Способ культивирования коклюшных бактерий

(23) Приприте до делам нэобретеннй н открцтнй) Заивитель вакшп и сывороток им. И, И. Мечникова СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КОКЛЮШН БАКТЕРИЙй средой.аэы заересевают данного иэобромассы иатов.ается тбактерийерильного етения - увеличповьпцение ка ние выхода бичества препарЦель достигащиванияением ст м, что процесс осуществляют ивоздуха на повыр ,д авл Изобретение относится к областимикробиологии, а именно к способамкультивирования коклюшных бактерий.Известен способ культивирования коклюшных бактерий, который состоит иззаливки питательной среды в ферментер,засева инокулюма и культивированияв ферментере 3 (,Недостач ком этого способа являетсяобразование пены на поверхности культуры, что приводит к потере биомассы.Применение же химического пеногасителя исключено, так как он загрязняеткультуру и готовый микробиологическийпрепарат, чего нельзя допустить, поскольку коклюшная вакцина предназначенадчя введения в организм ребенка. верхность культуральной жидкости, равным от 6.86 10 до 9,8.10 Па.Предлагаемый способ культивированиякоклюшных бактерий осуществляют периодически в жидкой питательной среде.Для этого сначала готовят посевной материал, который получают путем засевавысушенной культуры во вращающиесяпробирки с жидкой питательноПосле достижения культурой фмедления скорости роста ее ив колбы со средой того же состава. Врезультате культура проходит цикл развития, состоящий из нескольких фаз;лаг фазы, фазы нарастания скорости ростапопуляции и фазы экспоненциального роста. Когда культура в своем развитии достигает экспоненциального роста, ее пересевают в ферментер. В процессе развития культуры в ферментере определяют биологические и физико-химические параметры.Каждая стадия развития культурыхарактеризуется своими возрастными7453Выращивание культуры в колбе осу-ществляют в термальном шкафу прио36,6-36,8 С на аппарате для встряхивания жидкости со скоростью 100140 кач/мин. в течение 18-24 ч.Полученную таким образом культуру(инокулюм) засевают в ферментер с рабощм объемом 1 литр из расчета4 млрд/мл питательной среды.10 Культивирование в ферментере продолжают. 18 ч при температуре 36,636,8 С и число оборотов мешалки 250 о350 об/мин. при поддержании растю .ренного кислорода в среде 4 О;60% отполного насыщения Пеногашение осуществляют стеоильным воздухом, подаваемым над культураль О ной жидкостью со скоростью подачи от0 до 8 л/ мин. таким образом, чтобыпена не образовывалась. При этом избыточное давление воздуха над культуральной жидкостью поддерживается в зависимости от степени ценообразованияв интервале от 6,8610 до 9,8 10 Па.Способ ащнбирован в МНИИВСим, И. И. Мечникова,Результаты 18 часового культивирозо вания ВогбеМИс 1 ре 1 оьчв предлагаемым способом и без непогашенияданы в таблице. Предлагаемый 284384 з леногашени Из таблицы видно, подача стерильного воздуха увеличивает выход биомассы ф в 8 раз по сравнению с культивированием без пенотфашения.формула изобретенияСпособ культивирования кохлюшных бактерий, вхлючающий засев инокулюма в питательную среду в ферментер и выращивание при температуре 36,6-36,8 С, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения процесса, повышения выхода биомассы й ее биологической НИИПИ Заказ 2603/8 Ужгород,ППП" фПатентф,Проектная, 4 3 73 морфологическими и физиологическими особенностями, которые контролируются в процессе роста популяций с помопью соответствующих датчиков, показания которых выведены на регистрирующие приборы. В ферментер подают стерильный воздух для создания над слоем культуральной жидкости давления, равного 6,8610 - 9,810Па, что предотвраЪ 5,щает образование пены й повышает эффективность аэрировання культуральной жидкости. В результате этого процесс культивирования ускоряется, повышается выход биомассы и ее биологическая активностьП р и м е р, Штамм Эогде 1 еЫа рег,Ьзче305 хранят в ампулах в высушенном состоянии в условиях холодильника.Две ампулы указанного штамма за,севают в пробирку с 20 мл питательной среды Коэна и Виллера и модификации Московского научно-исследовательского института. вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова,Культуру в пробирке выращивают. в термостате при температуре 36,6-36,8 С во вращающемся барабане со скоростью вращения 9 об/мин. в течение 48 ч.Выращенную культуру засевают в колбу с питательной средой того же состава объемом 100 мл. активности, процесс выращивания бактерий осуществляют под давлением стерильного воздуха на поверхносч хультуральнойжидкости, равным 6,8610-9,8- 10 Па,Э"Источники информации,принятые во внимание при экспертизе,1. Шмеле;.а Е. И., фаньковская Э, К.Биологическая активность культурыВ.рЕгСовМь, выращенных в жидкойсреде. Материалы конференций Московского НИИВС им. И. И, Мечникова. М.,1969, с. 98.Тираж 522 Подписное