Способ получения эмбрионов у крупного рогатого скота для трансплантации

09) (И) СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИК 7 0 02,; 50 А 0 ДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИИ ГОС ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ 1К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Бюл. В 13 ев, Ю;Д.Клинский, .В.Овчинников й ордена Трудового ни научно-исследов тут животноводства .636.22.28 088.8)ацы ВАСХНИЛ, 1979, 1 с В вот 2-й ной,оты. г(7 Ц ВсесоюзныКрасного Знаметельский инсти ( 53) 612.621. 9 56) 1. Докл 54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭМБРИО У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ДЛЯ ТР ПЛАНТАЦИЙ, включающйй введение ж ным-донорам гонадотропина на 10- день полового цикла с последующи через двое суток введением прост дина, трехкратным осеменением с интервалом 12 ч замороженным семенем и извлечением эмбрионов на 7-8-е сутки после первого осеменения, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения выхода эмбрионов, животным-донорам в начале проявления охоты. внутримышечно:инъецируют витамины А и Е"в дозах 120-150 тыс. ИЕ и 80-100 мг соответственно, при этом одновременно вводят с кормом однократно в сутки в течение 18-25 .дней йодистый калий в дозе 100- 200 мг/гол, а с .введением гонадотропина дополнительно инъецируют витами- ны А и Е в половинной дозе от первоначатель вводимой в период прояв-Я ления охИзобретение относится к области животноводства, в частности, к способам получения эмбрионов у крупного рогатого скота для трансплантации.Известен способ получения эмбрионов у крупного рогатого скота для. 5 трансплантации, включающий введение животным-донорам ганадотропина на 10-12 день полового цикла с последующим через двое суток введением простагландина, трехкратным осеменением 10 с интервалом 12 ч замороженным семенем и извлечением эмбрионов на 7- .8 сутки после первого осеменения 1 1.Недостатком данного способа явля.ется то, что при тщательном отборе животных-доноров удается получить множественную овуляцию (суперовуляцию). только у 50-70 коров и телок. Кроме того, способ не обеспечивает достаточного выхода нормальных (не.дегенерированных / эмбрионов, пригодных для трансплантации (около 2 эмбрионов на 1 донора) .Целью изобретения является повышение выхода нормальных эмбрионов, пригодных для трансплантации, 25Указанная цель достигается тем, что животным-донорам в начале проявления охоты, внутримышечно инъецируют витамины А и Е в дозах 120- 150 тыс, ИЕ и 80-100 мг соответствен но, при этом одновременно вводят с кормом однократно в сутки в течение 18-25 дней йодистый калий в дозе 100-200 мг/гол, а с введением гонадотропина животным дополнительно З 5 инъецируют витамины А и Е в половинной дозе от первоначальной, вводимой в период проявления охоты у животных.П р и м е р. Животным-донорам сразу же после выявления половой охоты .40 вводят внутримышечно 120-150 тыс. ИЕ витамина А, 80-100 мг витамина Е на одно животное и ежедневно в течение 18-25 дней скармливают йодистый калий в дозе 100-200 мг/гол. В качестве растворителя витаминов исполь зуют растительное масло, йодистого ка лия - воду. Через 10-12 дней, в середине полового цикла животным-донорам вводят сывороточный гонадотропин СЖК 1 в дозе 2800 ИЕ и одновременно дополни, 5 О тельно инъецируют витамины А и Е в дозах 60-75 тыс. ИЕ и 40-50 мг на голову, соответственно. Через 48 ч после введения СЖК животным вводят простагландин в дозе 30 мг/гол. Подготовленнйх 55 доноров осеменяют трехкратно с интер- валом 12 ч спермой, содержащей до 100 мпн, живчиков в каждой дозе. Н а 7-8 день после первого осеменения осуществляют извлечение эмбрионов хирургическим, либо нехирургическим путем, На промывание каждого рога используют от 500 до 700 мл среды. Промывную жидкость собирают в мерные цилиндры емкостью 500 мл. После., окончания промывания рогов матки промывную жидкость в течение 30 мин отстаивают,надосадочную жидкость удаляют, а осадок (80-100 мл) исследуют под микроскопом на предмет обнаружения зародышей.Были испытаны различные схемы обработки животных-доноров.Контрольным животным-донорам на 10-12 день полового цикла вводили гонадотропин (СЖК), через 48 ч после инъекции СЖК животным вводили простагландин. После введения простагландина, через двое суток после прихода животных в охоту их осеменяли и на 7-8 день после первого осеменения у них извлекали эмбрионы.Животным-донорам второй опытной группы дополнительно однократно инъекцировали витамины А в дозе 60 тыс. ИЕ и Е-в дозе 40 мг, а йодистый калий задавали с кормом в течение 20-25 дней в дозе 50 мг/гол. Животным-донорам третьейопытной группы дополнительно однократно инъецировали витамины А и Е в дозе. соответственно 100 тыс. ИЕ и 80 мг, йодистый калий задавали с кормом в течение 20-25 дней в дозе 100 мг/гол. Животным-донорам четвертой опытной группы дополнительно двухкратно инъецировали витамины А и Е: первый раз в день выявления охоты в дозе 120 тыс. ИЕ и 80 мг соответственно и второй раз в день обработки гонадотропиномСЖК) в Дозах 60 тыс. ИЕ и 40 мг соответственно, йодистый калий задавали с кормом в течение 20-25 дней в дозе 150 мг/гол. Животным-донорам пятой опытной группы дополнительно двух. кратно инъецировали витамины А и Е соответственно, в дозЕ 150 тыс. ИЕ и 100 мг, и 75 тыс. ИЕ и 50 мгу йодистый калий - 200 мг в течение ,20-25 дней, Животным-донорам шестой опытной группы дополнительно 1 двухкратно инъецировали витамины А ,и Е соответственно, 135 тыс. ИЕ и90 мг70 Фыс. ИЕ и 45 мг, йодистый калий - 100 мг на животное в сутки.,Результаты испытания приведены.в таблице.1009366 олучено яйцеклеток и эмбрионов (среднее на 1 донорау Среднеколичествоовуляций надонора Числоживотных Группы мбрионов яйцекле ток мальых плодотворенныяйцеклеток дегенериро ванных,3 ИО,Экспериментальное испытания инъек-, ций различных доэ витаминов А и Е 4 в сочетании с подкормкой йодистым препаратом показало, что использование однократной инъекции в период проявления охоты витаминов .А и Е ( 60-100 тыс. ИЕ и 40-80 мг) и ежедневно 50-100 мг йодистого калия в 5 течение 20-25 дней почти не влияло на уровень суперовуляции и качество эмбрионов. Имекщиеся различия стати . чески не достоверны (.РТ 0,53. г5увеличение дозы витамина А до: 150-75 тыс. ИЕ, витамина Е - до 100- 50 мг и при двухкратном введении в период проявления охоты и в период обработки гонадотропином через.,-10- 12,дней) и йодистого калия по 200 мг незначительно повышало уровень суперовуляции и качество эмбрионов по сравнению с контрольной груп-; пой.6 Й. Витамин Атыс.ИЕ; Емг;йодистый калий - 100 мг 1 ъ. Витамин Аи 60 тыс. ИЕ;Еи 40 мг; йодистый ка- лий - 200 мг 6,160,4 0,60 21 0 610 43 Найлучшие результаты были получены при двухкратном:введении витамина А в дозе 120-135 тыс ИЕ пер-. вая инъекциями и 60-70 тыс. ИЕ (вто- ,рая инъекция и витамина Е, соответственно, 80-100 мг и 40-50 мг при :ежедневном скармпивании с кормом в течение 20-25 дней 100-200 мг.йодистого калия. Разница в пользу опытных четвертой и шестой групп по сравне-. нию с контролем составила по уровню суперовуляции на 29,7 и 41, 7, числу извлеченнх.яйцеклеток и эмбрионов - на 33,1 и 50,8%. Ко)тнчество нормаль-. ных эмбрионовпригодных для трансплантации, повысилось в 2 и 2,2 раза. Заметно снизилось число дегенерированных эмбрионов и неоплодотворенных яйцеклеток.Использование предложенного способа позволит повысить выход нормальных эмбрионов, пригодных для пересадки или закладки их в эмбриобанк