Способ моделирования геморрагического инсульта

(51)5 0 0 28 ТЕН ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ИСА ИЕ ИЗОБР ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Институт высшей нервной деятельностии нейрофизиологии АН СССР(56) Легнер Э,Н. и Бибелейшвили Ш.И. Электрическая активность головного мозга приэкспериментальной модели геморрагического инсульта. Электрофизиология нервной системы, Издательство Ростовскогоуниверситета, 1963, с, 226 - 228.(54) СПОСОБ МОДЕЛИРО РАГИЧЕСКОГО ИНСУЛЬТА Изобретение относится к экспериментальной медицине.Известны способы моделирования геморрагического инсульта путем звукового воздействия, введения крови в различные структуры мозга,Наиболее близким решением по цели к заявляемому является способ моделирования геморрагического инсульта путем введения 1,2 - 1,5 мл аутокрови животного, смешанной с 0,2 мл гепарина, под давлением 120 - 150 мм рт.ст. во внутреннюю капсулу одного из полушарий мозга через иглу, вживленную по стереотаксическим координатам.Однако известный способ имеет следующие недостатки; высокая летальность (8000) в ранние сроки из-за прорыва крови в желудочки или нарастающей компрессии при повреждении близлежащих крупных сосудов большим количеством иньецируемой(57) Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано в изучении патофизиологии геморрагического инсульта, а также для экспериментальной фармакотерапии, Способ позволяет повысить воспроизводимость модели. Для этого в мозг по стереотаксическим координатам билатерально аживают полые иглы, в которые вводят изогнутые мандрены и 4 - 6 вращательными движениями разрушают ткань мозга и проходящие в ней сосуды, после чего в образовавшиеся очаги деструкции и микрокровоизлияний вводят 0,2 - 0,3 мл аутокрови животного, а через 2 - 3 мин в инсультные очаги дополнительно вводят 0,1-0,2 мл крови, 19 ил,крови, что не удовлетворяет требзваниям хронического эксперимента, Неопределенность поражения структур мозга вследствие присоединения общемозговых симптомов, возникающих при ретроградном проникновении избытка крови вдоль иглы под мозговые оболочки, что неприемлемо в экспериментальной невропатолдгйи, Возникновение гемсррагий, нежелательных в эксперименте, из-за гепаринизации крови. Невысокая надежность способа при погрешностях в технике моделирования монолатеральных кровоизлияний.Целью изобретения является повышение воспроизводимости модели,Поставленная цель достигается тем, чтоживотному предварительно разрушают участок мозга и последовательно с интэрвалом 2 - 3 минуты вводят эутокровь в количестве соответственно 0,2-0,3 и 0,1 - 0,2 мл, разру1767518 25 30 40 50 Составитель Н.Косыцин Редактор С,Кулакова Техред М.Моргентал Корректор З.Салко Заказ 3550 ,Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, "01Ушение участка мозга производят вращающими движениями изогнутого мандрена.Сопоставительный анализ заявляемого решения с прототипом показывает, что впервые двухстронний геморрагический инсульт моделируется путем предварительного механического. разрушения локальных кровеносных сосудов 4 - 6 вращательными движениями мандренов, введенных в билатерально вживленные иглы с последующим через 3-4 мин введением 0,2 - 0,3 мл и через 2 - 3 мин 0,1 - 0,2 мл аутокрови животного,5 10 Таким образом, заявляемый способ соответствует критерию "новизна".15Известны случаи моделирования двухстроннего геморрагического инсульта звуковым воздействием, Однако предлагаемыйспособ отличается от известного тем, чтовпервые двухсторонний геморрагическийинсульт моделируется путем предварительного разрушения ткани и сосудов мозга вращением мандренов, проведенных черезстереотаксически вживленные иглы с последующими - через 3 - 4 мин и через 1 - 2 мининъекциями аутокрови животного по 0,2 - 0,3 мл25и 0,1 - 0,2 мл соответственно.Это позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого способа "критерию" "существенные отличия",П р и м е р 1. Кошка массой 3,2 кг, самец, 30анестезирована гексеналом 160 мг внутрибрюшинно. Голова животного фиксированав стереотаксическом аппарате. Скальпелем произведен разрез мягких тканей головы в сагиттальном направлении, По 35передней и латеральной координатам АР2,5,7,0 найдена точка, в которой бормашиной просверлено отверстие, Через негов правое полушарие мозга введена полаяигла на глубину Н 18,0 мм, что соответствует расположению внутренней капсулы.Игла фиксирована протакрилом в колодке,закрепленной на своде черепа, Записанафоновая электрокортикограмма (Фото 1),ведущей в которой была альфа - активность,Частота дыхания 25 в мин, пульс 195 уд. вмин,, Во всех случаях проводилась записьЭКОГ сенсорной зоны коры головного мозга.50Шприцем с 0,2 мл гепарина взято 1,5 млвенозной крови животного и введено черезиглу,вживленную во внутреннюю капсулу,под давлением 120 мм рт,ст,:Контролемдавления служили показания манометра,подсоединенного через тройник, У животного возникли кратковременные судороги,На электрокортикограмме - резкое угнетение активности (Фото 2), Частота дыхания16 в мин, пульс 181 в мин,Через 1 ч - прогрессивное снижениечастоты дыхания до 8 в мин, пульса до 119 вмин, депрессия биоэлектрической активности мозга ( Фото 3).Смерть через 1,5 после инсульта.На срезе макропрепарата мозга - массивное кровоизлияние в правую гемосферумозга с проникновением крови в желудочек.(Фото 4).П р и м е р 2. Кошка массой 3,1 кг, самец,анестезирована гексеналом 155 мг внутрибрюшинно. Голова животного фиксированав стереотаксическом аппарате, Скальпелемпроизведен разрез мягких тканей головы всагиттальном направлении. По передней илатеральной координатам АР 2,5,7,0 справа и слева найдены точки, в которых бормашиной просверлены отверстия, Через нихбилатерально введены полые иглы на глубину Н 16,0 мм, Иглы фиксированы протакрилом в колодке, закрепленной на сводечерепа, Записана фоновая электрокортикограмма (Фото 5), в которой доминируютальфа и тета-активность. Частота дыхания22 в мин, пульс 158 в мин,Во вживленные иглы введены изогнутые мандрены, выступающие над срезом иглы на 2-2,5 мм (Рис. 1) и 4 вращательнымидвижениями разрушены участки внутренних капсул мозга и проходящие в них сосуды. Через 3 мин мандрены удалены. Наэлектрокортикограмме - отсутствие выраженных изменений (Фото 6), Частота дыхания 20 в мин, пульс 146 в мин. В течениепоследующих 3 часов состояние без динамики,На следующие сутки - животное адинамично, слабо реагирует на покалываниеиглой. Походка шаткая, Снижена бета-активность электрокортиграммы (Фото 7), Частота дыхания 22 в мин, пульс 182 в мин, Втечение 7 дней состояние животного стабализировал ось, нормализовалась чувствительность и двигательная активность,Животное выведено из эксперимента,При макроскопическом исследовании мозга- двухсторонние точечные кровоизлияния,мелкие очаги деструкции в области внутренних капсул (Фото 8),П р и м е р 3, Кошка массой 3,3 кг, самец,анестезирована гексеналом 165 мг внутрибрюшинно, Голова животного фиксированав стереотаксическом аппарате. Скальпелемпроизведен разрез мягких тканей головы всагиттальном направлении. По передней илатеральной координатам А Р 2,5,7,0справа и слева найдены точки, в которыхбормашиной просверлены отверстия, Черезних билатерально введены полые иглы наглубину Н 16,0 мм. Иглы фиксированы протакрилом в колодке, ззрепленной на сводечерепа. Записана фоновая электрокортикограмма (Фото 9), ведущей в которой является альфа - активность. Частота дыхания 20в мин, пульс 159 в мин.В иглы введены изогнутые мандрены 5(Рис, 1) и 5 вращательными движениямиразрушены участки внутренних капсул мозга и проходящие в них сосуды. Через 3 минмандрены удалены и через иглы в правый илевый очаги деструкции введено по 0,3 мл 10крови животного. На электрокортикограмме - десинхронизация бета- и тета-ритмов(Фото 10), Частота дыхания 16 в мин, пульс146 в мин. Через 1 ч - резкое снижениебета-активности, менее выраженное снижение амплитуды альфа-ритмов (Фото 11). Частоты дыхания и пульс без изменений.На следующие сутки - животное адинамично, передвигается с трудом, сниженачувствительность по типу тетраанестезии.На электрокортикограмме - увеличение амплитуды бета- и тета- ритмов (Фото 12),Нормализация состояния в течение 10сут.Животное выведено из эксперимента.При изучении макропрепарата мозга; билатеральные очаги кровоизлияний во внутренние капсулы (Фото 13),П ри мер 4, Кошка массой 3,2 кг, самец,анестезирована гексеналом 160 мг внутрибрюшинно, Голова животного фиксирована 30в стереотаксическом аппарате, Скальпелемпроизведен разрез мягких тканей головы всагиттальном направлении, По переднезадней и латеральной координатам АР 2,5,7,0справа и слева найдены точки, в которых 35бормашиной просверлены отверстия. Черезних билатерально введены полые иглы наглубину Н 16,0 мм, Иглы фиксированы протакрилом в колодке, закрепленной на сводечерепа, Записана фоновая электрокортикограмма (Фото 14 ). Частота дыхания 24 вмин, пульс 183 в мин,В иглы введены изогнутые мандрены.(Рис. 1) и 4 вращениями разрушены участкиправой и лерой внутренних капсул мозга и 45проходящие в ней сосуды, Через 3 мин мандрены удалены и через иглы в образовавшиеся очаги деструкции введено по 0,2 млаутокрови животного, Через 1 мин в инсультные очаги дополнительно введено по 0,1 млкрови. На электрокортиокграмме - резкое50угнетение бета-, альфа- и тета-ритмов, десинхронизация их с дельта-ритмом (Фото 15).Пульс аритмичен, 110-140 в мин, частотадыхания 11 в мин, Через 1 ч - восстановление биоэлектрической активности мозга(Фото 16), нормализация дыхания - 19 в мини пульса - 242 в мин,На 1 сутки - у животного тетрапорез, тетраанестезия, вольтаж ритмов электрокортикограммы снижен, по сравнению с предыдущим этапом изменений нет. Частота дыхания 27 в мин, пульс 143 в мин,На 7 сутки - животное самостоятельно передвигается, походка шаткая. Сохраняется нарушение чувствительности по типу тетаанестезии, На электрокортикограмме - активация альфа-и бета -активности (Фото 17).Дыхание и пульс стабилизировать в пределах нормы,На 21 сутки - удовлетворительное восстановление нарушенных функций.Животное выведено их эксперимента. На срезе макропрепарата мозга билатеральные очаги кровоизлияний во внутренние капсулы (Фото 18),П р и м е р 5, Кошка массой 3,4 кг, самец, Методика воспроизведения модели аналогична описанной в примере В 4,но ткань мозга разрушалась 6 вращательными движениями изогнутых мандренов, а количество инъецируемой аутокрови в первое и второе введение составляло 0,3 мл и 0,2 мл соответственно. Реакция сердечно-сосудистого, дыхательных систем, изменения электрокортикографической картины и неврологическая симптоматика не отличалась от описанных в примере М 4.Гибель животного наступила на 5 сутки после инсульта. При макроскопическом исследовании - билатеральные инсультные очаги в области внутренних капсул, мозг отечен (Фото 19).Моделирование геморрагического инсульта заявляемым способом позволяет добиться характерной для кровоизлияния во внутреннюю капсулу мозга неврологической симптоматики, отсрочить гибель животных для удовлетворения требований хронического эксперимента и повысить воспроизводимость способа до 93,3 О,Формула изобретения1. Способ моделирования геморрагического инсульта путем стереотаксического вживления иглы и введения аутокрови, о тлича ю щийся тем,что,сцельюповышения воспроизводимости модели, предварительно разрушают участок мозга и последовательно с интервалом 2-3 мин вводят аутокровь в количестве соответственно 0,2-0,3 и 0,1 - 0,2 мл.2. Способ по п,1, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что разрушение участка мозга производят вращающими движениями изогнутого мандрена,