), Оптимальными сроками междуи И имплантацией является 200-300 дней, Сроки 100-150 дней непри емлемц, потому что они ненамного увеличи. вают продолжительность жизни личинок всравнении с известными способами (табл.2).Предлагаемый метод позволяет сохранить живыми 78,4 личинок, имплантиро ванных кроликам в течение 445 дней, Пол . кроликов практически не влияет на сохранность и жизнеспособность личинок. Возраст кроликов должен быть 6-8 месяцев.35 Третью имплантацию личиноквозраста проводить экономически и биологически нецелесообразно. Специфическими хозяевами подкожных оводов Н,Юочз является крупный рогатый скот. В организме этих животных личинки проходят цикл развития. Отмечены случаи паразитирования личинок этих насекомых и на других видах животных и даже у человека, но здесь они не достигают полного развития; Для.Н.Юочз кролики не являются специфическими. хозяевами, т.е.в естественных условиях личинки этих насекомых в их организме не паразитируют. Длительное нахождение в организме кроликов (в нашем опыте в течение 445 дней) личиноквозраста существенно не отразилось на их физиологическом состоянии (смертность, масса), Исследования, проведенные по возможности третьей имплантации личинок, показали, что это приводит к резкому снижению их массы до 29 и увеличению гибели до 450/О. Ф ар мула изобретен ия Способ сохранения жизнеспособных личиноквозраста Н.Ьочз, включающий сбор личинок и имплантацию их кроликам, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с цельс повышения эффективности способа, для им плантации используют незрелые личинки, причем производят повторную имплантацию через 250-300 дней одному кролику в количестве 15-35 личинок,1738191 Таблыца 2 Определение оптимальных сроков между 1 и П имплантациейличинок 1 вОэраста Нуро 1 еппа Ъофэ Эе Сеет кроликам троки меж" 1 и 11 Степень достоверностм различий4 Число личйнокинпланти" Количествоживотных Обнаружено. живых личинок 1 возрастаь 1гвв геСдуимплантацией личинок (вднях) Коэффициентвариации. О среднем на 1 Среднее "квадОдного кропи- ратическсе ка 3отклонение а щ рованныходному жи"вотному 2,0-0,63 . (88 о)д 14Рс 0,952, 1+0,66 (86,6-83,2) 34Р т 0952,10,66 (89,6-83,2)6,3Р 0,99 .1,б 0,50(896-48 О) 41,6Ръ 0,999. Рэ 0,999 т 100 25 88,0-о:,Ео . 1,81-о,57 5 25Еб,бф 0,83 1,8720,59 150 25 83,2+ОьЕО 1,8220,57 200 1,52 э 0,48 5 . 25 89,6+0,67 250 25 480+244 5 521,73 300 7152 25 22,421,17 Составитель О; БакулинаРедактор В. Бугренкова Техред.М.Моргентал Корректор Н.Король Заказ 1945Тираж Поднисное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101