Способ хранения фитопатогенного гриба

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯк Автор о(ому свидетельству Союз Советских Социаттистических Республиклнительное т( авт. евид-в о 15,07,76 (21) 2383912/28 Я) М. К. С 12 К 1/ нриеоеаиненнеае заттвнн М23) Приоритет 3) Оттублнновано 050378.6 толлетень ЭВ аецарвтвеввый аеавтет6 ееета етвееетрее 666 Рва дааев аааеретееавв втерытвйа отаублииованин описании 15027 втор ьаобретени Сидорова льина и С А.В.Хотянови явител(54) С РАНЕНИЯ ФИТОПАТОГЕННО 10 ГРИБАОс(ЕР(цпт даЬКуаге КЯеЬ Йромыв аютузласоделирудиивоздлабор Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и фитопатологии, в частности, к хранению и культивированию микроорганизмов,Известны способы культивированиямикроорганизмов, например, гриба Дар.о(хай на древесных стружках, экстрагированных раствором соды и залитыхсуслом 11(. Этот способ используетсядля краткосрочного выращивания. гриба 10при получении кормового белка. Длядлительного хранения гриба необходимычастые пересевы. На обычных питательных средах это сопровождается изменением морфолого-физиологических (5признаков микроорганизмов.для длительного хранения микроорганизмов без пересевов используют также способ лиофильной сушки (2(.Но этот способ тРебует сложной ап- дрпаратуры, состоящей из вакуумнасосов,холодильных установок и др.Цель изобретения - сохранение вирулентности гриба 7 е 1. ЫаЫ(аЕпри длительном хранении без пересавов. 95Это достигается тем, что в качествесубстрата берут опилки древесины лиственных пород, которые после экстрагирования раствором бикарбоната или карбоната натрия при автоклавировании 39 вания водой и высушнвания, смеши-. с сухой картофельной мезгой, няют до 50 средой Чапека, не жащей источника углерода, иноку" т грибом, выращивают его до стаккросклероциев, высушивают до ушно-сухого ссстояния и хранят в аторных условиях. П р и м е р. Опилки древесины лиственных пород для. удаления смолистых веществ заливают 4-ным Раствором ИаНСОа, автоклавируют 30 мин, при 1 атм, отмывают водой до нейтральной реакции и высушивают до воздушно-сухоЪ го состояния. Затем сухие опилки смешивают с высушенной картофельной мезгой в количестве 20-40 от общего ве" са и пропитывают минеральной средой Чапека (ЙаИС., 0,3, КН РО 4 0,1, И)604 0,05; КСР 0,5) до получения влажности 50-б 0 (субстрат раствор:1) . Полученную массу насыпают в пробирки слоем 2-3 см, пробирки закрывают ватными пробками и стерилизуют в автоклаве при 1,2 ати, 45 мин.Пробирки с субстратом засевают водной суспензией гриба"и инкубируют при 24-26 С, периодически встряхивая. Через семь суток субстрат преобретает596617 Составитель М.МирзаевТехред М.Келемеш Корректор С.Гарасиняк Редактор Е.Скворцова Заказ 1037/29 Тираж 568 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений н открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 черную окраску эа счет образованиямикросклероциев гриба. Культуру гриба далее просушивают вибо естественным путем За счет испаревмя влаги через ватную пробку, либо при температуре не выше 40 С. Далее культуру хранят в течение 3,5 лет в лабораторных условиях при комнатной температуре и после пересева на агаризованную среду Чапека проверяют вирулентность Увы да Ь 8 о е к хлопчатнику в тепличных условиях путем инъекции в стебель конидиальной суспенэии гриба плотностью 510 спор/мл. Приьэтом установлено, что полученная куль-в тура сохраняет исходную вирулентность в то время как культура гриба, хранившаяся в течение того же срока на агариэованной среде Чапека с пересевами, потеряла полностью вирулентность. ф Таким образом, способ позволяет длительно хранить гриб без пересевов, что стабилизирует его моролого-культуральные признаки и вирулентность. яя Сыпучесть субстрата позволяет многократно производить отсев в различные сроки, на обычные питательные среды нз одной и той же пробирки, что дает возможность работать со стандартныч материалом. Формула изобретенияСпособ хранения Фитопатогенного грибаЧем 1 сйИов да И Вэ Е К Ре Ьвключающий его выращивание на субстрате с древесной основой, экстрагнрованной раствором соды, о т л и ч а ющ и ф с я тем, что, с целью сохранения вирулентности гриба при длитель" ном хранении, в качестве субстрата для выращивания используют опилки дре. весных лиственных пород которые после экстрагирования растворомсоды при автоклавировании, промывания водой и высушивания смешивают с сухой картофельной мезгой (20-40 от общего веса), увлажняют до 50 средой Чапека, не содержащейисточника углерода, засевают грибом н посл выращивания до стадии микросклероциев и высуажвания до воздушно-сухого состояния культуру хранят в лабораторных условиях.Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:1. Голубчина Р.Н, Особенности посевного материала для глубинной культуры Авр, о ха у при получении кормового белка. Кормовые белки и биостимуляторы для животноводства, Изд. АН СССР, М. -Л., 1961, 139.2. Крохнна В.Н. Консервация куль" туры Вас се е ц 8 лиофильным методом, Прикладная биохимия и микробиология, т. Х, вып. 5, с. 753-756, 1974.