Способ консервирования костногомозга

Сфез Сааетскнх Социалистических Ресвублнк(51)М. Кл,з А 01 й 1/02 Государстаеииыа комитет СССР по хелам изобретеиий н открытий(72) Авторы изобретения А. А. Цуцаева, Н, Н. Попов, О.,А. Дроздова, В. И. Гарбуз,А. Н. Гольцев Т. Н. Воскобойникова, А. И .Б 41 анжниковц чл и В. В, Щербина Институт проблем криобиологии и криоме АН Украинской ССР(54) СПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ КОСТНОГО МОЗГАИзобретение относится к криомедицине и может найти применение в клиниках и станциях переливания крови.Известен способ консервирования ко 5 стного мозга при низких температурах с последукицим размораживанием его подогреванием до температуры 41-42 оС 1.Однако известный способ не обеспе чивает высокого количества жизнеспособных деконсервированных клеток костного мозга.Цель изобретения - повиаение количества жизнеспособных деконсервированных клеток костного мозга.Поставленная цель достигается тем, что способ консервирования костного мозга осуществляют при низких температурах с последующим раэмораживанием его подогреванием до темпера О туры 41 - 42 оС, суспензию клеток после размораживания смешивают с раствором, содержащим 30-35 нативной аутологичной сыворотки с вязкостью 1,12- 1,19 сСт и пропускают последовательно через фильтры с .диаметром 30-40 и 10-12 мк, под давлением 0,3-0,4 атм.П р и м е р. Клетки костного мозга мапей (5 х 106- 1 х 10) смешивают со стабилизирующей средой, состоящей из раствора ЦОЛИПК-З,содержащего,г/л: цитраткислый 6,2; глюкозу 4,0; сульфатиоэол 2,0 или левомицетин 0,06 и полиэтиленоксида, мол. в. 400(ПЭО) с таким расчетом, чтобы его конечная концентрация составляла 15. Подготовленную смесь заливают в контейнеры и эамораживают на криогенной установке при температуре от 20 до 15 оС со скоростью 4 С в минуту, а начиная от минус 15 С скорость замораживания увеличивают от 100 С, охо лаждая клетки до минус 196 оС.Оттаивают на водяной бане при температуре +41 С. Размороженные клетки костного мозга смешивают в соотношении 1:1 с раствором ЦОЛИПК-З, содержащем 30 нативной аутологичиой сыворотки, и пропускают последовательно через фильтры с диаметром пор 40 и 12 мк под давлением 0,3 атм.Оценку качества деконсервированных клеток костного мозга проводят по количеству жизнеспособных клеток в образцах, морфологической сохранности клеток, клеточному составу, колониеобразующей активности. Установлено, что число жизнеспособных клеток после фильтрации через фильтры составляет 97, удаляются стромальные элементы805968 формула изобретения Составитель С. МалютинаРедактор А. Шишкина Техред Е. Гаврилешко Корректор М. Коста Заказ 85/1Тираж 711 Подписное ВНИИПИ Государственного ковктета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва., Ж, Раушская наб., д, 4/5филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 и разрушенные клетки, конгломераты клетокпроисходит относительное увеличение количества клеток малых размеров (от 6 до 10 мк) и снижение числа клеток больших размеров (от 11 до 20 мк).Предлагаемый способ позволяет по- высить количество жизнеспособных деконсервированных клеток костного мозга. Способ консервирования костного мозга при низких температурах с последукщим раэмораживанием его подогреванием до температуры 41 - 42 С,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,с целью повышения количества жизнеспособных деконсервированных клеток костного мозга, суспенэию клеток5после размораживания смешивают с раствором, содержащим 30-35 нативнойаутологичной сыворотки с вязкостью1,12-1,19 сСт и пропускают последо"вательно через фильтры с диаметром30-40 и 10-12 мк, под давлением 0,310 0,4 атм.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Авторское свидетельство СССРР 395054, кл. А 01 й 1/02, 1971.