Средство для изучения состояния иммунной системы на экспериментальных моделях

. Сергеев и на Ленина И а чей и Мо й институт Мечникова нститут ковский вакцин цг с 1 е 43-254. заявке(Ь ОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТ СССРО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ ТОРСМОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(54) СРЕДСТВО ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ СОСТОЯНИЯ ИММУННОЙ СИСТЕМЪ 1 НЛ ЭКСПЕРИМЕНТЛ;1 ЪНЫХ МОДЕЛЯХ (57) Применение тритерпеновы гликозидов в качестве средства для изучения состояния иммунной системы на эксперимента л ьн ьл .", одел я .Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использованодля изучения состояния иммунной системына экспериментальных моделях.Известно применение комплекса сапонинов, выделенного из коры дерева с,)п 1 а)а варопага МО 1 пе в качестве адъюванта при вакцинации крупного рогатого скотапротив ящура 1,Однако препарату свойственны высокаятоксичность и нежелательное побочное действие (пирогенный и гемолитический эффекты). Кроме того, источник получениякомплекса малодоступен,Известно также применение тритерпеновых гликозидов, полученных из животногосырья, в качестве средства, облада 5 ощего 15цитостатическим действием 2,Целью изобретения является увеличениеиммуностимулирук)щей активности и уменьшение нежелательного побочного действияпрепаратов, предназначенных для изучен20ния состояния иммуннои системы на экспериментальных моделях.Эта цель достигается применением триГерпеновых гликозидов в качестве средствадля изучения состояния иммуной системы наэкс пери ме итал ьных м одел ях. 25Комплекс тритерпеновых гликозидовпредставляет собой бесцветное или слегкажелтоватое кристаллическое вещество ст.пл. 223-226 С, б 21-67" (вода; с 0,6),хорошо растворимое в воде, теплом (45-50 С)метаноле и пиридине, кипящем 90"/а-ном З 0этаноле. ИК-спектр (КВг, 0 а, см.1 ): 3440,2922, 2878, 1742, 1455, 1379, 1266, 1213,1159, 1071, 1047, 987, 941, 892. Доминирующий компонент комплекса (65/, от общеймассы смес) при тонкослойной хроматограф 1 на силкагеле 60 (фирма Мегс(, ФРГ,Агт Гм 5715) имеет Ю 0,4 и 0,5 в системах:н-бутанол, насыщенный водой, - мстанол(5:1) и изопропанолводаконцентрированный водный аммиак 17:2:1) соответственно,Комплекс полуа)от из кожном ышечногомешка дальневосточной морской кубышкиС,с)сБгпдга 1 аропса, который измельчают,лиофильно высушивают, дважды экстрагируют пиридином, экстрагированные вещества распределяют в двухфазной системе, 4образующейся при встряхивании смеси хлороформ - метанол - вода (10:5:3, указывается об ьемное соотношение растворителей), верхнюю фазу упаривают, из остаткаметанолом извлекают сырые гликозиды,последние очищают перекристаллизациейиз метанола, Очишенный комплекс тритерпеновых гликозидов представляет собойсмесь семи гликозидов, свободную от ор 1066602ганических веществ иной природы и содержащую не более 2% неорганических солей.Состав комплекса сохраняется постоянным и не зависит от масштабов его производства и времени сбора сырья.Применяют средство в качествс иммуностимулятора на экспериментальной модели сальмонеллеза, вызываемого Яапопе)а 1 ур(т 1 пшг цсп.Мышам-гибридам первого поколенияГ 1 (СВАХ С 57 В.6) подкожно вводят комплексный антиген (вакцину) ЬаГпопе)а 1 ур пшгПтп, получаемый в результате обработки живой культуры клеток гидроксиламином. Одновременно внутрибрюшинно вводят комплекс, тритерпеновых гликозидов.На 13-й день всех животных заражают вы соковирулентной культурой Ьа)гпг)пс)1;а )р 1 ГппгИ 1 п штамм "/а 415 в Дозе 10 микрооных клеток на мышь. Чисзо погибших животных отмечают в течение 30 дн. В группе невакцинированных животных наблодается 00%-ня гибель. В группах мы и 1, ко торым было введено 20, 2,Г 1 0,2, гп вак.цины на животное, выживаем(н ть со,тавляет соответственно 100, 50-60 и 20-30", У животных, которым, кроме ваки; ы 10,2 мкг на мышь), вводят комплекс тритериеновых гликозидов в дозах 0,04 40 )кг 1;а мышь, наблюдается 00,5)-на ыжв;и. - мость. Такой же рсзул ьта. абак)да от в группах животных, которы,",: 5 но,) ТО.)ь; О комп;екс тритерпеновыхл.:к;)з)5,О, н .Озе 40 мкг на мышь.ТрТЕр ПЕНОВЫЕ 1 гя И 5(ОЗ 5.51,:,+:. ЬОНОГОпроисхО)кден 5 ОГ)падают 01 с"Глн, 51(ОГж - женным ихМчОстиму.Нрх Оп 15:;1 с ,тз 1 с.;.За счет повышения зффекгивнст)5 с):.-:,ства иЗотективная доза на 1(ц 1 ы х м(ньи)аогс) в 100 раз, в рсзульта Ге чс)о рсзко,)гран 1- вается возможность се побочно)г действ);и при сохранении и 5 Му)оген:Ос-,и; в .00 и более раз сокрасается 1т)ео 1 с ь в вакцине для ласюраторных;пьг:иний (иаир- мер л.я получения Гиперим и у 1 Иых с;(во )О.ТОК) - ВСЕ ЭТО В КОНЕЧНОМ 1 ТОС 1 Р 1 О,1 И 1 К значительному снижению расходов;а 1 роизводство вакцины. Отсутствие токси 1 и.:сти и нежелательного побочного д йстви ) д- НОГО срс.дства в активных кои цстра,5 х дает возможность проводи; ь ил 1 е".ьные экспе 1)именть, а также испо),ьзовать1,О- кий диапазон методов оценки состо 5 И) я и:.5- мунной системы живот:.1 ых на экс:Сгис: .ТаЛ ЬНЫХ ИНфЕНКЦИОН НЫХ МОДСГ ЯХ.гетс Л- ность сырья и простота получен предлагаемого средства значи Тельно д)евг 1 ют его по сравнению с извес Гным средством, а также другими препаратами тог 5) же назначения.ВНИИПИ Заказ 10725/7 Тираж б 93 11 одпиеное Филиал ППП Патент, г. Ужгород. ул. Проектная, 4