Способ определения четвертичных алкалоидов

СО 1 ОЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 1 35 78 И Е ИЗОБРЕТЕСВИДЕТЕЛЬСТВУ АВТОРСКОМУ гирования органическими раство из водных экстрактов раститель териала в присутствии против с последующим спектрофотометрир отличающийся тем, что, с целью ного определения четвертичных бен тридиновых и протобербериновых дов, в качестве органического раст используют хлороформ, в качестве аниона используют трнхлорацетат п вом соотношении трихлоруксусная .растительный материал не менее дополнительно обрабатывают окисью алюминия при массовом шенин с растительным материалом цга К. О. Аззау овроцпй 1 п час 1-ануе гпейод. -8, 1328 - 1331. ДЕЛЕНИЯ ЧЕТОВ путем экстраСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИИ(71) Ордена Ленина институт биохимим. А. Н. Баха(56) СЬа 11 ец 1 6., 01 сато с(ца 1 егпагу апппопьцгп сг 1 оцз дозаде богаз Ьу ас 1(54) (57) СПОСОБ ОПРЕВЕ РТИЧНЫХ АЛКАЛОИД,ЯО 1161115 рителями ного маоанионов ованием, раздель- зофенан- алкалоиворителя противори массо- кислота: 1:200 и экстрактсоотно:1.1161115 1 О го Составитель Н, Гуляева Техред И. Верес Корректор М. Самборская Тираж 722 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4Редактор Н. ШвыдкаяЗаказ 3879/9 Изобретение относится к фармацевтической химии и биохимии вторичных природных соединений, ,в частности к исследованию и анализу алкалоидов, и может найти применение в биохимии и физиологии растений, лекарственном растениеводстве, а также при контроле качества лекарственных препаратов, изготовляемых на основе алкалоидов.Целью изобретения является раздельное определение четвертичных бензофенантридиновых и протобербериновых алкалоидов. Пример. Точную навеску (1 г) измельченного сухого растительного материала помешают в коническую колбу на 50 - 100 мл, смачивают 2 мл 25 Я-ного раствора аммиака, закрывают пробкой и выдерживают в течение 15 - 30 мин. Затем добавляют 25 мл хлороформа. перемешивают и оставляют на 16 - 17 ч при комнатной температуре. Полученный экстракт отфильтровывают через стеклянный фильтр1 и 15 мл фильтрата испаряют досуха на водяной бане под вакуумом. Сухой остаток растворяют в 1 мл хлороформа, прибавляют 10 мл ЗЯ-ного водного, раствора уксусной кислоты и встряхивают в течение 3 - 5 мин. Полученную эмульсию центрифугируют до полного расслоения в течение 5 - 10 мин при 5000 - 10000 об/мин.К 4 мл верхнего слоя центрифугата прибавляют 0,5 мл 5 Я-ного водного раствора трихлоруксусной кислоты и экстрагируют 2 Х 5 мл хлороформ а. Полученные хлороформные экстракты по мере их получения в течение 2 - 3 мин при перемешивании фильтруют при отсасывани и. Осадок на фильтре, дополнительно промывают 5 мл хлороформа. Объединенные фильтраты подкисляют 1 каплей концентрированной НС и растворитель отгоняют досуха на водяной бане. Сухой остаток количественно растворяют в 10 мл ЗЯ-ного водного раствора уксусной кислоты при нагревании в течение 1 - 2 мин на водяной бане, затем раствор охлаждают до комнатной температуры и спектрофотометрируют при л,чакс 430 нм (бензофенантридины) в кювете 3=10 мм. В качестве раствора сравнения используют водный раствор уксусной кислоты.Осадок на фильтре дополнительно экстрагируют 2 К 4 мл этанола и фильтруют при отсасывании. Объем фильтрата доводят ло 10 мл и спектрофотометрируют при 430 нм (протоберберины) в кювете1=10 мм. В качестве раствора сравненияиспользуют этанол.Расчет результатов определения проводятпо формулеСк. Ро ЧУ.зЧ 4 1, 104 1 00Х=Р-;-Д- - , Ст - . г - , - 0 ВО 0 4 где Ч - залито хлороформа для экстракции, мл;Чг - объем хлороформного экстракта,взятого для испарения, мл;Чз - объем спектрофотометрируемогораствора, мл;У 4 - объем уксуснокислого водного 15раствора очищенной суммы алкалоидов, мл;% - объем водного раствора сум мыалкалоидов, взятых для определения, мл;Н - навеска растительного материала, г;В - потеря в массе сырья при высушивании при 105, Я;Ск - концентрация стандартного раствора, мкг/мл;Эк - среднее значение оптической плотности стандартного раствора;т)о - среднее значение оптической плотности опытного раствора.Стандартный раствор четвертичных бензофенантридинов, состоящий из смеси сангвинарина и хелеритрина в соотношении 1:1,который готовится заранее из чистых препаратов алкалоидов, содержит вещества10 мкг/мл и имеет оптическую плотность 0,15. Оптическая плотность опытногораствора, содержащего бензофена нтридины, 35равна 0,17, Потея в массе сырья привысушивании составляет 1 ОЯ.Подставляя значения в формулу, полу- чаем Х - 10 0 - 17 - 25 101 О 1 - 104 100 1 0 15 15 4 100001100 - ГО) 40Таким образом, содержание четвертичныхбензофенантридиновых алкалоидов в данномобразце сырья составляет 0,058%,45 Предлагаемый способ позволяет селективно определять четвертичные бензофенантридины и протоберберины в растительном материале с хорошей точностью и достоверностью.