Способ консервации живого биологического объекта

ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветскихСоциалистическихРеспублнк нн 719580,09.7 21 2408925/302) Заявлено 2 присоединением заявк Гааударстбенный комнт 23) Приорит СССР но делам изобретений н открытий(088.8) я 10 03 Дата оп икования опис григорян, М А, Шахна(72) Авторы изобретения нева еханнкн Московского ордена Ленина иКрасного Знамени государственного униим. М, В. Ломоносова ИнститутТрудового н(54) СПОСОБ КОНСЕРВАЦИИ ЖИВОГО БИОЛОГИЧЕСКОГО ОБЪЕКТА Известен также способ кбиологи ."еских объектов, в чэритроцитов, в присутствииноксида с последующим замв жидком азоте. По этому с5троциты смешивают с 20-3водным раствором полиэтилемолекулярным весом 1500,0,01 н. фосфатный буфер, рНдят до 7,0-7,3,выдерживаютпри 15-21 ОС и затем заморжидком азоте. После оттаивгический объект используютзначению 21 нсервации астности полиэтилеораживанием пособу эри%-ным ноксида с содержащимсреды довомин оживают ания би о его наПо тако вводитс азмораж р Про на и цедурасвязанаС цельюанения жкта при сох обь Изобретение относится к способу сохранения живых биологических обьектов и может быть использовано в сельском хозяйстве.Известны способы, согласно которым живую ткань можно замораживать так, что после размораживания она продолжает нормально функционировать. В частности, известен способ, по которому биологический объект охлаждают до температуры и хранят при ней длительное время, после чего объект согревают до физиологического интервала температур.ФЭтим способо удается за десятые доли секунды витрифицировать живой организм . т.е, вести охлаждение так быстро, что вода и водные растворы, содержа 1 циеся в организме,не кристаллизуются и живые ткани не подвергаются механическому разрушению 11Реализация этого способа связана с большими трудностями, о именно тело значительных размеров трудно равномерно охладить достаточно быстро. му способу полиэтиленоксид раствор в высоких концентропользования объектов посивания их необходимо отмыть. отмывания сложно, длитольс большими потерями.повышения эффективности изненных функций клеток многократном их зомОрожик3 71 ванин и оттаивании предлагается способ консервации живого бисаогического объекта, преимущественно растительного происхождения, включающий охлаждение объекта до отрицательной температуры в присутствии псаиэтиленоксида, храненйе его при этой температуре и последующее согревание объекта до физисаогического интервала температур, по которому в отличие от известного способа находяшуюся в клетках живого биологИ- ческого объекта жидкость замещают полиэтиленоксидом с молекулярным ве сом свыше 50000 путем введения его .в живую тканЬ.В предлагаемом способе высокомолекулярный полимер, изменяет физические свойства жидкости, содержащейся в замороженном объекте при кристаллизации. Псаожительный эффект достигается добавлением полимера в очень низких- 5 - с концентрациях (около 10 -10 ). Используемый полиэтиленоксид в таких концентрациях совершенно не токсичен, даже при непосредственном введении вкровь. Если способ согласно изобрете,- нию применять для замораживания не" " растений,а "эрйтроцитов, то йосле "раз-мораживания их не нужно отмывать.П р и м е р Готовят раствор псаиэтиленоксида в воде с концентрациейсухого вещества около 10 вес,% и внего высаживают семена ВаЪэа 1 ооссаРппрсц.чЗепэ, которые находились тамдо прорастания. Одновременно семенаэтого растения прорастают в обычнойводе (контроль), Когда проростки достигают 2-3 см, опытные и контрольныеэкземпляры помещают в мороэильнуюкамеру и выдерживают в течение 2 чпри -14 С.После извлечения проростков из квомеры их размораживают при 20 С, В " - "результате первого замораживания иоттаивания все контрольные экземплярыпогибают. Более 50% опытных экземпляров уцелело,Через 2 ч после оттаивания опытные,экземпляры снова помещают в морозиль/9580 4ную камеру на 2 ч при той же температуре (-14 С), После извлечения из ка меры и оттаиВания часть опытных проростков погибает. Уцелевшие проросткив течение нескольких дней нормальноразвиваются в среде раствора высокомолекулярного полиэтиленоксида.После этого их в третий раз помешают на 2 ч в моррзильную камеру10 при -14 С,Уцелевшие после оттаивания образцывысаживают в почву и выращивают вкомнатных условиях, причем растенияполивают только раствором полиэтилен 15 оксида с концентрацией сухого веществаоколо 10 4 - 10 весЛ.Растения проходят полный цикл развития - цветут и плодоносят, Полученныесемена проявляют нормальную всхожесть,20формула изобретенияСпособ консервации живого биологи ческого обьектв, преимущественно растительного происхождения, включающийохлаждение его до отрицательных температур в присутствии полиэтиленоксида,хранение его при этой температуре и 30 последующее согревание объекта до фиэи 1-ологического интервала температур, о т-.ли ч а ю ш и й с я тем, что, с цельюповышения эффективности сохранения жизненных функций клеток обьекта при мноЗ 5 гократном их замораживании и оттаивании, находящуюся в клетках живого биологического обьекта жидкость замещаютполиэтиленоксидом с молекулярным весом свыше 50000 путем введения его 40 вживую ткань.Источники информации,принятыево внимание при экспертизе1. Виноград-финкель Р, ф. Консервирование крови и ее компонентов дляцелей трансфузии, М., 1974, с. 19-30.2, Авторское свидетельство СССР% 560613, кл, А 61 К 35/18,А 01 И 1/02, 1975 (прототип), Составитель М, ДранишниковРедактор 3. Бородкийа Техреду О. Легеэа Корректор И. МускаЗаказ 10095/4 Тираж 723 ПодписноеЦНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5филиал ППП Патент, г, Унаород, ул. Проектная, 4