Способ выявления хроматина
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
но делан изобретений и аткрытнй(72) Авторы изобретения Второй Московский ордена Ленина государственный медицинский институт им. Н. И. Пирогова(54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ ХРОМАТИНА Изобретение относится к области цитологии и биохимии и может быть использовано в клинической практике при медико- генетическом консультировании, при диагностике новообразований.Известей способ выявления хроматина при использовании цитологических и био.химических препаратов, включающий фиксацию препаратов, их обработку защитным веществом, гидролиз и окраску красителем 1Однако известный способ вызывает потери и нарушение структуры хроматина и не обеспечивает высокого качества препаратов.11Целью изобретения является повышение качества препаратов за счет предотвращения потери хроматина и сохранение его структуры,Эта цель достигается тем, что в качестве защитного вещества используют раствор .хромовых квасцов, причем обработку проводят в течение 2-8 ч при рН,65-1 75. 2Способ осуществляют следующим образом.Для исследования ДНК ядерных эритроцитов голубя используют стандартную методику получения мазка цельной периферической крови. Полученный. препарат .подсушивают под вентилятором, фиксируют в абсолютном метаноле в течение 1 ч и обрабатывают в растворе хромовых квасцов. Раствор хромовых квасцов готовят следующим образом: 5%-ный раствор хро мовых квасцов кипятят в течение 4-10 мин и медленно охлаждают до комнатной температуры, затем доводят рН раствора до 1,65 с ломошью соляной кислоты (НС ) и едкого натра ( г(аОН). Обработку сухих препаратов проводят в избытке хромовых квасцов в течение 2 ч. После этого препараты промывают в проточной воде, высушивают и проводят кислотный гидролиз в 5 н, при 20 С,Полученные препараты исследуют с помощью автоматизированной прецезионной733660 т.0)1 1,656,8то,665 Без предобработкиПолиэтил енгликоп ем5%-ньтм раствороммовых квасцов 25 2О+2300+103 70+10320+10 отку про 65-1, 7О 7 очники информации внттмание ити260+10 5 аствор тые орид хрома 5 280+735270+7 4 РегКМдгОО 518 тб аб Филиал Г "Патент,, Ужтохит,ул. поектттая,зсканирующей микрофотометрической системы "микроскоп-цитофотометр 05.Результаты эксперимента представлены на чертеже в виде кривых ультрафиолетоной абсорбцтти ИНК клеточньгк ядер в процессе кислотного гидролиза, где 1 - кривая гидролиза без предобработки; 2- кривая гидролиза с предобработкой полиэтиленгликолем; 3- кривая гидролиза с предобработкой хромовыми квасцами (Р- то величина абсорбции, 1 -время). Длительность плато кривых гидролиэа .характеризует устойчивость ДНК к фрагментации.Аналогичные эксперименты были проведены при РН раствора хромовых квасцов 1,6 и 1,75, а также при использовании при тех же рН другой соли хрома, хлорида .хрома (СОСУ).Результаты экспериментов сведены в таблицу в виде длительностей плато кртт вых гидролиза, полученных в экспери- . ментах 4Преттлагттемьтй способ уттлинттет плато кривой гидроли;та ио крайней мер в 15 раз, что свидетельствует о значительном увеличении резистентности хроматина. Аналогичные результаты получены на ядрах гепатоцитов крысы и голубя, а также на лейкоцитах голубя и человека.Предлагаемый способ сохраняет структуру .хроматина в широком интервале времени гидролиза, позволяет повысить качество препарата и может бьггь использован в практической медицине, обеспечивая .хорошую восттроиэводимость результатов цитодиагностического анализа,формула изобр ет ени я Способ выявления хроматина при исследованиях цитологических и биохимических препаратов, вкттючаюший фиксацию препаратов, их обработку защитным веществом, гидролиз и окраску красителем, о т л и ч а ю ш и й с я тем, что, с целью повышения качества препаратов за счет предотвращения потери хроматина и сохранения его структуры, в качестве защитного вещества используют раствор хромовых квасцов, причем обрабводят в течение 2-8 ч при рН 1,ИМЛООК Р.ТТ " РЕО 6 уЕтт асМт.птд,Ю 6,00. ШИИПИ Заказ 1938/7Тираж 673 Полттисное
СмотретьЗаявка
2565632, 06.01.1978
ВТОРОЙ МОСКОВСКИЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ ИМ. Н. И. ПИРОГОВА
НЕМИРОВСКИЙ ЛАЗАРЬ ЕФИМОВИЧ, КОГАН ЭММАНУИЛ МАРКОВИЧ, ВАХТЕЛЬ НИКОЛАЙ МАРКОВИЧ, ГАРТШТЕЙН ВЛАДИМИР ПЕТРОВИЧ, СУВОРОВА ИРИНА ГЕОРГИЕВНА, ЖУКОЦКИЙ АЛЕКСАНДР ВАСИЛЬЕВИЧ
МПК / Метки
МПК: A61B 10/00, G01N 33/48
Опубликовано: 15.05.1980
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-733660-sposob-vyyavleniya-khromatina.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ выявления хроматина</a>
Предыдущий патент: Способ определения границы замораживания ткани
Следующий патент: Способ удаления интрамедуллярных опухолей
Случайный патент: Способ непрерывной разливки металлов