Способ определения протеолиза в желудке жвачных животных

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 1687257 5 А 61 В 1 О/00, (3 0 ОБРЕТЕНИ И АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ венный ветеринарн. Симик Переваривание белков,и некоторых кукуруз- крупного рогатого сково и животноводство, -- 68.(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОТЕОЛИ А В ЖЕЛУДКЕ ЖВАЧНЫХ ЖИВОТНЫХИзобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в гастроэнтерологии жвачных, других растительноядных, а также всеядных животных. Целью изобретения является повышение точности определения протеолиза в желудке жвачных животных,Способ осуществляют следующим образом. Для приготовления препарата клейковины в равных количествах смешивают пшеничную муку с водопроводной водой и через 20 - 25 мин над мелким ситом отмывают тесто от крахмала. Низкомолекулярную фракцию крахмала - амилоэу - отмывают под струей воды комнатной температуры до тех пор, пока стекающая вода не станет прозрачной. Высокомолекулярную фракцию крахмала - амилопектин - отмывают в теплой (55 - 50 С) воде. В процессе отмывания ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР(57) Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в гастроэнтерологии жвачных животных. Для повышения точности способа определения протеолиза в желудке жвачных животных путем введения препарата белка через фистулу в полость желудка, его извлечения, количественного определения распавшегося в желудке белка по разнице массы до и после введения в желудок в качестве препарата белка используют сухую очищенную клейковину пшеницы с размером частиц 1,0-1,4 мм в дозе 1,0 г. Изобретение позволяет повысить точность способа определения протеолиза в желудке жвачных животных за длительный период исследования. 2 табл,иэ клейковины удаляется и часть жира. После отмывания сырую клейковину высушивают в сушильном шкафу при 105 С до постоянной массы, Высушенную клейковину измельчают в электрической мельнице и проводят калибровку ее частиц, используя сита двух размеров с диаметром ячеи 1,0 и 1,5 мм, Для навески пробы используют частички размером 1.0-1,4 мм, Очистку клейковины от остатков жира проводят по обычной методике в аппарате Сокслета и снова высушивают до постоянной массы.Сухая, очищенная от крахмала и жира клейковина содержит 98-99 протеина и 0,5 - 2,0 минеральных веществ. Аминокислотный состав и соотношение белковых компонентов (глиадин, глютенин) клейковины остаются одинаковыми при любом качестве муки, что придает применяемому препарату клейковины стандартные свойства, 1687; 575 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Из о ььпцон ой, охлажденнг 1 й в эксикагоре до комнатной температуры клейковиньл готовяпробы-ндвески и здпаивают их влаьсдьовье паке,Пакеты изготавливают иэ лавсановойгкдни с размером ячеи 100-150 мкм. Выкраивают прлмоугольньье полоски тканиГ 30 х 35 мм), Полоску ткани складывают подлине вдвое, совмещенные края спаиваютразогретым электропаяльником, оставляяоткрытым верх пакета. После ьаполненияпакета препаратом запаиваот и его верхьою сторону,Подгоговленные пакеты (мешочки) спрепаратом высушивают при 105"С до постоянной массы, величину которой регистрируют в гь(ьотоколе опытов, Каждыймевоьек нумеруот шариковой авторучкой ипомпцдот в лавсдновые контейнеры, иэготовлеьные из такои же, как и мешочки,лддсдновой ткани, Контейнерная оболочка легко пропускает жидкую фракцию содержимого, в том числе и микроорганизмы,учдствуощие в протеолиэе, но задерживат твердые частицы содержимого желудка,Подготовленные к опыту контейнеры спробами прегьарата фиксируют на прочныхкапроновых нияк и вводят через фистулы вполость камер желудка. Свободные концыьитей закрепляют на пробках фистульныхкдноль, Время введения пробы в желудокреги грируьот в протоколе опытов, Черезопределенное время контейнеры извле,д эт, отработанные пробы заменяют новь;ми и контейнеры снова вводят вжелудок,Извлеченые из желудка мешочки спробами протеина промывают проточной,затем дистиллированной водой и высушиваот при 105 С до постоянной массы.Охлажденные в зксикаторе до комнатной температуры мешочки с препаратомвзвешивают с такой же точнос ью, как и вначале опыта, Разницу между массами мешочка с препаратом до и после опыта регистрируют в протоколе опытов, Рассчитанныйпроцент переваривания протеина в желудке показывает активность протеолиза в разливьье промежутки времени,П р и м е р, Изучали динамику протеолитических процессов, протекаощих в одной из камер желудка (рубец) крупногорогатого скота 6-месячного возраста, в течение 5 суток при содержании животных насеноконцеьтрдтнол рационе с добавлением минеральных добавок.На электрической мельнице измельчалипрепарат сухой очищенной клейковиныппеницы и с помощььо сит двух размеров(диаметр ячеи (,0 и 1,5 мм) кдлибровали частиы прегьар та, Длядвески пробы использовали частицы размером 1,0-1,4 мм. (1 двески пробы массой в ,0 г запаивали в лавсанопые пакеть и помещальл в лавсдновые контейнеры (по пять гакетов в каждый), через фистулу рубца контейнерь вводили в полость желудка и фиксировали на длинных капроьовых нитях за фистульную канюло. Через определенное время контейнеры извлекали из полости желудка, пакеты с пробами препарата высушивали до постоянной массы и вэвешивдми, Г(о разнице массы ндвески до и после опыта определяли процен 1 гьсреваривания в желудке препарата белка.Результаты исследования. в укаэанном режиме осущесгвлеьиы способа представлены в соответстьуощих сроках табл. 1, 2,Реэуль 1 дтьь исследований, обработанные методом математи,еской статистики по Е,В. Уонцевичуте-Ерингене, показывают, что в серии опытов с использованием препарата с размером чдстиц 1,6-1,8 мм процент переваривания пробы бслка становится дсстогьерьым только через 96 ч его пребывания в желудке. Пробы препарата с размердми частиц (табл, 1).0,6 - 0,8 и 1,0 - 1,4 мм переваривались при высокой достовернос 1 и результатов (Рс с 0,1) уже через первые 24 ч. Вместе с тем пробы препарата с размером частиц 0,6- 0,8 мм через 72 ч и в последующее время переьдривалисьеэндчигеььно, его частицы после 48-часового переварлвдьиь уменьшдлись в рдзмсрдх, склеивались в плотнуо массу, что свщественно уменьшало площадь повсрхности пробы, ь онтактирук щей с ферментали содержимого желудка, Г(ереваривдние препарата с размером частиц 1,0 - 1,4 лм в течение опыта плавно нарастало и после 120-часового пребывания в желудке чдстицы пробы, несмотря нд значительное уленьгвение в размерах, не склеивались, а формировали рыхлую порист, ю массу, Такил образом определен оптимум размера чдстиц препарата в диапазоне 1,0-1,4 глл.Результаты испытания препарата при различной массе ндвески пробы представлены в табл, 2.Из цифровых ддьных таблицы видно, что в первые 72 ч пребывания в желудке процент переда дания препарата белка отличается высо,.ой достоверностью при любой массе навески пробы, Вследствие большой величины ошибки средней арифметической (+тп) последу ошие данные не достоверны (пьри ндвескзх просы меньшеТаблица 1 Переваривание в рубце крупного рогатого скота 1,0 г препарата сухой очищенной клейковины пшеницы,Длительнос 48 7 89712, 8,10 20, 2,90 3,5 вблиц ревэривэние с рубце крупного рогэто;о скоте преплрэтэ сукой очищенной клейковины с рэ плевом чэстиц 1,0-Ь 4 мм Длитепьнпсть прптесли в гп гп 1 рХ0,7 032,1 " ъ,т 2,ь2 П 2 ч.й 50220,5 +0,50,1 1 О.З О.З / Д,Составитель Е, Майстренко актор А. Маковская Техред Ч,Моргентал Корректор М, Демчикказ ЗобО Тираж Подписное ВИИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 1 зводственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 1,0 г). Следовательно. для гочнгчо оп рг,;спения протеолиза масса наеески пргЛы должна состаплять не менее 1,0 г.Предлагаемый способ позволяет повысить точность определе ия про 1 еолиза в желудке за счет использования препарата растительного белка, в частности:ухой очищенной клейковины пшеницы, обладающего постоянным аминокислотным составом и являющимся белковым компонентом естественного корма жвачных животных. Благодаря постоянству амннокислотного состава и соотношению белковых компонентов независимо от качества зерна препарат обладает стандартными свойства, и, и предлагаемый способ может служить физиоло 1 ическим тестом при определенииггротеолиза в желудке животных. Формула изобретения 5 Способ определения протеолиза в желудке жвачных животных, включающий введение препарата белка через фистулу в полость желудка, его извлечение, количествен вое определение распавшегося в желуд ке белка по разнице массы до и послевведения вжелудок, отл ича ю щийся тем, что, с целью повышения точности определения протеолиза, в качестве препарата белка используют сухую очищенную клейко вину пшеницы с размером частиц 1,0 - 1,4 ммв дозе 1,0 г.