Способ получения вестибулопротектора из животного сырья

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ О О О М (Л О О И (Ч О 0 0 еф 1 Комитет Российской Федерации по патентам и товарным знакам к авторскому свидетельству(71) Научно-исследовательская лаборатория биологически активных веществ гидробионтов Министерства здравоохраненияСССР(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЕСТИБУЛОПРОТЕКТОРА ИЗ ЖИВОТНОГОСЫРЬЯ(57) Изобретение относится к областимедицины и биотехнологии. Целью являетсяповышение специфической активности и(51) 6 А 61 К 35/28 35/60 выхода целевого продукта, а также упрощение способа, Для этого селезенку осетровых рыб гомогенизируют в 0,9 - 1,1 М водном растворе уксусной кислоты при соотношении сырья и раствора 5:3 - 5:5, затем проводят экстракцию в том же растворе. Полученную смесь центр ифугируют 15 мин при 3500 об/мин при 0 С, осадок удаляют, К надосадочной жидкости добавляют 0,10 0,15 М водный аммиак до рН 7,0, выдерживают 10 ч при 8 С, после чего раствор фильтруют и лиофильно высушивают, Из 1 кг селезенки осетра получают 32,5 - 34,5 г препарата.1660250 ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Заказ 11 р ВНИИПИ, Рег. ЛР йц 040720 113834, ГСП, Москва, Раушская наб., 4/5Изобретение относится к биотехнологии и медицине, а именно к способам выделения биологически активных веществ из природных источников, в частности к способам выделения веществ, обладающих вестибулопротекторной (противоукачивающей) активностью.Цель изобретения - повышение выхода и специфической активности целевого продукта и упрощение процесса,П р и м е р 1, В качестве сырья используют селезенку осетровых рыб. Селезенку извлекают из пойманной рыбы, немедленно замораживают и хранят при температуре от -40 до -30 С,Все операции по измельчению сырья и экстракции проводят при температуре сырья, растворов и оборудования, контактирующего с сырьем, 3-8 С; растворы, добавляемые к реакционной массе, должны быть предварительно охлаждены до этой же температуры, чтобы не вызвать местных перегревов, ведущих к денатурации активных компонентов целевого продукта,Замороженное сырье (500 г) дважды пропускают через мясорубку, Измельченную массу смешивают с 0,9 М водной уксусной кислотой (300 мл) соотношение сырье раствор 5:3, гомогенизируют в течение 5 мин при 8000 об/мин. Смесь выдерживают 1 ч при 8 С при интенсивном перем. .ивании. Полученную смесь центрифугируют 15 мин при 3500 об/мин при 0 С, осадок удаляют, а к надосадочной жидкости добавляют 0,10 М водный раствор аммиака до рН 7,0. Полученную смесь выдерживают 10 ч при перемешивании при 8 С, а затем фильтруют через бумажный фильтр при той же температуре. Полученный раствор лиофильно высушивают и получают 16,25 г активного вещества (32,5 г в пересчете на 1 кг сырья).П р и м е р 2, Замороженное сырье (330 г) дважды пропускают через мясорубку. Измельченную массу смешивают с равным Способ получения вестибулопротектора из животного сырья путем гомогенизации сырья, экстракции и отделения осадка, отличающийся тем, что, с целью повышения вестибулопротекторной активности, повышения выхода продукта и упрощения способа, в качестве сырья используют количеством 1,1 М водного раствора уксусной кислоты (330 мл) (соотношение сырье раствор = 5:5), гомогенизируют в течение 5 мин при 8000 об/мин в течение 15 мин при 0 С. Осадок удаляют, а к надосадоч ной жидкости добавляют 0,15 М водный раствор аммиака до рН 7,0. Полученный раствор выдерживают 10 ч при перемешивании при 8 С, а затем фильтруют через бумажный фильтр при той же температуре, После этого раствор лиофилизуют. Получают 11,2 г активного препарата (33,6 г в пересчете на 1 кг сырья).П р и м е р 3. Замороженное сырье (330 г) дважды пропускают через мясорубку. Измельченную массу смешивают с 1,0 М водной уксусной кислотой (соотношение сырье - раствор кислоты 5:4) (220 мл), гомогенизируют в течение 5 мин при 8000 об/мин при 0 С в течение 15 мин. Осадок удаляют, надосадочную жидкость смешивают с 0,13 М водным раствором аммиака до достижения рН 7,0. Полученный раствор выдерживают 10 ч при перемешивании при 8 С, а затем фильтруют через бумажный фильтр. После этого раствор лиофилизируют. Получают 11,5 г активного препарата (34,5 г в пересчете на 1 кг сырья).При внутрибрюшинном введении подопытным животным (кошки-самцы, и = 5) в дозе 0,7 мг/кг вестибулопротекторная активность вещества-прототипа оказалась равна 4,0 + 2,1 балла, тогда как активность предлагаемого вещества равна 1,0 + 0,5 балла. Таким образом, при одинаковом способе введения и в соизмеримых дозах препарат, полученный по заявляемому способу, обладает большей вестибулопротекторной активностью, чем вещество-прототип,Способ прост в осуществлении, состоит из четырех стадий и позволяет сократить время проведения процесса с 60-72 ч (в прототипе) до 14 ч,селезенку осетровых рыб, гомогенизацию проводят в 0,9 - 1,1 М водном растворе уксусной кислоты при соотношении сырья и раствора 5: 3 - 5: 5 и после отделения осадка раствор нейтрализуют 0,10 - 0,15 М водным аммиаком и лиофильно высушивают.