Устройство для исследования аффинитета иммуноглобулинов

СОЮЗ СОВЕТСКИСОЦИАЛ ИСТИЧЕСНРЕСПУБЛИК 114 Со ОПИСАНИЕ ИЭОБРЕТЕНИ К АВТОРСКОМ ИДЕТЕЛЬСТВУ ОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТ(54) УСТРОЙСТВО ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯАФфИНИТЕТА ИИМУНОГЛОБУЛИНОВ(57) Изобретение предназначено длябиотехнологии. Цель изобретенияповышение точности измерения константы равновесия. Устройство содержит дифоузионную камеру 1 с отсекамидля клеток, прозрачную гибкую ленту2, расположенную на бабине 3, светочувствительный прибор 5, подключенный к электронному блоку 4 управления. Проточная кювета б для раствораингибитора соединена через магистраль7 с градиентным смесителем 8 и черезмагистраль 9 - с перистальтическимнасосом 10. Лента 2 выполнена с возможностью последовательного взаимодействия с кюветой 6 камерой 1 исветочувствительным прибором 5. Постоянство состава растворов в проточных кюветах 14 и 18 поддерживаетсяза счет создания потока жидкостииз емкостей 16 и 20 по магистралям15 и 19 перистальтическим насосом 10Изобретение относится к технике, предназначенной для изучения физико- Химических свойств иммуноглобулинов, и применяется в экспериментальной биологии и биотехнологии.Целью изобретения является повышение точности измерения константы равновесия,На чертеже изображено устройство, общий вид,Устройство содержит диффузионную камеру 1 с отсеками для клеток, прозрачную гибкую ленту 2, предназначеную для нанесения монослоя эритроциов и расположенную на бабине 3, существляющей ее непрерывное перемещение, и соединенная с электронным блоком 4 управления, светочувствительный прибор 5., включающий в себя 20 сточник лучистой энергии и некоторое количество светочувствительных элементов, равное количеству отсеков диффузионной камеры 1, и подключенный Х электронному блоку 4 управления, 25 проточную кювету 6 для раствора ингибитора, соединенную через магистральс градиентом смесителя 8 и черезМагистраль 9 с перистальтическим Йасосом 10, автоматический клапан 11, расположенный на магистрали 7 и соединенный через магистраль 12 с емкостьк 1 13 для физиологического ,раствора, проточную кювету 14 для раствора усиливающей антисыворотки,35 соединенную через магистраль 15 с емкостью 16 для раствора усиливающей антисыворотки и через магистраль 17 с перистальтическим насосом 10, проточную кювету 18 для раствора комплемента. соединенную через магистраль 19 с емкостью 20 для раствора комплемента и через магистраль 21 с перистальтическим насосом 10. Градиентный смеситель 8, перистальтический насос 10, автоматический клапан 1145 подключены к электронному блоку 4 управления, Гибкая лента 2 выполнена с возможностью последовательного взаимодействия с кюветой 6, диффузионной камерой 1 и светочувстьительным 50 прибором 5.Устройство работает следующим образом.Для измерения константы равновесия 5, реакции "антитело - антиген" необходимо получить известными методами гибридо-, му, специфичную к исследуемому анти- гену, и измерить константу равновесия моноклональных антител, секретируемыхполученной гибридомой, методами равновесного диализа или равновеснойфильтрацЬи. После этого на гибкую ленту 2 наносят монослой эритроцитов конъюгированных с антигеном, Закрепление монослоя проводят с использованием ра.створа полилизина для предварительной обработки поверхности ленты 2, Емкости (в том числе и градиентного смесителя) заполняют соответствующими растворами, в отсеки диффузионной камеры 1 вносят суспензии исследуемых антителообразующих клеток и клетки гибридомы. Инкубируют клетки при 37 С весь период опыта, Включают движитель ленты и прочие приборы и механизмы. Антителообразующие клетки и клетки гибридомы синтезируют и секритируют в экстрацеллюлярное пространство иммуноглубулины, специфичные к данному антигену. Они диффундируют через пористое дно камеры 1 и попадают на смоченную поверхность ленты 2, реагируют с иммобилизованными акти- генами и припоследующей обработке участка ленты аитисывороткой в проточной кювете 14 и комплементом в проточной кювете 18 обнаруживают зоны гемолиза, количественно оцениваемые посредством светочувствительного прибора 5. В дальнейшем, работа градиентного смесителя 8 и перистальтического насоса 10 приводит к возрастанию концентрации растворимого антигена в проточной кювете 6, что ведет за собой возрастание его количества на поверхности ленты 2, и, как следствие, уменьшение размеров зон гемолиза. Концентрацию ингибитора, при которой происходит двукратное уменьшение размера зоны гемолиза (ширины) безотносительно ее абсолютных размеров, регистрирует электронный блок 4 управления для каждой зоны независимо. После достижения последней зоной состояния двукратного уменьшения электронный блок 4 управления переключает автоматический клапан 11 на магистраль 12, соединенную с емкостью 13 с физиологическим раствором и тем самым исключает влияние растворимого антигена на формирование зон гемолиза, Затем операция повторяется, Постоянство состава растворов в проточных кюветах 14 и 18 поддерживается за счет создания потокаСоставитель С.КныпкинРедактор Г.Волкова Техред А.Кравчук Корректор В.Романенко Заказ 4762/41 Тираж 847 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4 3 14255504жидкости из емкостей 16 и 20 по ма- целью повышения точности измерения гистралям 15 и 19 соответственно пе- константы равновесия, устройство ристальтическим насосом 10, соединен- снабжено кюветой с раствором ингибиным с кюветами 14 и 18 магистралями тора, светочувствительным прибором, 17 и 21. электронным блоком управления и бабиной с гибкой лентой, при этом гибФормула и з обретениякая лента расположена с возможностьюУстройство для исследования аффи- последовательного взаимодействия с нитета иммуноглобулинов, содержащее 10 кюветой, диффузионной камерой и сведиффузионную камеру для клеток, о т - точувствительным прибором, который .л и ч а ю щ е е с я тем, что, с связан с электронным блоком.