Способ получения личинок ii возраста нyроdеrма воvis de geer

СОКИ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИК 51)5 А 01 К 67/00 ПИСА ИЗО НИ 4 льсконарно 1" т-исследова к ветер зобретен нои . энтомолоичинок (Л),м создают ус ъев кру ган помещаю тательну е при 37 увеличит гесепг могсох чагЬ 1 е Нуро2, 52 (Яр 1 есреду выгалопа оп Ье й Ьочдз йе Сае Ье Ьоч 1 пе г Бс 1 1962 к ветеринарт быть испольотбора биоларвицидов,раста подкожлогии и физиоГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕПЬСТ(71) Всесоюзный научноский институт ветеринагии и арахнологии(56) Веез 1 у И,Б. Бопеоп гЬе Ъо 1 оя 1 ой гЬедегша - .Рагаз 1 го 1, 19пепе) 13,Веез 1 у И ОЬзегче 1 оршепг оГ Нуройегп(П 1 ргегаОезггЫае 1 пЬозг - КезеагсЬ .и Че203-208. Изобретение относитсяной паразитологии и можезовано для направленногологических и химическихполучения личинок 11 возного овода, изучения биологии этих насекомых.Цель изобретения - повьппение выхода личинок,Изобретение иллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1. Личинок собирают в январе в спинно-мозговых каналах после убоя животных. Отбирают только зре .лых, т.е, личинок, содержащих в пищеварительном тракте протеолитический фермент, который легко просматривается с наружной стороны личинки в виде продолговатого темно-зеленого пред 2(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИЧИНОК 11 ВОЗРАСТА НУРОРЕКМА ВОЧ 18 ВЕ СЕЕК(57) Изобретение относ му хозяйству, а именно паразитологии. Целью и ется повьппение выхода При культивировании Л. ловия, приближенные к ного рогатого скота. Л трехслойную плотную пи и содержат в термостат 39,5 С, Это позволяет плод личинок до 70-902 мета, напоминающего форму личинки,только в 3-4 раза меньше ее. СйПри культивировании личинкам созда-ют условия, приближенные к организму ер крупного рогатого скота, для чего их помещают в плотную многослойную пита-, тельную среду каждый слой которой отУличается от предыдущего не только количественным составом, но и плотностью. 5 то позволяет личинкам испольэовать свои биологические свойства и не только самостоятельно передвигаться к поверхности культуры,но и уходить из й, того места, где накопилось много метаболитов,потому что повьппеная концентрация метаболитов отрицательно влияет на жизнедеятельность личинок,Температура в термостате должна быть37,5"39,5 С, т.е. нормальная температура тела крупного рогатого скота,10 зрелых личинок 1 возраста извлекают из спинно-мозговых каналов у крупного рогатого скота после убоя.5 Обмывают раствором стрептомицина с температурой 30 С и рН 7,2 и помещают на дно цилиндра, высота которого 24 см, а диаметр 25 мм, Затем налива ют 20 мл (примерный объем занимаемый 10 личинками в эпидуральном жире) питательной среды с температурой 30 С и рН 7,2 - первый слой, состоящий из следующих компонентов, мас,%: агар 0,65, среда 199"85,85; инактивированиая сыворотка крови крупного рогатого скота 13,5.Цилиндр с личинками и питательной средой оставляют при комнатной темпе ратуре на 2 ч. После того, как питательная среда затвердеет, осторожнонаслаивают на ее первый слой, наливая по стенке цилиндра, второй слой 10 мл 16,5 см или примерная длина пути личинки из спинно-мозгового канала до мышц, питательной среды с температурой 30 С и рН 7,2, состоящий из следующих компонентов, мас.%: агар 1,05, среда 199-85,45; инактивированная сыворотка крови крупного рогатого скота 13,5, Цилиндр с личинками и питательной средой оставляют при комнатной температуре на 2 ч. После того, как питательная среда затвердеет, осторожно наслаивают на второй-слой, наливая по стенке цилиндра третий слой 10 мл или 1,2 см примерная длина пути личинки от мышц до поверхности кожи, питательной среды с температурой 30 С и рН 7,2, состоящей изо 40 следующих компонентов, мас.%: агар 1,65, среда 199-81,85 инактивированная сыворотка крови крупного рогатого скота 16,5, Цилиндр с личинками и питательной средой оставляют при комнатной температуре на 2 ч, После эатвердевания питательцой среды на третий слой наслаивают 2 мл вазелинового масла для предупреждения проникновения микрофлоры и высыхания50 среды и помещают в термостат при 38,5 С, Ежедневно визуально просматривают личинок, находящихся в цилиндре, и на 38 день обнаруживают, что часть личинок почти подошли к поверх ности питательной среды, Вазелиновое масло осторожно отсасывают пипеткой, поверхность питательной среды высушивают фильтровальной бумагоц и увлажняют раствором стрептомицина. Еще через два дня на поверхности питательной среды выходят 5 личинок, спустя10 дней - еще 4 личинки. Еще через10 дней вышедшие 9 личинок переходятво 11 возраст. Выплод их составляет90%,П р и м е р 2, 10 зрелых личинок1 возраста Н.Ьочз извлекают изспинномозговых каналов у крупногорогатого скота после убоя, обмываютраствором стрептомицина с температу"орой 30 С и рН 7,2 и помещают на дноцилиндра, высота которого 24 см,диаметр. 25 мм. Затем наливают 20 млпитательной среды (первый слой) стемпературой 30 С и рН 7,2, состоящий из следующих компонентов, мас.%:агар 0,5; среда 199-87,5; инактивированная сыворотка крови крупногорогатого скота 12, Цилиндр с личинками и питательной средой оставляют прикомнатной температуре на 2 ч,Послетого, как питательная среда затвердеет, осторожно наслаивают на ее первый слой, наливая по стенке цилиндравторой слой (100 мл) питательной среды с температурой 30 С и рН 7,2, состоящий из следующих компонентовмас.%: агар 0,9; среда 199-87,1; инактивированная сыворотка крови крупного рогатого скота 12. Цилиндр с личинками и питательной средой оставляют при комнатной температуре на 2 ч.После того, как питательная средазатвердеет, осторожно наслвивают навторой слой, наливая по стенке цилиндра третий слой (10 мл) питательОной среды с температурой 30 С и рН17,2, состоящий из следующих компонентов, мас.%. агар - 1,5; среда 19983,5; инактивированная сыворотка крови крупного рогатого скота 15Цилиндр с личинками и питательной средой оставляют при комнтаной температуре на 2 ч. После затвердевания питательной среды на третий слой наливают 2 мл вазелинового масла и помещают в термостат при 37,5 С. Ежедневно визуально просматривают личинок,находящихся в центре, и на 38-й деньобнаруживают, что часть личинок почтиподошли к поверхности питательнойсреды. Вазелиновое масло осторожноотсасывают пипеткой, поверхность питательной среды высушивают фильтровальной бумагой н увлажняют раство15-18 Составитель В,РомановаТехред М.Дидик Корректор В.Гирняк Редактор М.Недолуженко 1Заказ 671 Тираж 447 ПодписноеВНИИПИ Государственного комнтета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101 5. 15566 ром стрептомицина, Еще через два дня" на поверхность питательной среды выходит 3 личинки, спустя 10 дней - еще 6 личинок. Еще через 1 О дней из вышедших 9 личинок 7 переходят во5 П возраст. Выплод их составляет 707.Применение предлагаемого метода позволяет выращивать личинок в условиях, приближенных к организму животного, в плотной, питательной среде, увеличить выплод личинок Н возраста с единичных до 907. Формула изобретенияСпособ получения личинок П возраста Нуройегша Ьоча йе Свет, включающий приготовление жидкой питательной среды, внесение ее в сосуд для культивирования с последующим помещением 20 в него личинок 1 возраста и инкубированием в термостате, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью увеличе 1 О бния выхода личинок, гомешают на дно сосуда, последовательно вносят и выдерживают до затвердения питательные среды следующего состава, мас,Ж:Агар 0,5-0,8Среда 199 84,2-87,5Инактивированнаясыворотка кровикрупного рогатогоскота 12-15Агар 0,9-1,2Среда 199 83,8-87,1Инактивированнаясыворотка кровикрупного рогатого скота 12-15Агар 1,5-1,8Среда 199 80,2-83,5Инактивированнаясыворотка кровикрупного рогатого скота