Способ обнаружения эндотоксина грамотрицательных бактерий

/О 1/00 С ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ЛЬСТ АВТОРСКОМУ СВИ.Маят ГОСУДАРСТ 8 ЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОбРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ(56) Ъ 7 опя К,И., М 1.11 ег С.Е.,Рее 1 у З.С., СЬап Л.К. Регегшхпагопо епйогохсхгу хп Ьасгег 1 а 1 часс 1 йе. - Арр 1. М 1 сгоЬхо 1 ояу, 1973, 25р, 403-407.(54) СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ ЭНДОТОКСИНА ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫК БАКТЕРИЙ (57) Изобретение относится к области медицинской микробиологии и может быть использовано при диагностике эндотоксемий, оценке токсичности вак цинных и,сывороточных препаратов, а также иньекционных лекарственных форм. Цель изобретения - повышение чувствительности способа. Мышам внут рибрюшинно вводят раствор трипанового синего. Через 24 ч тем же животным внутрибрюшинно вводят раствор актиномицина Д. Контрольным живбтным вводят актиномицин Д и пирогенал, В опытной группе гибель животных отмечается в период 6-24 ч после введения пирогенала, в контрольной группе срок наблюдения составляет 72 ч.табл.40 Дозапирогеналамкг на Учет гибели животных для способа2 15 Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при диагностике эндотоксемий, оценке токсичности вакцинных и сывороточных препаратов, а также 5 инъекционных лекарственных форм, как экспресс-тест на выявление эндотоксемий,Целью изобретения является повыше ние чувствительности способа за счет внутрибрюшинного введения мышам красителя трипанового синего за сутки до введения мьппам актиномицина Д.П р и м е р 1. Готовят асептически инъекционный раствор трипанового синего на коммерческом ампуллированном стерильном и апирогенном физиологическом растворе.Мышам линии ИРК/и обоего пола весом 16-18 г внутрибрюшинно вводят раствор трипанового синего из расчета 2,0 мг красителя на мышь. Через 24 ч тем же животным внутрибрюшинно вводят раствор актиномицина Д из расчета 20 мкг на мышь и разведения пи 25 рогенала. Препарат пирогенал является эндотоксином, экстрагированным из грамотрицательных бактерий, Контрольным животным вводят актиномицин Д и пирогенал. В .опытной группе гибель животных отмечается в период 6-24 ч после введения пирогенала. В последующие сроки гибели нет, В контрольной группе срок наблюдения составляет 72 ч (известный способ). 35Гибель мышей линии ИРК/и от внутрибрюшинного введения пирогенала отражена в таблицеМышам линии ИРК/и16-18 г внутрибрюЙ раствор трипаночета 2,0 мг наем же животным ввоактнномицин Д измышь и сразу послеотки больного.ания сыворотки одт по 3 мыши. Позиазец сыворотки,и не менее двух мыПример 4.оего пола весом нно вводят водн вого синего из рамышь. Через 24 чдят внутрибрюшиннрасчета 20 мкг наэтого 1,0 мл сывоВ группу для испыного больного бертивным считают обрприводящеи к гибелшей за 24 ч.Течение н и Фического язвенной форме сопровождадотоксемией, чтождено предлагаемым еспец тяжел го колита ется выражможет быт ннои э подтве Из представленных в таблице данныхследует, что предлагаемый способ посравнению с известным по чувствительности примерно в 15-20 раз превышаетизвестный и сокращает срок исследования с 72 до 24 ч.П р и м е р 2, Мышам линии ИРК/иобоего пола весом 16-18 г внутрибрюшинно вводят раствор трипанового синего из расчета 0,5 мг красителя намышь. Через сутки тем же животнымвнутрибрюшинно вводят раствор актино-,мицина Д из расчета 20 мкг на мышьи аналогичные примеру 1 разведенияпирогенала, В опытной группе гибельживотных фиксируют в период 24 ч смомента введения пирогенала, гибельконтрольных животних, получивших актиномицин Д и пирогенал, учитываютна протяжении 72 ч.П р и м е р 3, Мышам линии ИРК/иобоего пола весом 16-18 г внутрибрюшинно вводят раетвор трипанового сине.го из расчета 5,0 мг красителя намышьь, Через 24 ч тем же животным внутрибрюшинно вводят раствор актиномицина Д из расчета 20 мкг на мышь и аналогичные примеру 1 разведения пирогенала. В опытной группе гибель животных Фиксируют в период 24 ч с момента введения пирогенала, гибельконтрольных животных, получившихактиномицин Д и пирогенал, учитываютна протяжении 72 ч.Доза красителя 5,0 мг на мышь всочетании с актнномицином Д повышаетчувствительность животных к эндотоксину, однако эта доза трипанового си-него сама вызывает гибель примерно5 Е обработанных животных, т,е, является максимально допустимой,1284997 способом обнаружения эндотоксина.Синдром раздраженной толстой кишкиэндотоксемией не сопровождается. Способ обнаружения эндотоксина грамотрицательных бактерий путем введения исследуемого материала мышам,Составитель М.Серова Редактор Н.Гунько Техред М.Ходаиич Корректор А.ЗимокосовЗаказ 7600/27 Тираж 500 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, -Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г.ужгород, ул.Проектная, 4 предварительно сенсибилизированнымактиномицином Д, с последующим учетом времени гибели животных, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью Ф о р м у л а и э о б р е т е н и я 5 повышения чувствительности способа,мышам внутрибрюшинно вводят трипано"вый синий в количестве 0,5-5,0 мг намьпць за сутки до введения актиномицина Д.10