Адъювант для противоящурной вакцины

3 1Изобретение относится к ветеринарной вирусологии, в частности к масляным адъювантам, и может быть использовано в научно-исследовательской работе в биологической промышленности при разработке и производстве противоящурной вакцины,Цель изобретения - снижение реактогенности препарата,Адъювант для противоящурной вакцины включает смесь масляной основы и эмульгатора. В качестве масляной основы содержит белое гидрированное масло при следующем соотношении ингредиентов, мас, .Белое гидрированное масло 85-90 Эмульгатор 10-15В качестве эмульгатора можно использовать либо Спан, либо эмульгатор ВНИИЖ.Белое гидрированное масло БНМ-бм имеет характеристическую вязкость около 6 мм"/с при 50 С, Оно представляет собой бесцветную без вкуса и запаха маслянистую жидкость с вязкостью около 15 мм/с при 20 С и температурой застывания не выше - 10 С, Масло БГММ является продуктом глубокого гидрирования нефтяного сырья при высоком давлении водорода (15-30 МПа), что обеспечивает благоприятный углеводородный состав масла и глубокую степень его очистки от нежелательных соединений: ароматических углеводородов, гетеросоединений и смол, Глубина очистки характеризуется остаточным содержанием ароматических углеводородов,- В табл, 1 приведено сравнение масла БГММ с наиболее известным высококачественным зарубежным аналогом - минеральным маслом Маркол 52 фирмы Экссон (США),Как видно из табл, 1, масло БГММ имеет более благоприятный состав по сравнению с маслом марки Маркол 52, так как согласно требованиям, предъявляемым к маслам для инъекций, в нем отсутствуют углеводороды с числом атомов углерода 16.Масло БГММ нетоксично, не разрушает белковые антигены, не дает остаточных количеств в тушах животных, не вызывает осложнений (гранулем, абсцессов, воспалений) в месте введения, оно легко инъецируется и застывает при температуре ниже температуры хранения эмульсионных и биопрепаратов,П р и м е р 1, Состав адъюванта, мас,/,: Белое гидрированное масло 90 Эмульгатор ВНИИЖ 10Адъювант готовят следующим образом. Навеску эмульгатора Спан 80 или ВНИИЖ растворяют в масле БГММ в оптимальном 797204 4соотношении, Полученный раствор стерилизуют известными методами: либо нагреванием в сушильном шкафу до 120-130 С втечение 2 ч, либо путем стерилизующейфильтрации с помощью пластин марок "СФ",ЕК, УАМи т.д. при комнатнойтемпературе, Полученный адъювант представляет собой прозрачную маслянистуюжидкость светло-коричневого цвета, допускается слабая опалесценция, Адъювант разливают в стерильные флаконы и хранят прикомнатной температуре до момента использования,П р и м е р 2, Состав адъюванта, мас,;белое гидрированное масло 88; эмульгаторВНИИЖ 12. Адъювант готовят так же, какв примере 1,П р и м е р 3. Состав адъюванта, мас,:белое гидрированное масло 85: эмульгаторВНИИЖ 15,Адъювант готовят так же, как в примере1, П р и м е р 4. Состав адъюванта, мас./,: белое гидрированное масло 90;.эмульгаторСпан 80 10,Адъювант готовят так же, как в примере1,П р и м е р 5. Состав адъюванта, мас,белое гидрированное масло 88;эмульгатор Спан 80 12,Адъювант готовят так же, как в примере1.П р и м е р 6, Состав адъюванта, мас, :белое гидрированное масло 85; эмульгаторСпан 80 15.Адъювант готовят так-же, как в примере1.Эффективность предлагаемого адъювантав сравнении с прототипом проверена в рядеопытов в составе эмульсионной противоящурной вакцины АВо всех случаях применения адъювантаустойчивость эмульсий сохраняется в течение3-5 месяцев, а вязкость не превышает 1400мм /с. Образцы вакцины обладаютустойчивостью и центр ифугиро ванию ихорошей текучестью при температурах хранения 1-8 С,В табл, 2 и 3 приведены результатыоценки реактогенности предлагаемого адъюванта и эмульсионной противоящурнойвакцины А на его основе в опытах налабораторных и сельскохозяйственных животных,Реактогенность определяли как процентприроста массы конечности и в результатевоспалительной реакции.Данные табл. 2 и 3 свидетельствуют отом, что предлагаемый адъювант и вакцинаФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 5 1 на его основе обладают меньшей реактогенностью по сравнению с прототипом.Иммуногенную активность противоящурной вакцины из вируса Аоценивали в опытах на лабораторных и сельскохозяйственных животных путем установления 5070- ной иммунизирующей дозы (ИМД 50) на взрослых белых мышах (21 день после прививки) и качественным методом на свиньях массой 30-35 кг через 10 дней после иммунизации,Результаты опытов представлены табл, 4 и 5,Адъювант для противоящурной вакцины, включающий смесь масляной основы и эмульгатора, отличающийся тем, что, с целью снижения реактогенности вакцины, в качестве масляной основы адъювант содер 797204 бДанные таблиц 4 и 5 свидетельствуют овысокой иммуностимулирующей активности предлагаемого адъюванта, так как значения ИМД 5, вакцины на его основе в опыте на мышах несколько ниже, чем у вакцины с адъювантом-прототипом, а в опыте на свиньях получена полная защита животных после иммунизации препаратом с предлагаемым адъювантом.По сравнению с прототипом использование масла БМГ-бМ в составе предлагаемого адъюванта позволяет снизить реактогенность последнего и полученной на его эмульсионной противоящурной вакцины,жит белое гидрированное масло при следующем соотношении компонентов, мас,0: Эмульгатор 10-15 Гидрированное масло Остальное1797204Таблица 1Углеводородный состав масел Маркол 52 и БТММ данные масс - спектроскопии ВНИИНП),Таблица 2Реактогенность адьювантав в опытах на мышах1797204 10 Таблица Э Местная реакция у сельскохозяйственных животных после введения эмульсионной противоящурной вакцины с различными вдъювантами Реактогенность Доза (мл) Кол-во жив-х Вид животных Состав масляноСоединительноБТММ - 85 тканевые гранускот свиньи крупный соединительнотканевые гранурогатый скотлемы размеромоколо 10 смэ свиньи КРС лемы размеромоколо 80 см свиньи го адьюванта(предлагаемыйадьювант) Полимер 2 - 85Спан 80, -15п рототип) крупныйрогатый аппо месту введе ния)лемы размеромоколо 10 см гранулемы размером от 1 до 21 см гранулемы раэ. мером от 5 до 20 см Соединительнотканевые грануСоединительнатканевые гранулемы размеромот 1 до 30 смэ12 1797204Таблица 4. Иммуногенная активность эмульсионных вакцин иэ вируса Агг с раэличными адъьовантами в опыте на мышах=Та бл и ца 5 Иммуногеннвя активность противоящурной вакцины в опытах на свиньях Заказ бп ПодписноеВНИИПИ, Рег, ЛР йа 040720113834 ГСП, Москва, Раушская наб., 4/5 121873, МоскваБережковская наб., 24 стр. 2.Производственное предприятие Патент