Способ диагностики лептоспироза

Союз Советских Социалистицеских РеспубликОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕ Н ИЯк Авторском свидетельству Ф"РЗависимое от авт. свидетельства-Заявлено 04.Ч 111.1969 ( 1355816130-15)с присоединением заявки-Прирцтет -Оцбликовано 18,1 Ч.1973, Бюллетень19 М.Кл, 6 01 п 33/16 А 61) 23/00Государственный комитет Совета Министров СССР по делам изобретений и открытийДК 616.9.986. (088.8) Лата опубликования описания 4.1 Х.1973 Авторыизобретения Н. Г. Балашов и В, Н, Родина Заявится; ЕПТОСПИРОЗ СПОСОБ ДИАГНОСТИ Изобретение относится к способам диагностики заболеваний сельскохозяйственных животных, например лептоспироза.Известны способы диагностики лептоспирозя у животных реакцией мцкроагглютинации лцзиса. Реакцию проводят с сывороткой крови, взятой из яремцой вены.Однако при взятии крови хкивотные могут быть травмированы и ца эту операцию затрачивают много времени.Предложенный способ д 111 гностики лептоспироза у животных реакцией микроагглютинации лизиса отличается тем, что реакцию микроагглютинациц лизиса осущсствля 1 от с плазмой спермы животных,В сперме зараженных животных появляются агглютицицы и лизины.Для реакции применяют цельцу 1 о свежеполучецную сперму, которую для отделения спермиев от плазмы ставят в холодильник при 2 - 5 не менее чем ца 3 час или цецтрифугируют в течение 10 - 15 мин, при 3,5 - -4 тыс. об 1 мин. Берут 0,2 лл верхнего слоя цецтрифугата или отстоявшейся плазмы спермы ц добавляют к 1,8,ил физиологического раствора, делают последовательные разведения 1:20, 1:40, 1:80 1:160,1:320 и т. д.Для реакции берут по 0,1 лтл (2 капли) каждого разведения плазмы и добавляют 0,1 лтл атцгеца. Антигепом служит шести - десятидневная культура лептоспир (не менее 50 лептоспцр в поле зрения микроскопа) с хорошим ростом без феномена самоагглютпнации. В коцтрольцу 1 о пробирку добавляют по 0,1 мл ацтцгеца и физиологического раствора. После 5 добавления яцтцгена пробирки осторожновстряхивают и ставят в термостат при 35,5 0,5 ця 2 час.Результаты реакции учитывают под микроскопом в те:1 ном поле. Из каждой пробирки 10 готовят раздавленную каплю и рассматривают ее под микроскопом. Устанавливают фе номен лизцса и агглютицацци по наличию паучков (склеиванию лептоспир между собой по 3 - 1 О ц более экземпляров) .15 Для изучения динамики титра в сперме посрявне 11 и 1 о с сывороткой крови 13 взрослых кроликов заряжают четырехсуточной культурой штамма 1. роп 1 опа Манихино с концентрацией 80 - 90 лептоспир в поле зрения 20 микроскопа, Культуру вводят подкожно ивцтрибрюшицпо (10 - 40,ял каждом кролик 1) .Коцтролы 1 ь 1 ми являются кролики, которымвводят внутрцбрюшцнцо и подкожно по 20 11 л 25 среды с добавлением сыворотки крови для выращивания лептоспцр. Наблюдение ведут пос;1 с за)зяжеция на протяжении попуторя лет) одновременно исследуют по реакции микро.аггцотццацци лизиса титр антител в сыворот ке крови и плазме спермы. Интервалы исследований в первые два месяца 10 дней, далее, гво ВЮ лг 18 ФУ Ы 7 У У 5 И 1 1 О 175 йнн оспе зарангеиюУ 74" Махиюачева оставител ехред Л орректор Т. Гревцова Редант агова Заказ 1930 НИИПИ Госудд. Ъ. 491омитета Совета Мги открытийа, Ж, Раушская вениког наб д. 4/5 1 оскв Мытищинская типографи.30 дней. Антитела в плазме спермы. появляотся почти одновременно с антцтеламц в сыворотке крови.На двадцатый день после заражения титр антител в сыворотке крови ц плазме спермы 1:2560 - 1:44580. Титр в крови и сперме и тридцать пятому дню достигали максимума (в разведении до 178.240), который удерживался до пятидесятого - пятьдесят пятого дня.Затем как в сыворотке крови, так и в плазме спермы титр антител уменьшался. У одного из кроликов десять месяцев после заражения титр антител в сыворотке крови и плазме спермы снижается до 1:320, а через двенадцать месяцев - в сыворотке крови он был равен 1:40, а в плазме спермы - отрицательный. У других опытных животинах наблюдают расхождние титра 1 - 2 разведения и сторону уменьшения его в плазме спсрмы по сравнению с сывороткой крови,Динамика накопления ц угасания титра 5 агглютинцнов в сыворотке крови и плазмеспермы представлена на диаграмме (см. чертек: - гитр сыворотки крови,- - титр плазмы спермы). Предмет изобретения Способ диагностики лептоспироза реакцией микроагглютинации лизиса, от,тпча 1 огчийса тем, что, с целью исключения травмирования животных при взятии крови и сокращения 15 времени на установление диагноза, реакцию микроагглютинации лизиса осуществляют. с плазмой спермы животнлых.Тираж 755 Подпис гоепиетров СССР по делая изобретении