Способ определения патогенности культуры бледной трепонемы

)9) (1) 97725 А 5)5 А 61 В 5/ Я ОПИСА ИЕ ИЗОБРЕТЕ ЕЛЕНИЯ ПАТОГЕНЛЕДНОЙ ТРЕПОНЕ(54) СПОСОБ ОПР НОСТИ КУЛЬТУРЬ тносится к м ии и позвол вов, а также Изобретениено ревматочисло реци 7) ицине, а т умень- редупрек области медитике.вышение точнотение относится тности к диагно обретения - по ения.осуществляют с Иэобрены, в час Цель изи определ Способ дующим обра Ь ния патопонемы по ящих току м препараиллярногоклом,под- иксированой пленке репленных ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71). Государственный научно-исследовательский и проектный институт редкометаллической промышленности "Гиредмет" иЦентральный институт усовершенствования врачей(56) Биогенный магнетит и магниторецепция, - М.: Мир, 1989, с. 58 - 85,Согласно способу определ генности культуры бледной тре количеству трепонем, противост жидкости под покровным стекло та, стандартизуют скорость кап тока жидкости под покровным ст считывают количество магнитоф ных к магнитной ферритгранато трепонем и при количестве прик дить их развитие за счет циркулирующих бактериальных антигенов у больных реактивным артритом, У больного с предварительным диагнозом "реактивный артрит" берут из вены 3 мл крови, центрифугируют и отделяют сыворотку. В свежей сыворотке крове методом иммуноферментного анализа определяют наличие антигенов микроорганизмов условно-патогенной группы: стафилококка, протея, синегнойной палочки и клебсиеллы. Для лечения отбираются больные с циркулирующими бактериальными антигенами, у которых лечение известными способами (в том числе антибиотиками) было безуспешным или малоэффективным. Этим больных ежедневно один раз в сутки внутривенно капельно вводят 100 мл 100 ь-ного раствора альбумина,Введение продолжают до достижения выраженного клинического эффекта, обычно 8 - 12 дней,трепонем бб - 92 Д определяют культуруО бледной трепонемы как патогенную,П р и м е р 1. В качестве предметной подложки для микроскопии препарата в темном поле используют прозрачную пластину толщиной 0,6 мм, на которую наносят магнитную пленку ферритграната (МПФГ) толщиной 1 мкм, в центре которой имеется выемка. Однодневную культуру штамма Никольса разбавляют изотоническим раствором поваренной соли до концентрации 1000 особей в поле зрения микроскопа. МПФГ с прозрачной подложкой помещают на предметный столик микроскопа и каплю взвеси трепонем с помощью микропипетки наносят на боковую поверхность выемки и на1697725 Составитель В,БабинковРедактор Л.Пчолинская Техред М.Моргентал Корректор М.Максимишинец Заказ 4340 Тираж ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно изллтельский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 крывают покровным стеклом, Создают капиллярный ток жидкости по наклонной поверхности выемки, Подсчитывают количество магнотофиксированных трепонем в 10 полях зрения. При этом магнитофиксированными считают трепонемы, которые вытянуты по направлению капиллярного потока, а не фиксированным - трепонемы, которые произвольно изогнуты и не ориентированы по потоку,При анализе однодневной культуры обнаружено 890 магнитофиксированных трепонем в препарате, что свидЕтельствовало о высокой патогенности культуры трепонем. Высокая патогенность подтверждена подкожным заражением кроликов по стандартной методике; 10 кроликов из 10 подопытных оказались зараженными.П р и м е р 2, В качестве предметной подложки при микроскопии препарата используют прозрачную пластину толщиной 0,8 мм. На нее наносят магнитную пленку ферритграната толщиной 4,5 мкм с выемкой, Серум, содержащий бледные трепонемы, разбавляют средой 199 в растворе Хенкса до концентрации 1500 особей в поле зрения, МПФГ на прозрачной подложке помещают на предметный столик микроскопа, Каплю взвеси трепонем с помощью микро- пипетки наносят на боковую поверхность выемки и выдерживают 5 мин, Создают капиллярный ток жидкости по наклонной поверхности выемки. Подсчитывают количество магнитофиксированных трепонем в 10 полях зрения, делают фоторегистрацию трепонем.Определено 710 магнитофиксированных трепонем и, соответственно, патогенность культуры, Патогенность подтверждена заражением кроликов трепонемами из исследуемой культуры,П р и м е р 3, В качестве предметной 5 подложки для ферритграната используютпрозрачную пластину 0,8 мм, Применяют МПФГ толщиной 2 мкм. Культуру трепонем 5-дневной давности разводят средой 199 в растворе Хенкса до концентрации 1000 осо бей в поле зрения, МПФГ с подложкой помещают на предметный столик микроскопа.Каплю препарата трепонем 0,02 мл помещают на боковую поверхность выемки и выдерживают 5 мин, Создали капиллярный ток 15 жидкости по наклонной поверхности выемки. Сделали фоторегистрацию трепонем, подсчитали количество магнитофиксированных трепонем. Культура содержала 487 ь магнитофиксированных трепонем и была 20 определена непатогенной,Подкожное введение культуры трепонем кроликам подтвердило отсутствие ее патогенности,Формула изобретения 25 Способ определения патогенности культуры бледной репонемы по количеству трепонем, противостоящих капиллярному токужидкости под покровным стеклом препарата, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что. с целью 30 повышения точности определения, стандартиэуют скорость капиллярного тока жидкости под покровным стеклом, подсчитывают количество магнитофиксированных к магнитной ферритгранатовой пленке трепонем и при ко личестве прикрепленных трепонем 66 - 927 ьопределяют культуру бледных трепонем какпатогенную