Способ определения влияния пестицидов на бактерии

СОК)З СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 8164 А 9) ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛ ЬСТВУ лиян(56) Сэги Й. Методы почвенной микробиологии, М.: Колос, 1983, с. 295.Методические рекомендации по оценке токсического действия пестицидов на микроорганизмы почвы. Л.: ВНИИСХМ, 1981, (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВЛИЯНИЯ ПЕСТИЦИДОВ НА БАКТЕРИИ(57) Изобретение относится к микробиологии почв, а именно к способам определения влияния химических соединений на развиИзобретение относится к микробиологии почв, а именно к способам определения влияния химических соединений на развитие почвенных микроорганизмов, и может быть использовано для контроля за побочным действием пестицидов на почвенную микрофлору при прогнозировании и возможном предотвращении негативных последствий, вызванных попаданием препаратов в почву.Целью изобретения является ускорение и упрощение способа,Согласно предлагаемому способу последовательно вносят в питательную среду обычную почвенную суспензию и испытуемые растворы пестицидов(в воде, органических растворителях) с последующей инкубацией и нефелометрией образцов,(55 С 12 0 1/00, С 02 Г 3/34, 6 01 М 33/48 тие почвенных микроорганизмов, и может быть использовано для контроля за побочным действием пестицидов на почвенную микрофлору при прогнозировании и возможном предотвращении негативных последствий, вызванных попаданием препаратов в почву, Целью изобретения являются ускорение и упрощение способа, Для этого последовательно вносят в питательную среду обычную водную почвенную суспензию и испытуемые растворы пестицидов (в воде, органических растворителях) с последующей инкубацией и нефелометрией образцов, Предлагаемый способ позволяет определять влияние пестицидов на почвенные бактерии, не уступая известным способам в чувствительности, превосходит их по скорости и простоте исполнения.2 табл,П р и м е р 1, Определение в ия пестицидов акрекса и гетерофоса на почвенные бактерии,В пробирки, содержащие 10 мл мясопептонного бульона (МПБ), последовательно вносят по 1 мл почвенной суспензии (разведение 1;100 в стерильной водопроводной воде) и по 1 мл растворов акрекса или гетерофоса в ацетоне(конечная концентрация 0,1 мг препаратов по действующему веществу на 1 л среды - реально встречающиеся концентрации пестицидов). Ставятдва контроля: К 1 - МПБ почвенная суспензия разведения интенсивность развития бактерий вие препарата и растворителя); К 2 + почвенная суспензия + ацетон1638164 Таблица 1 % Интенсивность развития почвенных бактерий, пропускаемости питательной с едыП р и м е ч а н и е. Таг- критерий Стьюдента для акрекса и гетерофоса; Так 1,2 - критерий Стьюдента для акрекса и К 1 и К 2; Тгк 1,2 для гетерофоса и К 1 и К 2. влияние органического растворителя на интенсивность развития бактерий),Все операции производят с соблюдением условий стерильности, Сразу же послеперемешивания содержимого пробирок отбирают образцы для нефелометрии, которую проводят при 540 нм в кюветах 3 мм,Затем пробирки помещают в термостат, гдеинкубируют в течение 48 ч при 30 С (оптимальная для развития почвенных бактерий 10температура), отбирая образцы для анализов через 24 и 48 ч.Полученные данные подвергают статистической обработке и оценивают действиеиспытанных концентраций пестицидов по 15их влиянию на развитие(размножение) бактерий,Результаты исследований приведены втабл. 1,Статистически достоверное отличие 20процента пропускаемости образцов(табл. 1) по сравнению с К 1 и К 2, наблюдаемое особенно четко через 48 ч инкубации,свидетельствует о подавлении препаратом.пестицида развития почвенных бактерий, 25 П р и м е р 2, Сравнение чувствительности предлагаемого и известных способов определения влияния пестицидов на почвенные бактерии. 30Сравнения чувствительности предлагаемого и известных способов проводят в идентичных условиях с концентрациями пестицидов акрекса и ге.терофоса 0,1 мг/кг/л, Результаты во всех случаях фиксируют в од ни сроки (до 48 ч). Предлагаемый способ применяют согласно примеру 1, й известном способе используют бактериальную суспензию из культуры Вас 1 оэ щедатегащ, применение которой в качестве тест-культуры обусловлено тем, что эта почвенная бактерия является быстрорастущей на среде МПБ, Определение численности бактерий проводят на мясопептонном агаре (МПА).Результаты исследований приведены в табл. 2.Согласно результатам, приведенным в табл. 2, видно, что предлагаемый способ по чувствительности не уступает, а в ряде случаев превосходит известные, Причем, от способа-прототипа он отличается простотой исполнения, поскольку не требует выделения в чистую культуру и инкубирования тест-культуры микроорганизмов.Таким образом, предлагаемый способ позволяет определять влияние пестицидов на почвенные бактерии, не уступая известным способам в чувствительности, превосходит их по скорости и простоте исполнения,Формула изобретения Способ определения влияния пестицидов на бактерии путем выращивания бактерий на жидкой питательной среде, содержащей исследуемые пестициды, с последующим измерением интенсивности роста бактерий нефелометрическим методом, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, в качестве источника бактерий используют водную почвенную суспензию,Чувствительность предлагаемого и известных способов определения влияния пестицидов на почвенную микрофлору, пропускэемости питательной с еды С оки исследования С аз 48 ч 24 ч Акре ксГетерофосКонтроль 1 Контроль 2 АкрексГете рофосКонтроль 1Контроль 2 Ак Численность мик оо ган вв 1 г0,14 ф 0,81 ф 0,14 недостов.) не остов,4,7 10 4,3 10 5,0 10 Так = 1,5 Тгк= 1,15 ПочвГете рофосКонтроль р и м е ч а н и е. Таг - критерий Стьюдента для акрекса и гетерофоса; Так,2 - критер Стьюдента для акрекса и К 1 и К 2; Тгк 1,2 - для гетерофоса и К 1 и К 2 Составитель С,Левин Редактор Л,Веселовская Техред М.Моргентал Корректор И.ЗрдейиТираж 390 Подписноевенного комитета по изобретениям и открытиям и113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 аказ 901 ВНИИПИ Госуд ГКНТ С инат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 оизводственно-издательскии ко 88,7 . 0,46 87,0.ф. 0,22 90,0+. 0,83 Так 1 = 1,36