Способ контроля насыщения органов криопротектором при изолированной перфузии

и 1 572252 ОПИСАН И Е ИЗОБРЕТЕНИЯ союз Советских Социалистических.К Государственный комитет Совета Министров СССР бликовано 15,09,77. Бюллетень34(088.8) о делам изобретений в, и отнрь ата опубликования описания 28.09.7(54) СПОСОБ КОНТРОЛЯКРИОПРОТЕКТОРОМ ПРИ И криопротектора до момента наступления ра.венства концентраций в притоке и оттоке.Способ осуществляют следующим образом.Ь процессе перфузии органа полиэтиленок сидом (молекулярный вес 400) различнойконцентрации оерут образцы оттока из вены в количестве 0,2 - 0,3 мл через определенные промежутки времени и помещают в спектрометр вместе со стеклянной ампулой эталоном тетраметилсиланом,Концентрацию полиэтиленоксида в пробахопределяют по интенсивности линии ядерно- магнитного резонанса водородсодержащей группы криопротектора до момента наступле ния равенства между концентрацией в притоке и оттоке.Затем вычисляют отношение площади подкривой поглощения СН к площади под кривой поглощения тетраметилсилана, Это число 20 соответствует 100 "/о концентрации полиэтиленоксида, Такое же отношение вычисляют для исследуемого образца, это число соответствует определяемой концентрации.11 р и м е р. Почку кролика перфузируют 25 10%-ным раствором полиэтиленоксида молекулярного веса 400 при 4 С. Из вены во время перфузии берут пробы оттока перфузата, Отсутствие разницы концентрации полиэтиленоксидав притоке и оттоке является критеЗ 0 рием насыщения почки криопротектором. Изобретение относится к области низкотемпературного консервирования различных органов и тканей, преимущественно к определению насыщения органа криопротектором во время изолированной перфузии,11 ри подготовке органа к низкотемпературному консервированию используют криопротекторы, которыми насыщают орган спосооом изолированнои перфузии. 11 ри этом важно определить время насыщения органа криопротектором, так как увеличение времени перрузии может вызывать повреждение органа, а также непроизводительный расход криопротектора,Известен химический способ контроля насыщения органов криопротектором, который заключается в окислении этиленгликоля йодной кислотой до формальдегида, Формальдегид определяют колориметрически по реакции с хромотроповой кислотой.Недостатками данного способа являются длительность процесса (до 60 мин) и большие объемы проб (2 мл), что усложняет осуществление контроля насыщения.С целью ускорения и упрощения способа контроля насыщения органов криопротектором по предлагаемому способу через каждые 15 - 20 с определяют концентрацию криопротектора путем записи спектра ядерно-магнитного резонанса водородсодержащей группы ИЯ ОР 1 АН В .-"Г;" "Я,РОВАННОЙ ПЕРФУЗИИ572252 Составитель Л. Соловьев Техред И, Михайлова Корректор Л. Брахнина Редактор В, Блохина Заказ 2097/8 Изд.727 Тираж 778 НПО Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5Подписное Типография, пр. Сапунова, 2 Спектры снимают на спектрометре высокого разрешения РЯс рабочей частотой 60 МГц для протонов.Спектры проб оттока сравнивают с исходным 10%-ным раствором полиэтиленоксида. Отношение площадей тетраметилсилана к СН 2 группе равняется 2. В оттоке на 1-й минуте перфузии отношение площадей тетраметилсилана к СН 2-группе равняется 1, что соответствует 5% концентрации полиэтилен- оксида.На 5-й минуте перфузии отношение площадей тетраметилсилана к СН 2 группе равняется 2, что соответствует 10% концентрации полиэтиленоксида.Таким образом, насыщение почки наступает на 5-й минуте. Дальнейшая перфузия нецелесообразна.Время измерения занимает 8 мин, относительная погрешность + 5%, Способ контроля насыщения органов криопротектором позволяет использовать органы для последующей трансплантации и не требует криопротекторов, меченных радиоактивными изотопами (ввиду сложности их получения), а,также от сутствует возможность заражения обслуживающего персонала, Процесс контроля менее трудоемок и требует в 2 раза меньше времени по сравнению с известным способом. 10 Формула изобретенияСпособ контроля насыщения органов криопротектором при изолированной перфузии путем определения концентрации его в притоке и оттоке, отличающийся тем, что, с це лью ускорения и упрощения способа, черезкаждые 15 - 20 с определяют концентрацию криопротектора путем записи спектра ядерно- магнитного резонанса водородсодержащей группы криопротектора до момента наступле ния равенства концентраций в притоке и оттоке,