Способ определения активности фермента карбоангидразы

Номер патента: 207856

Авторы: Сруогините, Юконите

ZIP архив

Текст

ОПИСАНИЕ ИЗ ОБ РЕ ТЕ Н ИЯК ЬвтОРСКОМУ свидвельствю Сова Советских Социалистических Республикоритет Комитет по делам аобретений и открытий при Совете Министров СССРОпубликовано 29.Х 11.1967. БюллетеньДата опубликования описания 23.11.1968 Авторыизобретения В. Сруогините и А. П. Юконит витель ОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТА КАРБОАНГИДРАЗЫняют теми же растворами и в момент прибавления раствора бикарбоната натрия и соляной кислоты включают секундомер. Кювету помещают в фотоколориметр и отмечают время, пока стрелка гальванометра не возвратится в нулевое положение. Измеренное таким образом время контрольной реакции обычно составляет около 60 сек. Затем в правую кювету наливают 1,2 мл раствора бикарбоната натрия и соляной кислоты, необходимое количество источника карбоангидразы и 1,2 мл раствора бикарбоната и карбоната натрия. При добавлении последнего раствора включают секундомер. Когда стрелка гальванометра возвращается на нуль, секундомер отключают, определяя таким образом время катализируемой карбоангидразой реакции, Активность фермента определяют по формуле: где Аединицах;и 1 - врзой реакц едмет изо тения Способарбоанг определения актразы на основ мента скоро вн остиизмерен Известны способы определения активностифермента карбоангидразы на основе измерения скорости реакции нейтрализации СО 2 доопределенного значения рН раствора. Однако эти способы недостаточно точны вследствне визуального наблюдения за изменениемокраски индикатора, занимают много времени и предусматривают использование металлической ртути.Предлагаемый способ отличается тем, что 10учет скорости хода контрольной и катализируемой карбоангидразой реакции производят фотоэлектроколориметрированием,Такая методика анализа позволяет обеспечить более высокую точность, сократить 15время его проведения и исключает использование металлической ртути.Для определения активности ферментакарбоангидразы по предлагаемому способу вдве кюветы фотоколориметра наливают по 201,2 мл раствора, содержащего по0,005 г-экв/л бикарбоната натрия и солянойкислоты, по 1,2 мл раствора, содержащего0,02 м МаНСоа, 0,0005 м Ха,СО, и индикатор,и по 0,1 мл инактивированного кипячением растительного экстракта или по 0,05 млинактивированного гемолизата крови. Кюветызакрывают крышками, взбалтывают и устаьавливают в фотоколориметр, После уста.новки нулевого положения при зеленом светофильтре правую кювету вынимают, запол. активность фермента в условных- время контрольной реакции мя катализируемой карбоангидраи,Заказ 15/14 Тираж 530 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Центр, пр. Серова, д. 4 Типография, пр. Сапунова, 2 сти реакции нейтрализации С 02 до опреде ленного рН, отличающийся тем, что, с целью получения более высокой точности, сокра 1 цения лабораторных манипуляций и исключе ния использования металлической ртути, учет скорости хода контрольной и катализируемой карбоангидразой реакции производят фотоэлектроколориметрированием.

Смотреть

Заявка

1064816

А. В. Сруогините, А. П. Юконите

МПК / Метки

МПК: G01N 21/80

Метки: активности, карбоангидразы, фермента

Опубликовано: 01.01.1968

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-207856-sposob-opredeleniya-aktivnosti-fermenta-karboangidrazy.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения активности фермента карбоангидразы</a>

Похожие патенты