Способ фиксации нервной ткани

Г 0103 СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХЕСПУБЛИК 29 АЗ 01 М 1/28 ТНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОБРЕТЕН ТЕНТУ, 1 ч. 4псударственный ин Е РВ НОЙ ТКА(54) СПОСНИ КСАЦ Изобретение относится к области нейрогистологических исследований и может найти применени для определения окончания флксации. об осуществляют следующим образом,Фиксируемый образец биологической ткани, этанол и мерный сосудтермостатируют раздельно для приведения их к одинаковой температуре наилучшей температурой является 20-24 С). Мерный сосуд должен иметь объемную шкалу, Фиксация проводится при выбранной температуре, лежащей в указанном выше интервале,Для чего фиксируемый образец биологической ткани опускают на дно мерного сосуда, покрытое 5-6 слоями марли и наливают в него этанол до определенной метки на объемной шкале и герметично закрывают для исключения испарения этанола,(21) 4865701/14(71) Смоленский гский институт(73) Смоленский гский институт(56) Волкова О. В,гистологической1971, с.127,сударственный медициндр. Основы гистологии с ехникой, М,: Медицина,(57) Изобретение с носится к медицине, а именно к гистологии. Целью изобретения является повышение качества способа, Цельдостигается тем, что фиксацию проводят в изотермических усл:виях, при этом в начале определяют значения объема системы ткань- фиксатор, далее регистрируют динамику уменьшения системы ткань-вода-этанол, а окончание фиксации определяют по полному выходу воды из ткани и замене ее на спирт, т,е, до момента стабилизации системы ткань-фиксатор, При предложенной фиксации нервная ткань не повреждаегся, при последующей гистологической обработке ткань сохраняет,свою структуру Через определенные промежутки времени, различные в зависимости от размеоов образца ткани (для образца объемом менее 1 см промежутки времени равны 10 мин), измеряют объем системы ткань-зтанол и результат отображают на графике зависимости объема системы ткань-этанол от времени нахождения образца в этансле, Получаемые на графике точки плавно соединяют кривой,Фиксируемый образец биологической ткани выдерживают в этаноле до момента появления на графике "плато", указывающее на полное пропитывание образца этанолом и его полную фиксацию, Образец извлекают из этанола и проводят с ним дальнейшие гистологические манипуляции.Объемные процессы, происходящие при фиксации образца биологической ткани в этаноле, можно описать следующими объемными уравнениями;(Чт + Чв) = Чт Чв - ЛЧ;Ч,+Чс 1=(Чт+Ч,)+ йР,Чв + Чс = (Чв + Чс) ЛЧ111,ЛЧ = ЛЧ 11+ ЛЧ 111-ЛЧ 1,Формула изобретения Составитель Л.СтебаеваТехред М.Моргентал Корректор Т.Палий Редактор А,Егорова Заказ 175 Тираж ПодписноеВНИИПИ Государствен ого комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113 Г 35, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 где Чт - объем сухой ткани,Чв - объем с вобод ной воды в тка ни, Чс - объем этанола, переходящего в1ткань при фиксации,Чс - объем этанола, остаюЩегося в растворе,ф/ ЛЧ, ЬЧ", Л Ч - дополнения до аддитивности объемов,- бинарная система,Суть предложенного способа заключается в определе ии момента уменьшения объема системы ткань-этанол на величину ЬЧ, что будет свидетельствовать об окончании фиксации, т,е, полной пропитке образца этанолом,При определении окончания фиксации определяют момент появления на графике зависимости объема системы ткань-этанол от времени прямой, лежащей параллельно оси времени(плато"), Прямая появляется в том случае, если процесс диффузии этэнола в ткань и свободной воды из ткани заканчивается: происходит полное пропитывание ткани этанолом, объем системы ткань-этанол стабилизируется, объем системы уменьшен, на максимально теоретически возмОжную величину и в .зотермических условиях й/,При различных способах регистрации изменения обьемп системы ткань-этанол в процессе фиксации. точность определения момента наступления "плато" будет различной. В любом случае момент установления"плато" растягивается во времени, так как при переходе графической кривой в "плато" необходимо образец выдержать в этаноле до следующей регистрации, чтобы убедить- .5 ся в истинности "плато", если при следующей регистрации объем системы ткань-этанол будет уменьшаться далее, то образец выдерживают до следующей регистрации объема системы и так до тех пор, 10 пока наступление "плато" не станет очевидным, после этого фиксацию прекращают,П р и м е р 1, Биоптой головного мозга,изолированный от трупа, массой 1670 мг и объемом 1,6 см, 96 этанол, устройство для3 о15 фиксации биологической ткани со всемипринадлежностями термостатировали в течение часа при температуре 22 С, Затем в соответствии со способом, описанным выше, зарядили устройство этанолом и через 20 каждые 10 минут регистрировали уровеньфиксатора в отводном патрубке устройства.Через 14 часов от начала фиксации награфике появилось "плато". Фиксацию окончили.25 Способ позволяет точно определитьвремя окончания фиксации, и ри этом не требует проведения с фиксируемым образцом каких-либо манипуляций после начала фиксации30 При определении окончания фиксациификсируемый образец сохраняется. 35 Способ фиксации нервной ткани путемпогружения в этанол, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения качества способа за счет сохранения структурных взаи- моотношений, фиксацию проводят в 40 изотермических условиях, при этом вначалеопределяют значения объема системы ткань-фиксатор, далее регистрируют динамику уменьшения значения этой системы, а окончание фиксации определяют по стаби лизации этого значения,