Способ изготовления иммуноэлектродов

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ в ячейку, соде хлорсеребряный тиковый электр , ную смесь: вод тель, коллаген щую стандартныи вспомогательный ды вносят электролит-,о-этанольный растворинавая суспензия, глута(54) СПОС ЭЛЕКТРОДО (57) Изоб логии, мо в изготов тов, Дель процесса Б ИЗГОТОВЛЕ етение относится к и ет быть применено та уне ении лекарствизобретения -зготовления. ных препаракорение тог ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ(7 1) Самаркандский ордена Дружбродов медицинский институтим. И.П.Павлова(5 б) Яашашого Б., ТзцЬопыга Н,Баъа 1 М, Ргос. 3 арап Асад,ч, 57, зог В, И 4, 1981,р. 123-128. ровыи альдегид, соляная кислота, антиген или антительная сыворотка, вода. Раствор перемешивают, проводяткатодное электроосаждение антигеноили антительно-коллагеновой пленкина поверхности хлорсеребряного электрода. Полученный иммуноэлектрод промывают дистриллированной водой и помещают в 0,05 М боратно-фосфатныйбуфер, содержащий бычий сывороточныйальбумин для блокировки активныхцентров глутарового альдегида. Электроосаждение коллагеновой пленки наповерхности хлорсеребряного электрода ведут при плотности тока 1 О 12 мА/см в течение 40-45 с, 1 12Изобретение относится к иммунологии и может найти применение в медицине и промышленности лекарственных препаратов.Целью изобретения является ускорение процесса изготовления.Способ осуществляют в следующей последовательности.В ячейку, содержащую стандартный хлорсеребряный и вспомогательный платиновый электроды, вносят электролитную смесь следующего состава: водноэтанольный растворитель, коллагеновая суспензия, глутаровый альдегид, соляная кислота, антиген или анти- тельную сыворотку. Раствор перемешивают и проводят катодное электроосаждение антигено- или антительно-коллагеновой пленки на поверхности хлор- серебряного электрода. Полученный иммуноэлектрод промывают дистиллированной водой и помещают в 0,05 М боратно-фосфатный буфер, содержащий тритон Хи бычий сывороточный апьбумин (БСА) для блокировки активных центров глутарового альдегида.Иммобилизация антигенов или антител из электролитной смеси методом электроосаждения существенно сокращает время изготовления иммуноэлектрода, Формирование антигено- или антительно-коллагеновой пленки на токо- проводящей поверхности иммунозлектрода осуществляется за 40-45 с при плотности тока 10-12 мА/см .Наличие коллагеновой пленки затрудняет диффузию различных примесей, окислителей и восстановителей непосредственно к токопроводящей поверхности и исключает их влияние на потенциал иммуноэлектрода. К тому же потенциал иммуноэлектрода из хлорсеребряной основы является высоковоспроизводимым. Результатом этого является увеличение селективности измерений антигенов и антител иммуноэлектродом.Электролитная смесь следующего состава, мас.7.: этанол 24,6740 - 24,8124; коллаген 0,0500-0, 1000 глутаровый альдегид 0,7000-1,2000; соляная кислота 0,0004-0,0040," антиген или антисыворотка О, 1100-0,1300, вода остальное, обеспечивает получение плотных и равномерных по толщине коллагеновых пленок на токопроводящей поверхности электрода, предотвращает осаждение коллагена в объеме73805 2раствора, что позволяет иммобилизовывать в коллагеновой пленке антигены и антитела в количестве, на порядок превышающем известный способ.П р и м е р 1. Для изготовления иммуноэлектрода с иммобилизованной-аспарагиназой в качестве токопроводящей поверхности используют стандартный хлорсеребряный электрод (ф =0,3 мм, 8=10 мм), являющийся контактн,ям полуэлементом ионселективных электродов. В ячейку, содержащую хлорсеребряный и вспомогательный платиновый электроды, вносят 0,6 мп электролитной смеси следующего состава, мас,Е: этанол 24,8124, коллаген 0,0500; глутаровый альдегид 0,7000, соляная кислота 0,0004 и Ь-аспарагиназа из бактерий Е. со 1:ь 0,1100; вода остальное. Раствор псремешивают и проводят электроосаждение аспарагиназно-коллагеновой пленки на поверхности хлорсеребряного электрода при плотности тока 10- 12 мА/см в течение 40-45 с. Полученный иммуноэлектрод промывают дистиллированной водой и помещают на 14 мин в 0,05 М боратно-фосфатный буфер рН 8,7, содержащий о, 17 раствора три- тона Х - 100 и 0,6 Х БСА для блокировки активных центров глутарового альдегида. 35 40 45 50 55 5 10 15 20 25 30 П р и м е р 2. Для изготовления иммуноэлектрода с иммобилизованными антителами к-аспарагиназе в качест" ве токопроводящей поверхности ис-пользуют стандартный хлорсеребряный электрод ( =0,3 мм, 8=10 мм 2). В ячейку, содержащую хлорсеребряный и вспомогательный платиновый электроды, вносят О,б мл электролитной смеси следующего состава, мас. : этанол 24,64; коллаген О, 100; глута 3ровый альдегид 1,200; соляная кислота 0,004 и обессоленная кроличья сыворотка против-аспарагиназы О, 13; вода остальное. Раствор перемешивают и проводят электроосаждение анти- тельно-коллагеновой пленки на поверхности хлорсеребряного электрода при плотности тока 10 - 12 мА/см в течение 40-45 с, Полученный иммуноэлектрод промывают дистиллированной водой и помещают на 14 мин в 0,05 М боратно-фосфатный буфер рН 8,7, содержащий О, 1 Е раствора тритона Хи О,бй БСА для блокировки активныхцентров глутароного альдегида.12738 Формула изобретения Составитель В.НазароваРедактор Н.Швыдкая . Техред-Л.Сердюкова Корректор И.Муска Заказ 6470/41 Тираж 778 Подписное ВНИИПИ Государственного .комитета СССР по делам изобретений и открытий И 3035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г.Ужгород, ул.Проектная, 4 С помощью изготовленных данным способом иммуноэлектродов и электродов сравнения проводят анализ содержания антигенов или антител в анализируемых жидкостях. 5 Способ изготовления иммуноэлектродов, состоящий в иммобилизации анти О генов или антител на токопроводящей поверхности, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения процесса изготовления, иммобилизацию проводят 3 05электроосаждением в электролите состава, мас. ;Зтанол 24,6740-24,8124 Коллаген 0,050-0, 100 Глутаровый альдегид О, 700-1, 200 Соляная кислота 0,0004-0,0040 Антиген или антисыворотка О, 1100-0, 1300 Вода Остальное при плотности тока 10-12 мА/см в течение 40-45 с на токопроводящую поверхность, имеющую хлорсеребряную основу.