Способ диагностики недостаточности лютеиновой фазы

,О 00 ГОСУДАРСТВЕ+ЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Ивановский научно-исследовательскийинститут материнства и детства и 2-й Московский государственный медицинский институт им. Н.И.Пирогова(57) Изобретение относится к медицине, аименно к гинекологии, и может быть использовано для диагностики недостаточности Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, может быть использовано для диагностики недостаточности лютеиновой фазы (НЛФ) у женщин при об. следовании их в связи с нарушениями менструальной функции, невынашиванием беременности или бесплодием.Цель изобретения - упрбщение и снижение травматичности способа за счет определения а -2 микроглобулина в менструальной крови женщин.Способ осуществляют следующим образом.Собранная на второй день менструального цикла менструальная кровь в чистый стеклянный флакон в количестве не менее 15 капель самой обследуемой девушкой или., .Я 2 1659859 А 1 лютеиновой фазы (НЛФ) у женщин при об- следовании их в связи с нарушениями менструальной функции, невынашиванием беременности или бесплодием. Целью изобретения является упрощение и снижение травматичности способа, Цель изобретения достигается за счет того, что проводят.определение амикроглобулина в менструальной крови женщин. При значении этого показателя менее 16 мкг/мл диагностируют НЛФ, Способ позволяет ускорить диагностическую процедуру с 7 дней по способу- прототипу до 1 сут, является более простым в выполнении, Способ не является травматичным, так как основан на анализе легкодоступного материала - менструальной крови, которую может собрать сама женщина, в связи с чем не имеет ограничений и противопоказаний для применения. женщиной в домашних условиях хранится до проведения исследования в обычной морозильной камере при температуре ниже 00, При проведении анализа менструальную кровь раэмораживают при комнатной температуре. Пять капель менструальной крови последовательно разводят дистиллированной водой в лунках полиэтиленовой матрицы соответственно 1:1, 1:2, 1:4, 1:8, 1;16,1:32, 1:64.Реакцию проводятна обезжиренных предметных стеклах, залитых расплавленным 1-ным раствором агара типа "Дифко" с 2-ным раствором поваренной соли в количестве 5 мл. При эастывании агара в нем пробивают лунки специальным стандартным штампом "семерка". Агар иэ лунок уда 16598595 10 20 25 30 35 40 50 ляют тонкой иглой. В центральную лунку с помощью пастеровской пипетки заливают антисыворотку против ПАМГ, в две противолежащие - раствор стандартного антигена, а в оставшиеся четыре - исследуемую менструальную кровь в разных разведениях,Стекла помещают в чашки Петри с влажной средой, Иммунопроявление длится 18 - 24 ч,Результаты читаются на следующий день в проходящем свете. Учитывается последний подгиб линии преципитации возле лунки с соответствующим разведением исследуемой крови, Это разведение менструальной крови умножается на чувствительность метода 2 мкг/мл. Таким образом, получают полуколичественную оценку результата, Полученный уровень ПАМГсравнивают с показателем ПАМГу женщин с нормальной функцией желтого тела. При снижении ПАМГниже 16 мкг/мл диагностируют НЛФ, При уровне ПАМГ16 мкгlмл и выше определяк)т полноценную лютеиновую фазу.П р и м е р 1. Супружеская пара В. В браке 5 лет, первичное бесплодие. Причин бесплодия со стороны жены не выявлено. При метросальпингографии полость матки с четкими Контурами, маточные трубы проходимы, По данным УЗИ - матка и придатки без особенностей. Менструальный цикл правильный, 28-дневный, нарушений менструальной функции не было, Обследование гормональной функции яичников патологии не выявило: ректальная температура типичная двухфазная. Показатели гормонов в сыворотке крови в пределах нормы: эстрадиол на восьмой день цикла - 60 рд/в, прогестерон на 22-й день - 24,8 нд/п 1,В обследуемом цикле произведен ЦУГ эндометрия - гистологический ответ - секреторный зндометрий средней стадии, Во время наступившей по окончании гормонального обследования менструации, на второй ее день была собрана менструальная кровь на исследование ПАМГ, Содержание ПАМГв менструальной крови составило 16 мкг/мл, принято за норму. Сделан вывод о полноценной лютеиновой фазе цикла. Обследование мужа показало, что причиной бесплодного брака служит патология спермы.П р и м е р 2. Пациентка Б 23 лет, обследуется в связи с рождением детей с грубыми врожденными пороками развития, Менструальный цикл 30-дневный, нарушений не было, Гинекологических заболеваний в анамнезе нет. График ректальной температуры за 3 месяца свидетельствует об умеренно выраженной НЛФ, Уровень прогестерона в крови на 22-й день цикла снижен до 4,1 нд/щ. При биопсии эндометрия обнаружена неполноценная стадия секреции, При обследовании предлагаемым способом обнаружено сниженное до 12 мкг/мл содержание ПАМГв менструальной крови. Дано заключение о НЛФ у женшины, назначено лечение,П ри ме р 3. Больная Б.,31 года,обследуется в связи с первичным бесплодием в течение 4 лет. Менструация через 29-32 дня, по 4 дня, умеренная, безболезненная,бывают задержки на 2 - 3 дня. По данным ректальной температуры имеет место выраженная лютеиновая недостаточность. Содержание эстрадиола на восьмой день цикла составило 25 рд/гпту, прогестерона на 22-й 0,06 нд/щ 1; Гистологическое исследование эндометрия дало заключение о секреторном эндометрии поздней фазы. ПАМГменструальной крови значительно снижен -до 8 мкг/мл. Сделано заключение о гипофункции яичников с преимущественной недостаточностью лютеиновой фазы,Использование предлагаемого способа диагностики НЛФ является более простым в выполнении и экономичным, не требует наличия специальной лаборатории, а также штата персонала (выполняется одним лаборантом); позволяет ускорить диагностическую процедуру с 7 дней по способу-прототипу до 1 суток, т.е, в 7 раз быстрее; является физиологическим для обследуемых, поскольку основан на анализе легкодоступного материала - менструальной крови, которую может собрать сама женщина, в связи с чем не имеет противопоказаний и ограничений для использования и совершенно безвреден для здоровья обследуемых, Может применяться в детской гинекологии при обследовании функции яичников у девочек в периоде их полового созревания, у больных с различной соматической патологией, при инфекционных процессах и пр позволяет осуществлять контроль функции желтого тела ежемесячно и постоянно, оценивать эффективность проводимого лечения. Ф о рмула и зоб ре те н и я Способ диагностики недостаточности лютеиновой фазы путем исследования биологического материала, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью упрощения и снижения травматичности способа, определяют плацентарный а -2 микроглобулин в менструальной крови женщин и при значении этого показателя менее 16 мкг/мл диагностируют недостаточность л ютеиновой фазы.