Штамм гриба entomophthora pyriformis thois 78-2 цмпм-f-183 для изготовления биологического препарата против вредных членистоногих

Штамм гриба Entomophthora pyriformis Thois 78-2 ЦМПМ-F-183 (коллекция ВНИИГенетика) для изготовления биологического препарата против вредных членистоногих.

Изобретение относится к микробиологии, в частности к производству микробиологических средств борьбы с вредными членистоногими.
Энтомофторовые грибы представляют интерес в плане разработки биопрепаратов на основе покоящихся спор.
Многие виды грибов при культивировании на средах образуют недостаточное количество покоящих спор для наработки биопрепарата, при этом споры имеют весьма низкий процент прорастания.
Известен штамм Entomophthora thaxtoriana, используемый для борьбы с тлями и паутинными клещами.
Известен также штамм Entomophthora pyriformis thois изолированный из тли Rhopalasiphum insertum во Франции.
Конидии гриба грушевидной формы с длинной папиллой, многоядерные, размер 15-31 х 12-25 мкм, покоящиеся споры размером 19 2,3 мкм. Гифальные тела в зараженной тле короткие, ветвистые. Гриб легко культивируется на среде из коагулированного яичного желтка с добавлением глюкозного агара Сабуро. Колонии морщинистые вокруг инокулюма, воздушный мицелий белый, слегка пушистый. У старых культур появляются участки желтого цвета, в которых содержится большое количество покоящихся спор.
Однако штамм Entomophthora pyrifomis заражает только один вид сосущих вредителей - тлей. Заражение проводят только отброшенными конидиями, а не покоящимися спорами, которые должны составлять основу биопрепарата. Кроме того, известна продукция пор на вес мицелия гриба, выращенного на среде, и неизвестен процент прорастания покоящихся спор.
Цель изобретения - получение штамма энтомопатогенного гриба Entomophthora pyriformis thois 78-2-патогена сосущих вредителей, поражающего различные виды тлей, паутинного клеща, табачного трипса и обладающего высокой продуктивностью покоящихся спор.
Для достижения указанной цели предлагается штамм Entomophtora pyriformis thois 78-2 ЦМПМ-183 (коллекция ВНИИГенетика) для изготовления биологического препарата против вредных членистоногих.
Предложенный штамм гриба имеет следующие морфологические и физиолого-биохимические признаки. Органическая среда: на коагулированном яичном желтке колонии мелкоскладчатые (мозговидные), толстые, врастающие в среду. Мицелий слабопущенный, мучнистый, белого цвета, рост быстрый. На мальтозном агаре Сабуро мелкие складки вокруг инокулюма, по периферии радиальные складки. Мицелий серовато-белого цвета, слегка опущенный, при старении культуры становится грязно-серого или коричневатого цвета. Рост быстрый, на 4-й день диаметр колоний достигает 5-6 см. На сусле-агаре колонии тонкие, гладкие. Мицелий бесцветный, местами появляются дерновинки белого цвета, слабоопущенные, мучнистые или паутинообразные. Рост быстрый, через 6 дней диаметр колоний достигает 9 см (покрывает всю поверхность среды в чашке Петри). На ломтиках картофеля мицелий мелкоскладчатый (мозговидный), в виде толстой пленки, грязно-серого цвета, матовый, увлажненный, при старении появляются участки коричневатого цвета, рост быстрый. На ломтиках моркови - тонкий гладкий мицелий серого цвета, местами с белыми пушистыми дерновинками. Рост замедленный, диаметр колонии на 6-й день 1,5-2,5 см. Мицелий не септированный, распадается на короткие чуть искривленные гифальные тельца. Конидиеносцы короткие неразветвленные. Конидии грушевидные с сосочком, размер (15-25) х 12 х 25 мкм, многоядерные. Поверхность конидий в сканирующем электронном микроскопе гладкая. Покоящиеся споры стекловидные, сферические, гладкие - а - и-зигоспоры, размером 15-21 мкм.
Поверхность в сканирующем электронном микроскопе мелкобугристая. На питательных средах гриб дает все стадии развития - мицелий, гифальные тела, конидии и покоящиеся споры. Конидии в массе образуются при выращивании гриба на свету, покоящиеся споры - в темноте. В лабораторных испытаниях прорастание покоящихся спор без стимулирующей обработки достигает 48% . Отношение к источникам углерода: усваивает мальтозу, глюкозу, фруктозу, хуже - галактозу, сахарозу, крахмал, гликоген, слабо - арабинозу. Отношение к источникам азота: усваивает соли аммония, хуже - нитраты, хорошо растет на органических источниках азота - веществах, содержащих азот в виде протеидов - пептон, дрожжевой экстракт, сусло и кукурузный экстракт. Желатину разжижает, молоко пептонизирует. Гриб растет в пределах от +8 до +33^оС. Оптимальная температура для роста +22^оС. Оптимальный рН среды 6,8.
Штамм активен против сосущих вредителей - различных видов тлей, паутинных клещей, табачного трипса: вызывает массовое заболевание при заражении покоящихся спорами и конидиями. (56) Циновский Я. П. , Егина К. Я. Использование энтомофторовых грибов в борьбе с тлями. В сб. Патология насекомых и клещей. Рига. Зинате, 1972, с. 73-93.
Theron J. Entomophthora pyriformis sp. Entomophthorales parasite de puceron Entomophaga, 12 (3), 1967, 303-307.