Способ идентификации стерина
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
1097952 10 Составитель Н,ВалееваРедактор Н.Горват Техред А.вабинец Корректор И.Эрдейи Заказ 4201/38 Тираж 823 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д.4/5Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная,4 Изобретение относитя к биофизике и к биохимии липидов и может быть использовано в медицине, в частности в исследованиях липидного обмена.Известен способ идентификации стерина, включающий ввод пробы5 исследуемого вещества, хроматографирование и регистрацию сигнала плазменноионизационным детектором(1.Однако известный способ характеризуется высокой трудоемкостью.Целью изобретения является упрощение способа.Поставленная цель достигается тем, что согласно способу идентификации стерина к исследуемому стерину добавляют фосфолипиды и углеводородный растворитель, формируют из полученного раствора бислойнуюмембрану, вводят в окружающий мембрану солевой раствор полиеновый антибиотик до появления дискретных уровней проводимости мембраны и по их величине идентифицируют стерин.Способ осуществляют следующим образом.Готовят раствор в гептане 20 мг фосфолипидов и исследуемого вещест-ва в углеводородном растворителе. Сформировывают мембрану в растворе 2 М КС 1 рН 6 при 22 С. Дискретные уровни проводимости измеряют электрометрическим усилителем постоянного тока У 5 9 при 200 мв на мембране. Регистрируют проводимость на самописце НЗОО.В солевой раствор вводят полиено вый антибиотик, например амфотерицин В до появления дискретных уровней проводимости мембраны и по величине проводимости идентифицируют стерин. 40П р и м е р 1. Идентификация холестерина и зргостерина. Готовят растворы в гептане 20 мг фосфолипидов +1 мг холестерина/мл и 20 мг фосфолипидов +1 мг эргостерина/мп. Сформировывают мембрану в растворе 2 М КС 1, рН 6 при 22 С. Дискретные уровни проводимости измеряют злйктрометрическим усилителем постоянного тока У 5-9 при 200 мв на мембране. Регистрируют проводимость на самописце Н 306. Вводят в солевой раствор амфотерицин В. В случае холестерина наблюдают устойчивую работу 1 ионного канала (1 - уровень проводимости) при 2 10 М амфотерицина В. В случае зргостерина - при 5 10 М. Проводимости каналов равны соответственно (6,5+0,5)ф 101 Ом фи (3,5+0,5) 10 ОмП р и м е р 2, Идентификация 5 Х андростак ЗД ОН и стигмастерина. Проводимость каналов определяют при тех же условиях, при соотношении фосфолипид/холестерин 20:4. Каналы получены при 10 М и 510 М амфотерицина В и имеют проводимость ( 7+0,5 )10 Ом и (5+0,5 )"10 Ом соответственно.Таким образом, предлагаемый способ обладает значительными преимуществами в сравнении с прототипом.П р и м е р 3. При идентификации стеринов неизвестной структуры определяют дискретные уровни проводимости мембран (ионные каналы)в присутствии амфотерицина В в мембранах, содержащих стерин, выделенный из различных штаммов дрожжей СапсПаа аЬЪсапя. ВыдЕляют стерины из чувствительного штамма и из резис-. тентного штамма. При этом установлено, что определяемые каналы имеют различную проводимость и совершают обратимые переходы между проводящим и непроводящим состояниями. Для характеристики канала вводят также среднее время жизни его в том или другом состоянии. Эта величина может служить дополнительным признаком идентификации.Ичпользование предлагаемого способа в практике позволяет упростить процесс идентификации стеринов, так как не требует для своего осуществления сложных операций и дорогостоящего оборудования.
СмотретьЗаявка
3391756, 02.06.1982
НАУЧНЫЙ ЦЕНТР БИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ АН АЗССР
КАСУМОВ ХАЛИЛ МАМЕД ОГЛЫ, МАЛАФРИЕВ ОЛЕГ КОНСТАНТИНОВИЧ, САМЕДОВА АРИФА АЛИ ГАСАН
МПК / Метки
МПК: G01N 33/48
Метки: идентификации, стерина
Опубликовано: 15.06.1984
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1097952-sposob-identifikacii-sterina.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ идентификации стерина</a>
Предыдущий патент: Способ определения концентрации гемоглобина
Следующий патент: Способ определения содержания карбоновых кислот и низших спиртов
Случайный патент: Состав для покрытия