Способ разделения микрочастиц

СОЮЗ СОВЕТСКИХ ОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ СПУБЛИК 4 27/26 ТЕЛЬСТ Д ВТОРСНОМУ С соб ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ССПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТ ОПИСАНИЕ ИЗО(71) Ордена Ленина институт химической физики АН СССР(56) Доклады АН СССР, т,214, 1974, с.955-958.Авторское свидетельство СССР Р 442801, кл, А 61 К 27/10, 1972, (54) СПОСОБ РАЗДЕЛЕНИЯ МИКРОЧАСТИЦ (57) Изобретение относится к технике :препаративного и аналитического разделения микрочастиц, отличающихся по электрофоретической подвижности. Спо 233027 А ТЕНИЯ /ж. основан на проведении электро" фореза в градиенте рН в иэофокусировочной колонке. С целью повышения производительности способа электрофорез проводят в ламинарном потоке буферного раствора, направленного вдоль колонки при градиенте рН, направленном перпендикулярно широкой стенке колонки, причем напряженность электрического поля направлена параллельно градиенту рН, а отбор фракций осуществляют по времени выхода их чз колонки. Это дает воэможность фокусировать частицы в узких зонах ламинарного потока с малым разброоом скоростей, что позволяет повысить производительность способа, 1 ил.Изобретение относится к способам разделения веществ, а именно к электрофорезу в рН-градиентах, и может быть использовано в биологии и медицине.Целью изобретения является повышение производительноСти способа.На чертеже показана схемаосуществляющая предлагаемый способ,Емкость 1 заполняют, например, борат-полиольной средой; Посредством микронасоса с регулятором 2 скорости устанавливают ламинарный поток борат-полиольного буфера в колонке 3 для иэофокусирования. Причем градиент рН в колонке 3 распределяют поперек колонки 3, Поперек колонки 3 пропускают электрофоретический поток посредством электродов 4. Разделяемую смесь вводят периодически порциями посредством узла 5 ввода пробы и прогоняют в ламинарном потоке через колонку 3. В зависимости от заряда каждого компонента. разделяемой смесии его рЕ ламинарный поток доста 1вит их к выходу из колонки 3 за различные времена . , На выходе из колонки 3 Фиксируют разделенные компоненты детектором 6, например спектро- фотометром, и определяют в пробоотборники 7. П р и м е р. Проводят иэофокусирование в ламинарном потоке в боратполиольном градиенте с рН 4,4-80, которым заполняют емкость 1, Затем с помощью микронасоса с регулятором 2 скороСти устанавливают ламинарный поток в изофоретической колонке 3 с максимальной скоростью 1 мм/с. 1 о того, как приступить к разделению, в колонке 3 должно установиться равновесие градиента рН поперек колонки, При длине колонки 3 равной 1 м и поперечном сечении 1 см (5 см х 0,2 см,1 это происходит за 40 с. 5 1 в 15 20 25 Причем градиент рН распределяютперпендикулярно ребрам, равным 0,2 сми в том же направлении пропускаютэлектрофоретический ток, прикладываяразность потенциалов к этим ребрамколонки порядка 20-40 В, при этомЕ=100-200 В/см соответственно, В качестве разделяемой смеси используют1,0 л буферного раствора, содержащего смесь альбумина (р 1 - 5) и гемоглобина (рЕ - 7,5) в концентрации0,1 ; Ее вводят порциями посредствомузла 5 ввода пробы и прогоняют черезколонку со скоростью потока до1 мм/с, Разделение первой пробы происходит через 15 мин, что Фиксируютна спектроАотометре 6. Разделенныекомпоненты отбирают в пробирки пробоотборника 7, Дпя разделения 1 лсмеси пробу вводят порциями 40 раэ,что занимает в общей сложности 6-7 ч,Почти весь альбумин (960 мг) и весьгемоглобин (980 мг) отбирают в пробирки в пять раз быстрее, чем по известному способу.Предлагаемый способ позволяет значительно повысить производительностьпроцесса разделения,формула изобретения Способ разделения микрочастиц путем изоэлектрического фокусирования, включающий электрофорез частиц в градиенте рН в изофокусировочной колонке, отличающийся тем, что, с целью увеличения производительности разделения, электрофорез проводят в ламинарном потоке буферного раствора, направленного вдоль колонки при граградиенте рН, направленном перпендикулярно широкой стенке колонки, причем электрическое поле направлено параллельно градиенту рН, а отбор фракций осуществляют по времени выхода их из колонки.1233027 Составитель И.Рогальор В.Иванова ТехредЛ.Сердюкова Корректор М.Самборская едак одписноеСССР по делам 13035, Москтии наб., д. Производственно-полиграфическое предприятие,г.ужгород,ул.ПроектнаяЗаказ 2761/44 ВНИИПИ Государ Тираж 778твенного комите бретений и открЖ, Раушская