Среда для выделения вибрионов

(-ф. (1.ю" л.кргьО П ИСА Н ИЕ щ 4 бЯОИЗОБРЕТЕН ИЯСоюз Советских Социалистических Республик(5) М. Кл. С 121 с 10 осударственный комитетСонета Министров СССРпо делам изаеретенийи открытий 3) Приорите 53) УДК 576,8,093.33(54 А ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИ РИОНО сте п и словии герметиотовления сухой минера сновы навеоки всех ингр ка), растирают в ступке ице и тщательно смеши основа может храниться Для приг латиновой о (кроме желт ровой мельн таком виде ьно-жедиентов ли шаают. Ы в проИзобретение относится к микробиологии и может быть использовано для выделения вибрионов при исследованиях на холеру,Известна среда для выделения вибрионов, содержащая агар-агар, хлористый натрий, мясо-пептонный бульон и эмульсию яичного желтка.Однако известная среда обладает низкой элективностью (избирательностью).С целью повышения элективности и дифференцирующих свойств предложенная среда содержит кальция хлористого 0,1 - 0,2 г, магния сернокислого 0,1 - 0,2 г, цинка сернокислого 0,05 - 0,075 г, натрия хлористого 5,0 -- 25,0 г, натрия двууглекислого 0,75 - 0,8 г, бромтимолового синего 0,04 - 0,06 г, желатины 10,0 - 11,0 г, агар-агар 9,5 - 10,5 г, эмульсию яичного желтка 20 - 30 мл, дистиллированную воду 1000 мл.Увеличение содержания поваренной соли до 2,5% (вес./объем) в среде придает ей большую элективность и делает пригодной для выделения галоф ильи ых вибрионов Чйг 1 о рагапаегпо 1 у 11 спз ц Ч. а 1 рпо 1 уИсцз. хладном сухом ме рзации упаковки,Перед употреблением сухую основу вновьперемешивают в"тряхиванием в таре и беруттребуемую навеску из расчета 26 - 28 г на1 л дистиллированной воды (46 - 48 г длягалофильных вибрионов), Навеску суспендиругот в небольшом количестве дистиллированной воды и оставляют для набухания на1 О 15 - 20 мин. Затем доливают воду до нужного объема и растворяют навеску кипячениемв течение 5 - 6 мин при постоянном перемешивании. Эмульсию желтка готовят ех1 егпроге. Свежие куриные яйца моют щеткой15 в мыльной воде, выдерживают 5 - 10 мин вспирте и обжигают. Затем отделяют желткиот белка и добавляют к ним равный объемстерильного физиологического раствора,Смесь встряхивают для гомогенизации (из20 одного желтка получается 30 - 40 мл эмульсии).К расплавленной и охлажденной до 50 Сминерально-желатиновой основе добавляют2 - 3 об. % эмульсии желтка, среду тщательно перемешивают и разливают по чашкамПетри, затем подсушивают как обычно и используют для посевов.Предлагаемая среда имеет зеленовато-голубой цвет, На ней могут расти вибрионы,30 когорые не боятся высокого рН и способ465101 15 Предмет изобретения Составитель С. МалютинаТекред Е. Подурушина Корректор Н, Аук Редактор Д. Пинчук Заказ 4902 Изд, М 1417 Тираж 529 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Мипиетров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5МОТ, Загорский филиал ны утилизировать желток и желатину - единственные источники азота и углерода. Выросшие колонии вибрионов окрашены в желтый цвет и окружены таким же ореолом.Ореолы, возникающие в результате расщепления микробами лецитина, - двуконтурны. Внутренний контур мутный, с металлическим блеском, наружный - прозрачный. Соотношение контуров и величина ореолов зависят от возраста культур, их варьируют от штамма к штамму. После того как среду заливают 5 - 7 мл 15 - 20%-ного раствора трихлоруксусной кислоты ее цвет меняется до белесовато-желтого, а на месте колоний на мутном фоне проявляются прозрачные зоны протеолиза (расщепление желатины).Размеры зон могут быть больше, чем площадь ореолов. Для пересевов и постановки реакции агглютинации колонии снимают до обработки чашек раствором трихлоруксусной кислоты,При посеве 200 клеток на предлагаемой среде вырастает примерно столько же колоний, сколько и на щелочном агаре Мартена - эталонной среде.Предлагаемая среда обладает способностью подавлять рост воздушной микрофлоры, благодаря чему даже в открытых чашках Петри она остается стерильной (по крайней мере в течение двух суток). 4Электронные свойства этой среды проявляются в угнетании роста таких микробов, как Е, со 11, 5. 1 ур 11 ояа, 5. рага 1 урЫ А, ЯЬ. 11 ехпег 1, Рго 1 еця чц 1 даг 1 я, Сотпагпопая 5 1 егг 1 депа, егя 1 п 1 а ряецго 1 цЬегсц 1 оя 1 я,егяп 1 аеп 1 егосо 1111 са, Яар 11 у 1 ососсця ацгеця, Вас 111 ця яцИ 11 я.Штаммы Аегогпопая 1 огш 1 сапя на этой среде либо не растут, либо образуют очень мел кие колонии, расщепляющие лецитин, но нежелатину. Ряецдогпопая аегцрпояа растет в виде мелких колоний, вызывающих лишь протеолиз. Среда для выделения вибрионов, вклю чающая источники углерода, азота и минеральные соли, отличающаяся тем, что, с целью повышения элективности и дифференцирующих свойств, она содержит кальция хлористого 0,1 - 0,2 г, магния сернокислого 25 О,1 - 0,20 г, цивка сернокислого 0,05 - 0,075 г,натрия хлористого 5,0 - 25,0 г, натрия двууглекислого 0,75 - 0,8 г, бромтимолового синего 0,04 - 0,06 г, желатины 10,0 - 11,0 г, агарагара 9,5 - 10,5 г, эмульсии яичного желтка зо 20 - 30 мл, дистиллированной воды 1000 мл.