Устройство для отбора жидких проб из аппаратов культивирования микроорганизмов

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 5 ц 5 0 01 И 1/1 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ЕЛЬСТ АВТОРСКОМУ С Изобрете ой технике,ыращивания ора прб из ф нокуляторов фологический ачества и св СО 2.Известно устройс культуральной жидкос тановкам выращивани танизмов, содержащ камеру с датчиками ан и свойств вещества, св ный клапан с трубоп воды, эжектор, подсо ра проб ее кус- икроорробоотборустановках с целью отореа кторов, тов на моря контроля , еН, рО 2 и ие относится к писпользуемой намикроорганизмоверментаторов, би посевных аппара анализ, а также д йств вещества рН во для отб и и контрол я аэробных ее измери ализаторов занную чер роводом дл диненный ельнуюкачество з запорподачиерез заОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(56) Авторское свидетельство СССРМ 472151, кл. С 12 В 1/06, 1973,Авторское свидетельство СССРМ. 812828, кл, С 12 В 1/06, 1981,(54) УСТРОЙСТВО ДЛЯ ОТБОРА ЖИДКИХПРОБ ИЗ АППАРАТОВ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ(57) Изобретение относится к пробоотборной технике, предназначенной для отборамикробиологических жидких проб на анализ из ферментационных аппаратов и биореакторов, он может найти применениена предприятиях микробиологической, медицинской,химико-фармацевтической и пищевой отраслях промышленности, а также влабораторной практике, Устройство содержит трубопроводы подачи пара и воды, дренажный и канализационный трубопроводыс запорными клапанами, вакуумирующеесредство и разделительную камеры, внутрикоторой установлена пробоприемная воронка, сообщающаяся посредством пробозаборного трубопровода и запорного Ы 1765746 А 1 клапана с аппаратом культивирования микроорганизмов и соединенная трубопроводом через запорный клапан с потребителем проб, сборник, подсоединенный дренажным трубопроводом и запорным клапаном к разделительной камере, подключенной запорным клапаном к паропроводу, бактерицидный фильтр. В качестве вакуумирующего средства используется разделительная камера, боковые стенки которой выполнены упругодеформируемыми, например, в виде гофр, при этом камера связана через запорный клапан и бактерицидный фильтр с атмосферой и расположена внутри теплоизолированной гидрокамеры, которая через запорные клапаны подключена к трубопроводам подачи пара и воды и к канализационному трубопроводу. Причем дренажный трубопровод после запорного клапана связан запорными клапанами с трубопроводом, соединяющим пробоприемную воронку с потребителем проб до запорного клапана, а те участки этих трубопроводов, которые находятся в гидрокамере, выполнены в виде компенсаторных петель, Это позволяет повысить надежность отбора проб и обеспечить их представительность, а также улучшить качества стерилизации устройства, 1 ил,порный клапан к трубопроводу для подачи пара, пробозаборный трубопровод.Недостатком данного устройства является низкая надежность работы парового эжектора при работе с культуральными жидкостями, Как известно, они содержат биомассу, углеводы, жиры, растворы солей, кислот и щелочей, на которых отрицательно сказывается воздействие пара, имеющего температуру в зависимости от регламента производства от 128 до 143 С; Так как эжектор непосредственно связан с ферментером, то культуральная жидкость, протекающая через него в циркуляционный трубопровод, т,е, становится непредставительной. Так углеводы, например меласса, при температуре свыше 100 С карамелизуются, а белок биомассы превращается в коагуляты, Отлагаясь на стенках эжектора в зоне разрежения, они под действием пара спекаются, образуя трудно удаляемый налет, который по мере накопления будет закупоривать выкидное отверстие эжектора, выводя его и все пробоотборное устройство из строя. Кроме того, связь ферментера с циркуляционным трубопроводом создает предпосылки для контаминации культу- ральной жидкости со стороны датчиков состава и свойств вещества,Указанные недостатки устранены в прототипе тем, что на линии между измерительной (выносной) камерой с датчиками анализаторов и свойств и качества вещества и ферментером установлена разделительная камера, сообщенная через запорный клапан с паропроводом, вакуумной линией с эжектором и дренажной линией с запорным клапаном со сборником, связанным посредством трубопровода и запорного клапана с измерительной камерой, подсоединенной к канализационному трубопроводу переливным патрубком,Однако и это устройство имеет существенные недостатки, Несмотря на то, что эжектор устройства непосредственно не связан с ферментером, его работа при отборе проб культуральной жидкости также ненадежна. При поступлении культуральной жидкости в разделительную камеру и далее в воронку и трубопровод, внутри которых работающим эжектором создается разрежение, ее капли будут попадать в вакуумную линию, а оттуда - в эжектор. В момент отсечения струей пара культуральной жидкости при отборе пробы и после будет происходить ее разбрызгивание и стекание по стенкам разделительной камеры, в результате чего жидкость будет также попадать в вакуумпровод и эжектор, ухудшая его работу. Таким образом, как и в известном уст 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 ройстве, под действием перегретого пара будет происходить спекание биомассы, оставшейся на внутренней поверхности разделительной емкости, с сопутствующими отрицательными последствиями, а также спекание биомассы внутри трубопровода, котбрый при закрытом клапане паром нагревается, но не продувается, что ухудшает качество стерилизации элементов в отдельности и устройства в целом. Кроме того, данная схема устройства пригодна лишь для установок с ферментерами большой вместимости, где потери на слив культуральной жидкости при вытеснении ею воды из измерительной камеры практически не сказываются на выходе целевого продукта. Но в биореакторах емкостью 25 л и менее это недопустимо, особенно при культивировании клеток на микроносителях из-за большой стоимости и ценности самой среды.Цель изобретения - повышение надежности работы и представительности пробы.Поставленная цель достигается тем, что в известном устройстве, содержащем термоизолированную разделительную камеру с пробоприемной воронкой, сообщенную посредством трубопроводов с запорными клапанами с аппаратом культивирования, потребителем проб и со сборником, трубопроводы подачи пара, воды и дренажный с запорными клапанами, и вакуумирующее средство, последнее выполнено в виде полого цилиндрического гофрированного упругодеформируемого элемента, размещенного в разделительной термоизолированной камере, полость которого связана с трубопроводом подачи пара, дренажным трубопроводом и через запорный клапан и бактерицидный фильтр с атмосферой, а пробоприемная воронка размещена в полости упруго деформируемого элемента, при этом дренажный трубопровод через запорный клапан подключен к трубопроводу, соединяющему воронку с потребителем проб в точке между пробоприемной воронкой и запорным клапаном, причем участки указанных трубопроводов, размещенные в термоизолированной камере, выполнены с компенсаторными петлями, а термоизолированная камера сообщена с трубопроводом подачи воды.Выполнение вакуумирующего средства в виде полого цилиндрического гофрированного упругодеформируемого элемента, размещенного в термоизолированной разделительной камере, а также связь внутренней его полости посредством запорных клапанов с трубопроводом подачи пара, дренажным трубопроводом и через бактерицидный фильтр с атмосферой позволяетисключить из устройства ненадежное в работе с культуральными жидкостями средство - паровой эжектор, и тем самым повысить надежность работы. Этому также способствует. размещение пробоприемной воронки внутри упруго деформируемого элемента, подсоединенного через дренажный трубопровод запорным клапаном к трубопроводу, соединяющему воронку с потребителем проб в точке между пробоприемной воронкой и запорным клапаном, Чтобы дренажный трубопровод и трубопровод, соединяющий воронку с потребителем проб не препятствовали сжатию и растяжению упругодеформируемого элемента, участки указанных трубопроводов, расположенных в термоизолированной камере, выполнены с компенсаторными петлями.Кроме того, размещение упругодеформируемого элемента в термоизолированной камере, подсоединенной через запорные клапаны к трубопроводу подачи пара и канализационному трубопроводу, позволяет производить наружный нагрев вакуумирующего средства, который в сочетании с внутренним пропариванием резко повысить эффективность стерилизации (сократить время на ее проведение и улучшить качество стерилизации), При этом связь термоизолированной камеры через запорные клапаны с трубопроводом подачи воды и канализационным трубопроводом обеспечивает тщательную промывку внутренней полости упругодеформируемого элемента пароконденсатом, образующимся на его стенках при подаче холодной воды в термокамеру, когда она стерилизуется паром, что в равной степени относится к дренажному трубопроводу и трубопроводу, связанному с потребителем проб, которые, охлаждаясь, будут охлаждать пробоприемную воронку после прекращения подачи пара в разделительную камеру, образуя конденсат, Сброс промывочного пароконденсата и отработанного пара, содержащих убитых паром микроорганизмы, коагуляты и карамелизованные сахаросодержащие вещества из пробоприемной воронки и трубопровода, соединяющего ее с потребителем проб через запорный, дренажный трубопровод и сборник, обеспечивает более качественную стерилизацию, а также повышает представительность проб. Поскольку такой сброс производится минуя измерительную камеру, это сокращает потери микробиологической среды и улучшает эффективность отбора.И наконец, связь внутренней полости упругодеформируемого элемента посредством запорного клапана через бактерицид 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 ный фильтр с атмосферой дает возможность с соблюдением асептических условий отбора создавать внутри полости разрежение, обеспечивающее транспортировку жидкости из ферментера в пробоприемную воронку,На чертеже показано предлагаемое устройство.Устройство для отбора проб из аппаратов культивирования микроорганизмов состоит из вакуумирующего средства 1, выполненного в виде полого цилиндрического гофрированного упругодеформируемого элемента например, сильфона), расположенного внутри термоизолированной разделительной камеры 2. Внутри вакуумирующего средства 2 под пробозаборным трубопроводом 3 установлена пробоприемная воронка 4, которая сообщена посредством пробозаборного трубопровода и запорного клапана 5 с аппаратом культивирования микроорганизмов 6 (ферментером, биореактором, инокулятором и т,п.) и соединена трубопроводом 7 через запорный клапан 8 с потребителем проб 9 измерительной кюветой, ячейкой, приемной емкостью и т,д,), Наружный диаметр пробозаборного трубопровода 3, находящегося внутри упругодеформируемого элемента 1 над пробоприемной воронкой 4, меньше внутреннего диаметра воронки, что позволяет, входить ему в нее с гарантированным зазором, Для стерилизации пробозаборного трубопровода, пробоприемной воронки и внутренней полости вакуумирующего средства предусмотрен трубопровод подачи пара 10 с запорным клапаном 11. Трубопровод 10 внутри камеры 1 расположен над воронкой 4 на некотором расстоянии от нее и пробозаборного трубопровода 3,Для слива парового конденсата из внутренней полости вакуумирующего средства 1 предусмотрен дренажный трубопровод 12 с запорным клапаном 13, связанный со сборником 14, Дренажный трубопровод 12 после запорного клапана 13 еще соединен с трубопроводом 7 до запорного клапана 8 при помощи запорного клапана 15, Для сброса воздуха из упругодеформируемого элемента 1 служит запорный клапан 16, подключенный к трубопроводу подачи пара на входе элемента 1 и сообщенный через бактерицидный фильтр 17 с атмосферой,В свою очередь, термоизолированная камера 2 подсоединена запорным клапанами 18 и 19 соответственно к трубопроводам подачи пара 10 и воды 20, а также связана запорным клапаном 21 иканализационным трубопроводом 22 со сборником 14. Для неопасных для здоровья человека микроорга45 50 55 низмов сборник 14 - это обычная канализация, а для патогенных сред - это герметичная емкость - утилизатор.Устройство работает следующим образом.Перед отбором пробы производится паровая стерилизация пробоотборного тракта и связанных с ним трубопроводных коммуникаций. В этом положении клапаны 11, 13, 15, 19 и 22 открыты, а остальные - закрыты, Этим достигается стерилизация острым паром внутренней полости вакуумирующего средства 1, пробоприемной воронки 4, трубопровода 7, запорного клапана 8, подключенного к потребителю проб 9, а также сброс отработанного пара из вакуумирующего средства и термоизолированной камеры 2 через дренажный 12 и канализационный 2 трубопровода в сборник 14, Подача пара осуществляется в течение времени, определенного производственным регламентом. После окончания стерилизации подача пара прекращается для чего закрываются клапаны 11 и 19, и открывается клапан подачи воды 18, чем обеспечивается быстрое охлаждение вакуумирующего устройства 1, трубопровода 7 и связанных с ним пробоприемной воронки 4 и запорного клапана 8, а также сброс пароконденсата из перечисленных элементов устройства в сборник 14,Затем клапаны 13, 15 и 21 закрываются и открывается клапан 16, Под действием давления воды упругодеформируемый элемент 1 сожмется, часть воздуха из него вытеснится через клапан 16 и бактерицидный фильтр 17 в атмосферу. Поскольку диаметр пробоприемной воронки 4 больше диаметра пробозаборного трубопровода 3, расположенного в упругодеформируемом элементе 1 над воронкой, то он свободно войдет в нее, не препятствуя сжатию элемента 1, Также не будут препятствовать этому трубопроводы 7 и 12, выполненные с компенсаторными петлями, расположенными в термоизолированной камере 2, После сжатия элемента 1 клапана 16 и 18 закрываются, и открывается клапан 21. Под действием упругих сил в стенках гофр вакуумирующего устройства 1 и упругих компенсаторов трубопроводов 7 и 12 устройство 1 разожмется с образованием внутри его разрежения, При этом вода из камеры 2 сольется в сборник 14. Открываются клапаны 5 и 8. и микробиологическая среда из аппарата 6 за счет полученного перепада давления сифоном по трубопроводу 3 начнет поступать к потребителю проб 9. Через определенное время клапан 8 закрывается и открываются клапана 11, 13 и 5 10 15 20 25 30 35 40 15. Струей пара разрывается поток отбираемой жидкости, обеспечивая тем самым стерильность трубопровода 3 и в целом всей среды, находящейся в аппарате культивирования 6. После открытия клапана 11 сразу же закрывается клапан 5, Остатки микробиологической среды и конденсата сбрасываются в сборник 14. Затем открываются клапана 18 и 21 для поступления проточной воды термоизолированную камеру 2 на охлаждение вакуумирующего устройства 1 и сброса ее, что будет способствовать обильному образованию пароконденсата на внутренней поверхности упругодеформируемого элемента 1, внутри воронки 4, трубопроводов 7 и 12, что, в свою очередь, будет содействовать тщательной промывки их от коагулятов и карамелизованных углеводов. После промывки все клапана закрываются, и устройство возвращается в исходное состояние для приема пробы.Использование предложенного в изобретении устройства для отбора проб из аппаратов культивирования микроорганизмов с целью определения состава и свойств веществ, а также на морфологический анализ гозволит по сравнению с известным устройством (прототипом) исключить простои пробоотборной техники за счет исключения из нее ненадежного в работе с культуральными жидкостями парового эжектора, заменив его более надежным вакуумирующим средством; снизить расход микробиологической среды на слив непредставительной части пробы и тем самым обеспечить увеличение выхода целевого продукта; повысить качество проводимых анализов и контроля микробиологической среды благодаря тщательной промывке пароконденсатом пробоотборного тракта и его эффективной стерилизации,Формула изобретения Устройство для отбора жидких проб из аппаратов культивирования микроорганизмов, содержащее термоизолированную разделительную камеру с пробоприемной воронкой, сообщенную посредством трубопроводов с запорными клапанами с аппаратом культивирования, потребителем проб и со сборником, трубопроводы подачи пара, воды и дренажный с запорными клапанами и вакуумирующее средство, о т л и ч а ю щ ее с я тем, что, с целью повышения надежности работы и представительности пробы, вакуумирующее средство выполнено в виде полого цилиндрического гофрированного упругодеформируемого элемента, размещенного в разделительной термоизолированной камере, полость которого связана с трубопроводом подачи пара, дренажным трубопроводом и через запорный клапан, снабженный бактерицидным фильтром, с атмосферой, а пробоприемная воронка размещена в полости упругодеформируемого элемента, пои этом дренажный трубопровод через запорный клапан подключен к трубопроводу, соединяющему воронку с потребителем проб, в точке между пробоприемной воронкой и запорным клапаном, участки указанных трубопроводов, разме щенные в термоизолированной камере, выполнены с компенсаторными петлями, а термоизолированная камера сообщена с трубопроводом подачи воды,