Способ определения изоэнзимов лактатдегидрогеназы

ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯК ПА 1 ЕНТУ аи 663329 Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик(3 ) Р 2443741.0-52 (ЗЗ) ФРГ Государственный ноинтет СССР ее делам нзобретеннй и атнрытнй(72) Автор изобрЕтения Иностранная фирма Коммандитгезельшафт Шварцхаупт(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИЗОЭНЗИМОВ ЛАКТАТДЕГИДРОГЕНАЗЫПри исследовании сыворотки или плазмы исследуемую пробу при помощи буферного раствора триэтаноламин - МаОН доводят до значения рй 6,3 - 6,4. При этих значениях рН изоэнзимы ЛДГ 4 и 5 легко определяются. Наличие лактатдегидрогецазы 5 является показанием присутствия карццном, поэтому точное и чувствительное определение может быть использовано для раццего определения, карцицом.При исследовании влагалищной жидкости, значение рН которой равно 4, проводят определение при помощи буферного раствора трцэтацоламцц - МаОН, рН устанавливают в пределах от 6,3 до 6,4.Влагалищцую жидкость исслсд юг при помощи тампонов или ленты,на которые наносят следующий состав, мл:Триэтаноламин - )х)аОН-буфер рН 7,0 Ма-лактат (цатриевая сольО, 2 - молочной кислоты) 67,5 Фсцозим метосульфат 0,1 НикотинамидадецицдицуклеотидНитроголубойхлортстразол 1,5 О,Ъ Изобрстецие относится к области медицины и может быть использовано в качестве средства для раннего определения патологических изменений в организме.Известен способ определения изоэнзимов лактатдсгидрогеназы путем взаимодействия 5 в буферной среде лактата и цикотицамидадениц-нуклеотида до пирувата . Однако известный способ не обеспечивает высокой точности определения изоэнзимов 4 и 5,Целью изобретения является повышение1 О точности определения изоэнзимов 4 и 5.Эта цель достигается тем, что взаимодействие ведут в буферной среде при зца. чении рН в пределах от 6,0 до 6,5.Кроме того, в качестве буферной среды применяют раствор триэтацоламица и хаОН. 15Определение лактатдсгидрогсцазы (ЛДГ) имеет больцгос значение при исследовании жидкостей тела. Если эти эцзимы у здоровых людей задерживаются главным образом в тканях, то при патологическом росте ткани, при лейкемии и других заболевани 1 их обнаруживают в большой концентрации в сыворотке или другой жидкости тела (например, влагалищцой).1,Р в663329 формула изобретения Составитель С. Малютина Редактор Л. Новожилова Техред О. Луговая Корректор О. Ковинская Заказ 2602/65 Тираж 1089 Подписное ЦН И И П И Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб д. 4/5 Филиал П П П Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4Вводят тампон во влагалище, при этомжидкость вЛагалищавступает в реакцию с изоэндщчами ЯД,"ииеюшимися во влагалйщпри Жачении рН 6,0 - 6,5, предпочтителррдЬ;3 - е 6;4, ф", ПрцутсбюиФЯДГ /во влагалищной жид,.зкосги пбдтверждается тем, что спустя 5 -10 мин тампон окрашивается в синий цвет,Состав для проведения исследования наносят нз носитель, например тампон, любым известным способом, затем высушивают и хранят его в светозащищенном месте до применения.Состав можно наносить также на хлопчатобумажную ленту в форме шнура.Тампоны с составом могут быть применены не только врачом, а каждая женщина может провести исследование сама. Так окрашивание тампона в синий цвет после 15 - 30-минутного пребывания во влагалище, свидетельствует об опасностй "патологического изменения и является сигналом для посещения врача.Для сохранения тампона до посещенияврача, необходимо его дезинфицировать, это производят путем погружения использованного тампона в 20%-ныйраствор парамида,Было проведено исследование на 100 здоровых женщинах и больных саг 1 погпа со 1 тег 1, сагс 1 погпа сограгз и сагспогпа пз 1.Тампон вводили на- 30 мин. После его извлечения были обнаружены следующие цветовые изменения;нет окраски - результат отрицательныйу здоровых женщин;розовая окраска - у здоровых женшин(в том числе и у беременных до 5 дней);светло-голубая окраска с фиолетовыми " ==точками -- /тиагноз зона перерождения;голубая или синяя окраска - карцин,чгосовпадает с результатом патологического исследования.Определение 1 п иваго, например, сыворотки или плазмы проводят в буферной среде раствора триэтаноламина и хаОН при значЪнии рН в пределах от 6,0 до 6,5.Пример 1, Гигиенические тампоны плотно до 2-х раз обертывают клеющей лентой ц 1 ириной 1 см. Оболочку тампона снимают с противоположной стороны, на которой находится вытяжная нитка, С проооирок сби- .ваю: дно, в образовавшуюся трубку вводяттампон таким образом, чтобы открытый с одной стороны тампон закрывал конец труб ки. Вытяжную нитку прикрепляют с другойстороны при помощи пластыря или клейкой ленты. Трубку со сторон снятой оболочки опускают в раствор, тампон впитывает 1,0 мл раствора.Приготовленный таким образом тампонсушат вымораживанием. Высушенные тампоны удаляют из стеклянной трубки и хранят в темноте в светонепроницаемой бумаге или пленке или в цветной бумаге в защищенном от света месте.15 Пример 2, При помогци шприца вводят2,0 мл раствора состава для проведения исследований в тампон. Иглу шприца прокалывают через оболочку и, медленновпрыскивая, проводят иглу в продольном направлении ко второму концу тампона, этим достигается равномерная пропитка тампона. Затем тампоны сушат и замораживают.Предлагаемый способ обеспечивает возможность быстрого и точного определения изоэнзимов лактатдегидрогеназы, что позво лит быстро выявить патологические изменения в организме. 1. Способ определения изоэнзимов лактатдегидрогеназы путем взаимодействия в буферной среде лактата и никотинамидадениннуклеотиода до пирувата, и выявленио изоэнзимов по появлению синего окрашивания, отличающийся тем, что, с целью повышения точности определения изоэнзимов 4 и 5, взаимодействие ведут в буферной среде при значении рН в пределах от 6,0 до 6,5.2. Способ по и. 1, отличающийся тем, что в качестве буферной среды применяют раствор триэтаноламина и хаОН.Источники информации, принятые во внимание при экспертизе1, ВосЬепцса В 1 ор 1115 уса Ас 1 а 1968, у 159 Ь 2, рр. 236 - 244.