Способ получения лечебного экстракта

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК БР Т йственна ш, А,Б.Абрамоваанво СССР1952. обретения - пов особа, а также ув й актиеностиние эффекчение анти- лучаемого ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМСТВО СССР(56) Авторское свидетельстКт 96478, кл. А 61 К 35/78,Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для получения веществ, обладающих антитоксической активностью,и применяться при изготовлении препаратов ветеринарного назначения,Известен способ получения лечебного препарата из биологического сырья, который заключается в том, что в качестве биологического сырья используют листья алоэ, Их предварительно консервируют, выдерживая в темноте несколько суток при температуре +4-8 С, промывают дистиллированной водой. очищают от зубчиков и концов, измельчают. настаивают в дистиллированной воде при комнатной температуре, затем несколько минут кипятят, фильтруют, добавля от дистиллированной воды, снова кипятят и фильтруют, разливают в ампулы, запаивают и автоклавируют. Недостатком известного способа явля ется его невысокая эффективность и низки антитоксический эффект получаемого пр этом продукта. 51)5 А 61 К 35/00, 35/78 2ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕЧЕБНО(54) СПОСОБ ГО ЭКСТРАКТА(57) Использование: технология получения ветпрепаратов. Сущность изобретения: куколки шелкопряда измельчают, заливают дистиллированной водой в соотношении 1;5, доводят до кипения. экстракт сливают, в биомассу заливают воду в соотношении 1:3, экстракт сливают, доливают воду в соотношении 1:2, все три фракции экстракта смешивают, фильтруют, выдерживают в течение 18 - 20 ч при 2 - 5 С, снова фильтруют, доливают натрий хлористый. разливают во флаконы и стерилизуют. 4 табл,Цель из ышетивности сп елитоксическо пбпрепарата.П р и м е р 1. Было взято 100 г куколок шелкопряда, которые тщательно измельчили и смешали с 500 мл дистиллированной воды, Затем смесь нэгревали до температу ры кипения. Полученный экстракт сливали в Ю отдельный сосуд, а биомассу куколок сме шивали с 300 мл дистиллированной воды и нагревали до температуры кипения, Пол- ,( ) ученный экстракт отделяли от биомассы и ) смешивали с первичным экстрактом, а биомассу куколок - с 200 мл дистиллированной с воды и нагревали до кипения. Полученную ,ф третью фракцию смешивали с предыдущи-- д ми экстрактами, Эту смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали для отделения биомассы куколок, Затем фильтрат выдерживали 18 часов при температуре +2 С и при этой же температуре повторно фильтровали для отделения осадка. Обьем фильтрата доводили дистиллировэнной во 1787439дой до 1 л, В полученный экстракт добавляли натрий хлористый до получения изотонического раствора. после чего разливали во флаконы и стерилизовали, Стерильный экстракт разводили физиологическим раствором в соотношении 1:20 и инъецировэли подкожно десяти белым мышам в дозе 0,1 мл наголову однократно, Десяти контрольным животным подкожно вводили такую же дозу:физиологического раствора. Через семь дней всем мышам вводили летальную дозу стрихнина, В результате этого, все контрольные мыши погибли. спустя 11,1 . 1,39 минуты после затравки, Мыши, которых обрабатывали экстрактом из куколок шелкопряда. разбавленным физиологическим раствором в соотношении 1;20 в дозе 0,1 мл однократно, имели продолжительность жизни после затравки больше, чем контрольные (16,25 ": 1,55 минуты при Р/0,05), Кроме того, 4 мыши (40%) опытной группы выкили. Это говорит о высоком уровне антитоксического действия экстракта из куколок шелкопряда, приготовленного заявляемым способом. Антитоксическую активность оценивали также по парабиотическому и антитоксическому строфантинному тестам (Тканевая терапия / Под ред, Н,А. Пучковской. - КЗдоровье, 1975, - 207 с), Парабиотический тест заключался в фиксации скорости выхода изолированных портняжных мышц лягушки в изучаемом растворе из состояния парабиоза, вызванного 1% раствором хлористого калия, Контрольным раствором служил раствор Рингера, Мышцы, помещенные в экстракт из куколок шелкопряда в разведении физиологическим раствором 1:20, выходили из состояния парабиоза через 5,71,+ 0,94 минуты, а контрольные - через 12,51 4- 1,00 минуту (разница достоверна при Р/0,001),Строфантинный тест заключался в обработке лягушек экстрактом из куколок шелкопряда, разбавленным физиологическим раствором в соотношении 1;20 в дозе 0,1 мл на одну лягушку однократно. Контрольным лягушкам инъецировали физиологический раствор в такой ке дозе. Через 7 дней всем лягушкам ввоцили строфантин из расчета 0,2 мл на 10 г живой массы, вскрывали грудную полость и наблюдали за продолжительностью работы сердца, Установлено, что у контрольных лягушек сердце сокращалось на протяжении 24,62+. 9,12 минуты после инъекции отравляющей дозы строфантина, а у лягушек, обработанных препаратом приготовленным заявляемым способом - на протяжении 60 и 6 ол ее ми нут (Р / О. 001).40 45 50 При условиях, отличных от предлагаемых (меньшее число экстракций, меньшая 51015202530 Антитоксические стрихнинный (1 тест), строфантинный (2 тест) и парабиотический (3 тест) тесты говорят о высоком уровне биологической активности лечебного экстракта из куколок шелкопряда, приготовленного заявляемым способом, вообще и о его анти- токсическом эффекте, в частности,П р и м е р 2. Экстракцию из куколок шелкопряда проводили, как и в примере 1, После этого экстракт выдерживали 19 часов при температуре 3 С и при такой же температуре фильтровали. При таких условиях антитоксическая активность экстракта была следующей;1 тест (см,пример 1) - 16,80 +. 1,43 минуты при Р/0,05 (продолжительность жизни мышей после инъекции летальной дозы стрихнина), выжило 40% животных.2 тест - скорость выхода изолированных мышц лягушек из состояния парабиозасоставила 5,20 ч 0,95 минуты (Р/0,001),3 тест - продолжительность работы сердца после введения отравляющей дозы строфантина - 60 и более минут(Р/0,001).П р и м е р 3. Экстракцию проводили, как и в примере 1, После этого экстракт выдерживали 20 часов при температуре 5 С и при такой же температуре фильтровали, При этом антитоксическая активность экстракта характеризовалась следующими показателя ми;1 тест - продолжительность жизни мышей после инъекции летальной дозы стрихнина 16.89 + 1,37 минуты (Р/0,05), выжило 40% мышей,2 тест - скорость выхода изолированных мышц лягушек из состояния парабиоза 5.38 + 0,75 минуты (Р/0,001),3 тест - продолжительность работы сердца после введения отравляющей дозы строфантина 60 и более минут (Р/0,00),Согласно предлагаемому способу биомассу куколок экстрагировали дистиллированной водой путем нагрева до температуры кипения в три последовательных приема. При такихусловиях происходитнаиболее полная экстракция из биомассыкуколок шелкопряда комплекса биологически активных веществ (табл, 1). температура экстракции),не, достигается максимальный выход экстрагируемых веществ, При большем количестве экстракций (при одинаковом выходе экстрагируемых веществ) увеличивается трудоемкость процесса,Первая экстрэкция, согласно заявляемому способу, проводилась в соотношении1787439 Таблица 1 Влияние количества экс ракций и температурного режима на извлечение биологически активных веществ из куколок шелкопрядан 1:5, вторая - 1:3, третья - 1:2 (масса куколок шелкопряда к массе дистиллированной воды). При таком соотношении реагентов достигается максимальный процент выхода экстрагируемых веществ, необходимый для промышленной технологии получения экстракта (табл. 2).Полученные три фракции экстракта смешивают, фильтруют при комнатной температуре для отделения биомассы измельченных куколок, выдерживают 18 - 20 часов при температуре не выше +5 С для образования осадка, который негативно сказывается на качестве экстракта (табл, 3) и при этой же температуре повторно фильтруют,Согласно данным табл, 3, при режиме 18 - 20 часов и выдержке при температуре не выше 5 С наблюдается полное отделение осадка, Дальнейшее снижение температуры и увеличение продолжительности выдержки нецелесообразно, т.к, дает аналогичный эффект, При более высокой температуре осадок, который ухудшает органолептические качества экстракта, образуется не полностью,Различные режимы экстракции влияют также на биологическую (антитоксическую) активность экстракта из куколок шелкопряда (табл. 4),Анализ данных таблицы 4 показывает, что антитоксический эффект лечебного экстракта из куколок шелкопряда, приготовленного заявляемым способом, наивысший по сравнению с препаратами, полученными при отличных от предлагаемого режимах экстракции: показатели антитоксической активности по стрихнинному (1 тест - продолжительность жизни мышей после введения летальной дозы стрихнина в минутах - выживаемость мышей в , парабиотическому (2 тест - скорость выхода изолированных портняжных Мышц лягушкииз состояния парабиоза в минутах) и строфа нтин ному тестам (3 тест - п родолжител ьность работы сердца лягушек после5 инъекции отравляющей дозы строфантина вминутах) самые высокие, если экстракциюпроводить предлагаемым способом в трипоследовательных этапа и выдерживать притемпературе не выше+5 С в течение 18 - 2010 часов с последующей фильтрацией при этойже температуре, Способ прототипа для приготовления препарата из куколок шелкопряда также менее эффективен, так как даетменьшую антитоксическую активность, как15 и экстракт алоэ, приготовленный согласноА,С, М. 96478,Таким образом, экстракция куколокшелкопряда предлагаемым способом даетвозможность достигнуть повышения эффек 20 тивности известного способа и увеличенияантитоксического эффекта конечного продукта.Формула изобретенияСпособ получения лечебного экстракта,25 включающий измельчение исходного сырья,экстракцию дистиллированной водой, фильтрацию, доведение дистиллированной водой до определенного объема, повторнуюфильтрацию, разлив. закупоривание и авто 30 клавирование, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,с целью повышения антитоксической активности препарата, в качестве исходногосырья используют куколки шелкопряда, экстра кцию осуществляют в три приема путем35 нагрева до температуры кипения; сначаласырье экстрагируют в соотношении с водой1:5, полученный экстракт сливают, затем доливают воду в соотношении 1:3, экстрактслвают, после чего доливают воду в соотно 40 шении 1;2, причем три фракции экстрактасливают вместе, фильтруют, выдерживают втечение 18-20 ч при 2 - 5 С.1787439 Продолжение табл,1Таблица 2 Влияние соотношения компонентов в процессе экстракции на выход экстрагируемых веществТаблицаЗ Влияние продолжительности и температуры выдержки экстракта на образование осадка м е ч а н и е, "ч" - после фильтрации и повторного отстаивания осадок не образуется;"-" - пепле фильтрации и повторного отстаивания выпадает новый осадок.1787439 10 Таблица 4 Биологическая активность лечебного экстракта из куколок шелкопряда в зависимости от режима экстракции и в сравнении с прототипом10 15 20 25 Составитель В,ТрокозТехред М,Моргентал Корректор О. Юрковецкая Редактор Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 Заказ 21 Тираж ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5