416759

"мкм ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИяК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советских Социапистицеских Республикт. свидетельства х,о висимо явлено 19.11,1971 ( 1631381/18-24) Кл. С 121 1,0 рисоединением заявкиПриорите Государственный намитет Совета Министров СССР аа делам изобретений и открытийД 1 х 576.8(088.8) убликовацо 25.1.1974. Бюлл та опубликования описания и ь х"еЛП 1.1 Авторыизобретен п. Е. Корш и Т. 3. Артемо нститут общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысинавител СОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВМИКРООРГАНИЗМОВ В ВОДЕ Изобретение относится ы области санитарно-бактериологцчеокого исследования качества воды.Известные спосооы определения количества микроорганизмов в воле, основанные на окрашивании содержащихся в пробе воды клеток с последующим их подсчетом, характеризуются большой трудоемкостью и недостаточно высокой точностью.,По предлагаемому способу, с целью повышения точности и ускорения процесса опрелеления числа клеток, микроорганизмы из пробы воды при их окрашивании флуорохромируют на нагретом, например до 70 С, нелюмцнесцирующем мембранном фильтре буферным (с рН порядка 7,5) распвором флуорохрома ривацола концентрации порядка 1: 2000 и затем регистрируют флуоресценцию микроорганизмов.Концентрирование бактерий производят не на обычных, мембранных фильтрах, а на нелюминеоцирующих. Вместо скрашивания микроорганизмы флуорохромируют непосредственно на мембранном фильтре.Для флуорохромирования из многих флуорохромов выделен риванол, так как оц дает яркую флуоресцеццию всех разнообразных по видовому составу микроорганизмов природной волы, хорошо дифференцирует бактери- аЛЬНЫЕ КЛЕТКИ От ЧаетИЧЕК. ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ стабильного эффекта флуорохромцрэванияфлуорохром готовят на буферном раствореконцентрации порядка 1: 200 непосредственноперел анализом. С целью ускорения способа5 флуорохромированце 11 роводят горячим раствором риванол а (70 С) .Важной особенностью люминесцентно-микроскопичеокого метода 5 вляется Возможностьавтоматцчекого учета светящихся клеток,10 поэтому метод может быть использован в приборе лля регистрации общей микробной загрязненности волы.Пробу волы для исследования отбирают встерильную посулу. ь 1 ерез нелюмцпесцирую 15 щцй мембранный физьтр в фильтровальцомаппарате фильтруют определенные объемыводы с учетом того, чтобы прц подсчете в 1квадрате сетки Гаженко было не более 10клеток,20 Фильтр с осевшими на него бактериямиподсушивают сухим жаром до полного высыхания. Флуорохромцрованце производят в течение 2 мцн, помещая фильтр стороной с бактех 1 ями вверх на поверхность 0,2%-ного ра 25 ставора флуорохрома риванола на фосфатцом/5,Ч буфере с рН = 7,0 - 7,5, прелварцтельно нагретого ло 70 С. Затем остаткикрасителя улаляют, помещая фильтр цафильтровальную бумагу, смоченную дцстцллцЗО рованной водой, путем перекладывания до416759 Предмет изобретения Составитель Е. ТимохинТехред Г. Васильева Редактор А. Батыгин Корректор В, Брыксина Заказ 1553,/12 Изд. М 529 Тираж 456 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, )К, Раугвская паб., д. 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 тех пор, пока площадка под фильтром не перестанет окрашиваться.После высушивания фильтр помещают на предметное стекло между слоями нелюминесцирующего иммерсионпого масла, накрывают тонким покрывным стеклом, микрос сопнруют под л 1 оминесцентным микроскопом в падающем свете со светофильтрами СЗС, БСи ФС, запирающим светофильтром )КС. Просчитывают с помощью окулярной сетки Гаженко количество бактерий не менее, чем в 20 квадратах. При подсчете необходимо учитывать быстрое выцветание препарата под воздействием возбуждающих люминесценцию лучей. Способ определения количества микроорганизмов в воде, основанный на окрашивании 5 содержащихся в проое воды клеток с последующим их подсчетом, отл и ч а ю щ ее с я тем, что, с целью повьпцения точности и уско.рения процесса определения сла клеток, микроорга:шзмы из пробы воды при их окра шиванпп флуорохромируют на нагретом, например до 70 С, нелюминесцирующем мембранном фильтре буферным (с рН порядка 7,5) раствором флуорохрома риванола концентрации порядка 1: 2000 и затем регистри руют флуоресцен микроорганизмов.