152546

" ".го-.г; о;нб зв .д ИСАНИНА ИЗОБР 1-Т АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕПЬС Подписная группа13 С. М. Семенов и Т. И, С ева ДЕЛЕН ИОВ 1 ДЛЯ О НТИБИО АТЕЛЪНЪЕ СР АКТИВНОСТ Заявлено 31 января 1962 г. за762177/31-16тет но делам изобретений и открытий лри Совете Министров ССОлубликовано в Бюллетене изобретений1 за 1963 г. по и тиче Известны бактериологические питательные среды, содержащие триптический перевар белков, в том числе и казеин. Известно, что триптический перевар из казеина готовят по принципу триптических пере- варов, применяя соотношения, принятые при изготовлении переваров из мясо-костной и рыбо-костной муки.Предлагаемые питательные среды для определения активности антибиотиков значительно снижают себестоимость исследований. Это достигается тем, что в их состав входит в качестве питательной основы гидролизат казеина.Сущность приготовления питательных сред редлагаемому способу состоит в замене дорогостоящих панкреа ских гидролнзатов мяса одним гидролизатом казеина,Приготовление гидролизатов казеина технологически удобнее, значительно проще и требует меньшей затраты рабочей силы и времени, чем приготовление гидролизатов мяса, Среды, содержащие в качестве питательной основы один гидролизат казеина используют для контроля активности антибиотиков стрептомицина, олеандомицина, новобиоцина, биомицина, полимиксина, эритромицина, фумагиллина и др, Для контроля активности каждого антибиотика подбира 1 от оптимальный режим ферментации казеина, а также оптимальный состав среды для обеспечения диффузии растворов антибиотика, получения четких ,зон и плотного микробного газона.Для приготовления гидролизатов казеина один килограмм пищевого казеина заливают 10 л дистиллированной воды (температура воды 40), в которой раствооено 100 г химически чистой МаСОз.Хв 152546Казеин тщательно перемешивают с водой в течение 1 часа, добавляют 300 г фарша поджелудочной железы крупного рогатого скота и 0,5% к объему хлороформа, Гидролиз ведут в термостате при 37 в течение 16 дней, при ежедневном перемешивании, при поддержании рН 7,4 - 7,6. Затем гидролизат казеина переносят в холодильник при 5,8 на 48 часов. Отстоявшуюся верхнюю часть гидролизата осторожно декантируют, фильтруют через бумажный фильтр, Осадок фильтруют отдельно через марлю, а затем через бумажный фильтр. Обе порции фильтрата сливают вместе, добавляют 1% к объему концентрированной соляной кислоты и около 1 л дистиллированной воды, кипятят в течение 1 часа, фильтруют и рН доводят 20 о,ИаОН до 7,3. Готовьш гидролизат охлаждают, добавляют 1% к объему хлороформа и хранят в холодильнике при температуре 5, 7. Оптимальной средой для контроля активности стрептомицина и эритромицина служит 1,5% агар, содержащий 33 мг% аминного азота гидролизата казеина, рН 7,8 - 8,0. Для биомицина и олеандомицина рекомендуется использовать среду, содержащую 1,5% агара, 135 иг% аминного азота гидролизата казеина, рН 7,8 - 8,0. Для контроля активности новобиоцина и полимиксина добен 1,5% агар, содержащий 50 мг% аминного азота гидролизата казеина и 2,5% КНвР 04, рН 6,0 - 6,2, Для определения активности фумагиллина используют среду, содержащую 1,6% агара, 200 мг% аминного азота гидролизата казеина, рН 6,4 - б,б. Подкисление среды при ее изготовлении производят ледяной уксусной кислотой.Оптимальные питательные среды для контроля активности отдельных антибиотиков можно получить путем подбора.Предмет изобретенияПитательные среды для определения активности антибиотиков, о тл и ч а ю щ и е с я тем, что, с целью их удешевления, они содержат в качестве питательной основы гидролизат казеина.Составитель С. В, ПыжевРедактор А. К. Лейкина Техред А, А. Камышникова Корректор Ю. М. федуловаПодп. к печ. 20/1 - 68 г. Формат бум. 70 Х 108/6Объем 0,18 изд. л,Зек. 41/7 Тираж 425 Цена 4 коп. ЦБТИ при Комитете по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР Москва, Центр, М, Черкасский пер., д, 2/б. Типография, пр. Сапунова, 2.