Способ количественного определения компонентов нифулина

Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик ОП ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 958921.074 (088.8) Опубликовано 15.09.82, Бюллетень34Дата опубликования описания 25,0,82 ло делам нзвбретеннй и етнрытий(72) Авторы изобретени арек и К.. В. Колмогоров льскии филиал Всесоюзного научно-иссл фармацевтического института им. Сер 1) Заявител СПОСОБ КО,ЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕ,ЛЕНИ КОМПОНЕНТОВ НИФУ,ЛИНА Изобретение относится к аналитической химии, в частности к способам определения компонентов нифулина, и может быть использовано в химико-фармацевтической промышленности для контроля качества нифулина - препарата, применяемого в ветеринарии как лечебно-профилактическое средство.Известен способ количественного определения активных компонентов нифулина (нитаэола, фуразолидона, хлортетрациклина индивидуального или из биоветина) каждого в отдельности, а именно: нитазол, фуразолидон и хлортетракциклин определяют спектрофотометрически, выделяя только один из них в анализируемой пробе, путем обработки пробы растворителем, снятия электронных спектров и расчета количества комнонента, Фуразолидон или биоветин (смесь хлортетрациклина, его кальциевой соли и инертных наполнителей) анализируют, кроме того, фотометрически путем растворения анализируемой пробы в органическом или неорганическом растворителе, измерения оптической плотности каждого полученного раствора и расчета количества комнонента при помощи калибровочного графика 1.Недостатком известных способов являются поочередный анализ каждого компонента из-за невозможности избирательного определения нитазола, фуразолидона, хлортетрациклина индивидуального или из биоветина в препарате нифулин за счет близкого расположения полос поглощения каждого компонента на спектрах, кроме того, один из компонентов - кальциевая соль хлортетрациклина в биоветине не растворима в органических растворителях, а другие не растворимы в воде, т. е. невозможно подобрать общий растворитель и получить однородный раствор, следовательно, один изкомпонентов или его часть остаются вне сферы определения, что. снижает точность определения компонентов нифулина (ошибка + 20 - 50%).Наиболее близким к изобретению является способ количественного определения компонентов нифулина (нитазола, фуразолидона и хлортетрациклина индивидуального), включающий обработку анализируемой пробы (точная навеска 0,025 г) при нагрева5 а 15 20 25 30 35 40 45 50 55 3нии (80 - 85 С), измерение оптической плотности раствора Р (при длинах волн Х= 345, 357, 370, 384 нм) и расчет количества компонентов, причем обработку анализируемой пробы проводят этанолом с получением раст вора всех компонентов, а расчет количества каждого компонента осуществляют с использованием номограммы для трехкомпонентной системы (номограмму строят предварительно на основе экспериментальнои обработки ряда стандартных растворов каждого компонента и расчета величин с. Р=Р 5 - Р 37, и ЬР - Р 35, - Рз 4 с последующим нахождением по номограмме точки, соответствующей составу пробы 2.Известный способ количественного определения компонентов нифулина является несовершенным, так как он не применим для анализа нифулина, содержащего в качестве одного из компонентов широко используемый в промышленности биоветин полупродукт производства хлортетрациклина (смесь хлортетрациклина, его кальциевой соли и инертных наполнителей) ввиду того, что составляющая биоветина кальциевая соль хлортетрациклина не растворима в этаноле, поэтому количество хлортетрациклина, связанное в кальциевой соли, не поддается определению и, следовательно, точность определения. всех компонентов по номограмме не достаточна (ошибка + 50 О/о).Целью изобретения является повышение точности определения каждого компонента,Поставленная цель достигается тем, что согласно способу количественного определения компонентов нифулина, включающему обработку анализируемой пробы при нагревании с приготовлением раствора и измерение оптической плотности раствора, обработку анализируемой пробы проводят дихлорэтаном до получения суспензии, от которой отделяют нерастворившийся компонент, который растворяют в соляной кислоте с последующим измерением оптической плотности раствора.На фиг, 1 дана номограмма для двух. компонентной системы; на фиг. 2 - калибровочный график.Пример. Количественное определение компонентов нифулина многократно проводят в лабораторных условиях.Для этого методом средней пробы берут навески нифулина по + 0,0471 - 0,0491 г содержащие:анализируемая проба - нитазол, фуразолидон, хлортетрациклин индивидуальный;11 анализируемая проба - нитазол, фуразолидон, биоветин.Затем анализируемые пробы переносят в мерные колбы емкостью 25 мл и обрабатывают дихлорэтаном при нагревании на кипящей водяной бане в течение 3 - 5 мин с получением суспензий (содержащих растворенные в дихлорэтане нитазол и фуразолидон и нерастворившийся компонентхлортетрациклин индивидуальный или биоветин)которые охлаждают и их объем доводят до метки.дихлорэтаном.После этого от суспензий фильтрованиемотделяют нерастворившийся компонентхлортетрациклин индивидуальный или биоветин, который остается на фильтре.По 0,5 мл фильтрата (раствора нитазола и фуразолидона в дихлорэтане) изкаждой колбы помещают в другие мерныеколбы емкостью 25 мл и разбавляют до метки дихлорэтаном. Затем на фотоколориметре ФЭК - 55 М измеряют оптическую плотность этих растворов при длинах волн Л =365 и 340 нмДля расчета количества компонентов(нитазола и фуразолидона) используют предварительно построенную номограмму длядвухкопмонентной системы (фиг. 1), длячего готовят растворы нитазола (1 раствор)и фуразолидона (11 раствор), в дихлорэтане по 25 мл с концентрацией 0,4 г/л.Из 1 раствора путЬм разбавления дихлорэтаном получают ряд растворов с концентрацией 1,0 Х 10 з - 1 О,ОХ 10 г/л. Затем на фотоколориметре ФЭК - 55 М измеряют оптическую плотность (Р) этих растворов при длинах волн Л = 365 и 340 нм,По полученным данным строят ось ОА(фиг, 1) .Аналогично с помощью ряда растворов,полученных путем разбавления дихлорэтаном из 11 раствора, строят ось ОВ.Гочки на осях ОА и ОВ, соответствующие равным концентрациям компонентов(нитазола и фуразолидона), соединяют прямыми линиями. Одну из этих линий (например СР) разбивают на десять равныхчастей и через эти точки из начала координат (0) проводят лучи, соответствующиесмесям с равными относительными концентрациями,Например, Рз 65 = 0,340; Р 34 а -- 0,438.На пересечении прямых Р 365 и Р лежитточка К.Через эту точку проводят линию параллельно СР. На ее пересечении с осью ОАили ОВ получается суммарная концентрация компонентов (нитазола и фуразолидона). Через точки К и О проводят прямую допересечения с СР, с которой считывают соотношение компонентов (нитазола и фуразолидона),Расчет количества нитазола и фуразолидона осуществляется по формуле 25 х С05 х Ягде Х - содержащие нитазола или фуразолидона, /о,25 - объем раствора анализируемойпробы, мл;5С - содержание нитазола или фуразолидона в фотометриуемом растворе, г, найденное по номограмме;0,5 - объем аликвоты, мл;Я - навеска нифулина, г,Оставшийся на фильтре нерастворившийсся компонент (хлортетрациклин или биоветин) растворяют в 1 мл 2 н, раствора соляной кислоты. Полученный раствор переносят в мерную колбу емкостью 25 мл, и егообъем доводят до метки дистиллированнойводой. После этого по 1 мл приготовленногораствора помещают в две мерные колбы емкостью 50 мл, причем в одну из них (опытную) добавляют 5 мл 2 н. раствора солянойкислоты, а в другую (контрольную) - 5 млдистиллированной воды. Колбы нагревают,на кипящей водяной бане 5 мин и затембыстро охлаждают. В контрольную колбудобавляют 5 мл 2 н. раствора соляной кислоты и содержимое в обеих колбах, разбавляют дистиллированной водой до метки. Затем на фотоколориметре ФЭК - 55 М придлине волны л = 268 нм измеряется оптическая плотность раствора из опытной колбы, причем в качестве стандарта используют раствор из контрольной колбы.Для расчета количества хлортетрациклина индивидуального или из биоветинаиспользуется предварительно построенныйкалибровочный график (фиг, 2), для чегоберут навеску кристаллического хлортетерациклина гидрохлорида и растворяют в 0,01 н.раствора соляной кислоты с таким расчетом, чтобы получился раствор с содержанием хлортетрациклина 1 мг/мл. Из этогораствора путем разбавления дистиллированной водой готовят серию стандартныхрастворов, содержащих 25, 50, 75, 100 и200 Ед/мл хлортетрациклина. Затем в двемерные колбы емкостью 50 мл вносят по1 мл одного из стандартных растворов,причем в одну (опытную) добавляют 5 мл2 н. раствора соляной кислоты, а в другую(контрольную) - 5 мл дистиллированнойводы. Обе колбы в течение 5 мин нагреваютна кипящей водяной бане, а затем быстроохлаждают до комнатной температуры. После охлаждения в контрольную колбу добавляют 5 мл 2 н. раствора соляной кислотыи объемы растворов в обеих колбах (опытной и контрольнй) добаводят до метки дистиллированной водой. Содержимое колб перемешивают и измеряют оптическую плотность раствора из опытной колбы при длиневолны Л= 268 нм, причем в качестве стандарта используется контрольная проба,Аналогично обрабатываются остальныерастворы из серии первоначально приготов ленных стандартных растворов.По экспериментально полученным данным строят график зависимости оптическойплотности раствора (0) от концентоациихлортетрациклина в растворе (С):В = 1(С), представляющий собой прямую проходящую через начало координат (фиг. 2).Для определения концентрации хлортетрациклина в исследуемом растворе после измерения его оптической плотности, это значение откладывают на оси ординат 1 Д калибровочного графика; проводят прямук линию параллельно оси абсцисс до пересе.чения с прямой 0 =1(С). На пересечении этих линий получают точку А, из которой 0 .опускают перпендикуляр на ось абсцисси на этой оси находят значение соответствующее концентрации хлортетрациклина в растворе.Расчет количества хлортетрациклинаиндивидуального или из биоветина осуществляют по следующей формуле Сх 26 где х20С Как видно из таблицы, точность опреде ления каждого компонента нифулина предлагаемым способом в сравнении с известным значительно повышается: если по известному способу ошибка определения (относительное отклонение) может достигать 4073,60 О/о, то по предлагаемому способу она не превышает + 0,20 - 2,40%.Использование предлагаемого способаколичественного определения компонентов нифулина (нитазола, фуразолидона, хлортетрациклина индивидуального или из био ветина) в сравнении с известным способомобеспечивает возможность определения компонентов нифулина в случае применения в качестве одного из них как хлортетрациклина, так и биоветина, причем точность определения каждого компонента повышается в среднем в 50 раз,Экономический эффект от использованияпредлагаемого способа количественного определения компонентов нифулина составляет 80960 р/год за счет высвобождения 2,75 т 55 одного из компонентов нифулина - индивидуального хлортетрациклина при его замене на биоветин.- содержание хлортетра ци клина,Ед/мг;- содержание хлортетрациклина вфотометрируемом растворе, Ед/мл,найденное по калибровочномуграфику;2525 - объем раствора анализируемойпробы, мл;Д -навеска нифулина, мг.Одновременно проводят количественноеопределение компонентов нифулина (нитазола, фуразолидона, хлортетрациклина инз 0 дивидуального или из биоветина) известным способом.Результаты определения приведены в таблице.О1 о о 1 1 Ех о сС -Ф С о 1 1 1 1 11 11 ЕБС дЭ Эа ес 0 с 0 С 11 11 1е1 1 Е ЕааСо-хСФЕх 1-1 1Г 1 11 1 1 1 1 Е ЕаСе 1 СО 01Ф сС 1 11 1 1 11 11 1 11 о е1 Е Т 11 Т 1 О Е 15 1 1- 1Сс ВХ 1 Е Ф 11 5 1 1Се Е 1а -.1 - С 111 Ф Сс 1 5 11Ф .О 1аБ СОЕе ксеь1 Х 1 Б Ц Е 1 1 11 ао 1 Б Е С ем м 1 5 ф 1 1 1 11 Е 6 Ес сое асс ое а1С Е С11 1л О1о о1во о 1 1 1 1 Ю 1 ц,о 1 М 1 л1 1 1 1 Ю 1 С 1 СС1 1 1 1 1 СО 1Формула изобретения Способ количественного определения ком. понентов нифлина, включающий обработку анализируемои пробы при нагревании с приготовлением раствора и измерение оптической плотности раствора, отличающийся тем, что, с целью повышения точности, обработку анализируемой пробы проводят дихлорэтаном до получения суспензии, от которой отделяют нерастворившийся компонент, который растворяют в соляной кислоте с последующим измерением оптической плотности раствора,Источники информации,принятые во внимание при экспертизе 1. Фармацевтический журнал, 1972, т. 27.1, с. 32 1 украинский).2. Колмогорова И. В., Марек Эл. М. Спектрофотометрическое определение компонентов нифулина. Химико-фармацевтический журнал, 1977, т. Х 1, с. 134 - 136.А.Макарокас СоставитеТехред А. БТираж 887 Редак Заказ И ПИ Госудпо делам и113035, Москва,илиал ППП Патент р М. Дылын775/58ВНИ рственного ко зобретений иЖ - 35, Раушск , г. Ужгород,Коррект Подпис итета СССР открытий я наб д. 4/5 ул. Проектная,Ю. Макаренк